半纖維素（hemicellulose）含量試劑盒說明書
分光光度法50管/48樣
注 意 ：正式測定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
半纖維素（hemicellulose）含量試劑盒測定意義：
半纖維素是植物細(xì)胞壁中與纖維素緊密結(jié)合的多糖混合物，是構(gòu)成細(xì)胞初生壁的主要成分，廣泛存在于植物中，是一種新型可利用能源。
測定原理：
半纖維素經(jīng)酸處理后轉(zhuǎn)化成還原糖，與DNS生成紅棕色物質(zhì)，在540nm有特征吸收峰，吸光值大反映了半纖維素含量。
需自備的儀器和用品：
天平、40目篩，離心機(jī)，恒溫水浴鍋、烘箱、可見分光光度計(jì)、1mL玻璃比色皿。
試劑組成和配制：
試劑一：液體60mL×1瓶，4℃保存。
試劑二：液體12mL×1瓶，4℃保存。
試劑三：液體12mL×1瓶，4℃保存。
試劑四：液體10mL×1瓶，4℃避光保存。
樣品處理：
樣品80℃烘干至恒重，粉碎，過40目篩。
半纖維素（hemicellulose）含量試劑盒測定操作表：
| 空白管 | 測定管 |
樣本（g） |
| 0.02 |
試劑一（μL） |
| 1000 |
90℃水浴10min，25℃，8000g離心10min，棄上清 |
蒸餾水（μL） |
| 1000 |
充分混勻，25℃，8000g離心10min，此步驟重復(fù)3次，取沉淀105℃，烘干至恒重 |
試劑二（μL） | 200 | 200 |
90℃水浴1h，自然冷卻 |
試劑三（μL） | 200 | 200 |
混勻，25℃，8000g離心10min |
上清（μL） | 200 | 200 |
試劑四（μL） | 150 | 150 |
蒸餾水（μL） | 650 | 650 |
充分混勻，90℃水浴5min，自然冷卻，25℃，8000g離心10min |
于1mL玻璃比色皿中，測定540nm處吸光值A。分別記為A空白管和A測定管，ΔA=A測定管-A空白管。空白管只要做一管。 |
計(jì)算公式：
1、標(biāo)準(zhǔn)條件下測定的回歸方程為y = 0.3968x+0.0306，R2=0.9961；x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（mg/mL），y為吸光值。
2、半纖維素含量（mg/g 干重）=（△A-0.0306）÷ 0.3968÷（W÷V樣總）
= 1.01×（△A-0.0306）÷W
W：樣品質(zhì)量，g；V樣總：加入提取液體，0.4mL。
檢測限為1mg/g。
關(guān)鍵字： 半纖維素（hemicellulose）含;半纖維素（hemicellulose）含;
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