產品簡介

DAPI，即4’,6-聯脒-2-苯基吲哚二鹽酸鹽，4’,6-Diamidino-2-phenylindole, dihydrochloride，也稱DAPI dihydrochloride，分子式為C₁₆H₁₅N₅·2HCl，分子量為350.25，CAS號28718-90-3。

DAPI是一種常用的可以穿透細胞膜的藍色熒光核酸染料，和雙鏈DNA結合后可以產生比自身強20多倍的熒光。和EB（ethidium bromide）相比，DAPI對雙鏈DNA的染色靈敏度要高很多倍。DAPI的更大激發(fā)波長為340 nm，更大發(fā)射波長為488 nm；DAPI和雙鏈DNA結合后，更大激發(fā)波長為358 nm，更大發(fā)射波長為461 nm。DAPI也可對RNA進行染色，染色機理是其可以選擇性嵌入“AU序列”并發(fā)出熒光。相比DAPI-dsDNA (Ex/Em=358 nm/461 nm)，DAPI-RNA具有較長的更大發(fā)射波長（500 nm），其熒光亮度僅有DAPI-dsDNA的20%。盡管DAPI不能通過活細胞膜，但可以通過提高濃度使之進入活細胞。

DAPI具有很高的光漂白承受水平，能用來檢測酵母線粒體DNA，葉綠體DNA，病毒DNA，Microplasm DNA以及染色體DNA。DAPI典型的藍色熒光特性使其非常普遍的搭配其他綠色、黃色或紅色熒光染料用于細胞生物學多色熒光標記技術，因此也常作為核酸和染色體的復染劑用于細胞凋亡檢測、RNA原位雜交、直接或間接免疫檢測等領域，其染色后可用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。

本產品為溶液，分為2種形式，濃度為5 mg/mL和即用型，即用型產品可直接用于固定細胞或組織的細胞核染色。5 mg/mL DAPI需稀釋后使用。用于細胞核染色時，推薦的DAPI工作濃度為0.5-10 μg/mL。

保存條件

冰袋運輸，-20oC避光保存，至少1年有效。

注意事項

1．DAPI對人體有一定刺激性，請注意適當防護。

2．熒光染料都存在淬滅的問題，建議染色后盡量當天完成檢測。

3．為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。

4．低濃度的DAPI不容易穿透細胞膜。

5．本產品僅用于科學研究，不得用于臨床診斷和治療，不得用于食品和藥品，不得存放于普通住宅內。

6．為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

使用說明

對于固定的細胞或組織樣品，固定后，適當洗滌去除固定劑。DAPI染色通常在其他染色的最后進行。如果不需要進行其它染色，則直接進行DAPI染色。

1．配制工作液：用雙蒸水或PBS稀釋母液，配制成所需要的工作的濃度（0.5-10 μg/mL）。

2．對于貼壁細胞或組織切片：加入適量DAPI染色液，覆蓋住樣品即可。

對于懸浮細胞：至少加入樣本體積3倍的染色液，混勻。

3．室溫放置3-5 min。

4．吸除DAPI染色液，用TBST、PBS或生理鹽水洗滌2-3次，每次3-5 min。

5．直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。激發(fā)波長360 nm，發(fā)射波長460 nm。細胞發(fā)生凋亡時，會看到凋亡細胞的細胞核呈致密濃染，或呈碎塊狀致密濃染。