一、試劑盒簡介
本試劑盒是基于硅膠柱吸附法開發(fā)的一款簡單、快速的microRNA的提取分離試劑盒,能有效的提取長度小于200 nt的小片段RNA,且不含有苯酚和氯仿等有毒物質(zhì)。高效的裂解液可裂解多種類型的細胞和組織,及采用優(yōu)化的硅基質(zhì)膜,減少蛋白、基因組DNA和其他雜質(zhì)對RNA產(chǎn)物的干擾,因此保證了產(chǎn)物的高產(chǎn)量和高純度。本試劑盒提取的microRNA可直接用于RT-PCR、RT-qPCR、Northern 雜交。
二、產(chǎn)品組分
Components | B0005-plus (50 Preps) |
Lysis Buffer | 30 ml |
Wash Buffer*1 | 6 ml |
Elution Bufferg | 5 ml |
gDNA Remover | 110 ml |
DNA Removing Spin Columns(with collection Tubes) | 50 Preps |
Spin Columns for RNA (with collection Tubes) | 50 Preps |
*1:Wash Buffer使用前須加入24毫升的無水乙醇,混勻后方可使用。
三、試劑保存條件
本試劑盒中所有的試劑建議均保存在室溫條件。
四、試劑盒特點
1、簡單快速:步驟簡單,10分鐘左右即可得到高純度的microRNA;
2、所需樣品少(得率高):可以提取低至2萬細胞或1 mg組織的RNA,大分子RNA及基因組DNA殘留少;
3、健康安全:不使用揮發(fā)性的酚、氯仿等有毒/致癌物質(zhì),無須DEPC滅菌,更有益于身體健康。
五、注意事項
1、Wash Buffer使用前須加入24毫升的無水乙醇,混勻后方可使用。
2、建議使用前把Elution Buffer分裝成3份,以減少污染的概率。
3、RNA提取需在室溫進行,提取過程中不可置于冰上。
4、建議用6孔板或者35 mm培養(yǎng)皿培養(yǎng)細胞,培養(yǎng)至合適的細胞密度進行RNA提取(建議培養(yǎng)至80%以上的細胞密度),不建議用100 mm培養(yǎng)皿培養(yǎng)的細胞直接裂解提取RNA,否則可能導致細胞裂解不充分或離心柱堵塞或?qū)е禄蚪M殘留。
5、在RNA提取過程的最后一步將RNA從硅基質(zhì)膜上洗脫下來時,一定要將洗脫液加到膜上,而不是側(cè)壁上,否則達不到溶解RNA的目的。
關(guān)鍵字: microRNA提取,試劑盒,細胞;