一、 試劑盒簡介
本試劑盒可從動物細胞或組織中快速提取總RNA。試劑盒基于硅膠柱純化技術(shù),提取過程中無需使用有毒的酚/ 氯仿抽提,全程僅需15 min。試劑盒中DNA Removing Spin Columns能夠有效去除裂解產(chǎn)物中的基因組DNA,另外,試劑盒中配有gDNA Remover膜上消化模塊,可有效去除基因組DNA 污染;RNA Spin Columns能高效的結(jié)合RNA,配以優(yōu)化后的Buffer溶液,使得到的總RNA純度高,無蛋白和其他雜質(zhì)污染,可用于RT-PCR、Real-time PCR、芯片分析等多種下游實驗。
二、產(chǎn)品組分
Components | B0004D (100 Preps) |
Lysis Buffer | 60 ml |
Wash Buffer*1 | 12 ml |
Elution Buffer | 5 ml |
gDNA Remover | 220 μl |
DNA Removing Spin Columns (with Collection Tubes) | 50 Preps |
Spin Columns(with collection Tubes) | 50 Preps |
*1:Wash Buffer使用前須加入24毫升的無水乙醇,混勻后方可使用。
三、試劑保存條件
本試劑盒中的Lysis Buffer、Wash Buffer、Elution Buffer、DNA Removing Spin Columns
和Spin Columns建議保存在室溫條件,gDNA Remover建議保存在-20℃冰箱中。
四、試劑盒特點
1、純度高:細胞裂解產(chǎn)物先經(jīng)過DNA吸附柱吸附去除基因組DNA,然后過RNA吸附柱,又使用gDNA Remover處理,這2步高效去除了混有在RNA的基因組DNA;
2、簡單快速:步驟簡單,10分鐘即可得到高純度的RNA;
3、適用性廣:使用本試劑盒提取的RNA可用于RT-qPCR、Northern Blotting、cDNA文庫構(gòu)建、RNA測序等各種實驗;
4、所需樣品少(得率高):可以提取低至2萬細胞或1 mg組織的RNA;
5、健康安全:不使用揮發(fā)性的酚、氯仿等有毒/致癌物質(zhì),無須DEPC滅菌,更有益于身體健康。
五、注意事項
1、Wash Buffer使用前須加入24毫升的無水乙醇,混勻后方可使用。
2、建議使用前把Elution Buffer分裝成3份,以減少污染的概率。
3、RNA提取需在室溫進行,提取過程中不可置于冰上。
4、建議用6孔板或者35 mm培養(yǎng)皿培養(yǎng)細胞,培養(yǎng)至合適的細胞密度進行RNA提?。ńㄗh培養(yǎng)至80%以上的細胞密度),不建議用100 mm培養(yǎng)皿培養(yǎng)的細胞直接裂解提取RNA,否則可能導(dǎo)致細胞裂解不充分或離心柱堵塞或?qū)е禄蚪M殘留。
5、在RNA提取過程的最后一步將RNA從硅基質(zhì)膜上洗脫下來時,一定要將洗脫液加到膜上,而不是側(cè)壁上,否則達不到溶解RNA的目的。
關(guān)鍵字: RNA提取,超純,試劑盒,細胞;