食品中亞硝酸鹽含量測(cè)定試劑盒說(shuō)明書
分光光度法50管/48樣
注 意 ：正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義：
在食品中，亞硝酸鹽可與肉品中的肌紅素結(jié)合而更安定，在食品加工業(yè)中作為保色劑，以維持肉制品的良好外觀，并防止肉毒梭狀芽孢桿菌的產(chǎn)生，提高食用肉制品的安全，但是人體長(zhǎng)期攝入亞硝酸鹽過(guò)量的食品，可誘發(fā)消化系統(tǒng)癌變。
食品中亞硝酸鹽含量測(cè)定試劑盒測(cè)定原理：
在酸性條件下，亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸反應(yīng)生成重氮化合物，再與N-1-萘基乙二胺形成紫紅色偶氮化合物，在540nm處有特征吸收峰。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
天平、研缽或勻漿器、水浴鍋、分光光度計(jì)、1mL玻璃比色皿、蒸餾水。
試劑組成和配制：
提取液一：液體50 mL×1瓶，室溫保存。
提取液二：液體50 mL×1瓶，室溫保存。
提取液三：液體50 mL×1瓶，室溫保存。
提取液四：粉劑 100 mg ×1支，室溫保存。
試劑一：液體25mL×1瓶，4℃避光保存。
試劑二：液體25mL×1瓶，4℃避光保存。
樣品處理：
稱取樣品約0.2g鮮重或0.05g干重，破碎，加入0.5 mL 提取液一，沸水浴15min，冷卻至室溫，加入0.5 mL提取液二，震蕩搖勻，加0.5 mL 提取液三，用鑷子加少量粉劑四（約1 mg），靜置30min，25℃，8000g離心15 min，取上清液待測(cè)。
。
測(cè)定步驟和操作表
| 測(cè)定管 | 空白管 |
蒸餾水（μL） |
| 350 |
樣品（μL） | 350 |
|
試劑一（μL） | 325 | 325 |
試劑二（μL） | 325 | 325 |
混勻，25℃靜置15min，于微量石英比色皿/96孔板中檢測(cè)540nm處吸光值A。 △A=A測(cè)定 - A空白 |
注意：空白管只需測(cè)定一次。
亞硝酸鹽含量計(jì)算：
標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為：y=0.234x + 0.0002，R2= 0. 999 x為標(biāo)準(zhǔn)品亞硝酸鈉濃度（μg/ml） y為吸光值A。
NO2-（μg/g）=（△A-0.0002）÷0.234×V樣÷（V樣÷V樣總×W）×0.6668
=（△A-0.0002）÷0.234×1.5×0.6668÷W
=4.27×（△A-0.0002）÷W
V樣總：加入提取液體積，1.5 mL； V樣：反應(yīng)中樣品體積，0.35mL；W：樣品質(zhì)量，g。
食品中亞硝酸鹽含量測(cè)定試劑盒注意事項(xiàng)：
1. 試劑盒2-8℃保存。
2. 試劑對(duì)人體有一定的危害，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服，戴手套操作。
3. 若檢測(cè)出得OD值在標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍外，請(qǐng)將樣品進(jìn)行適當(dāng)?shù)臐饪s或稀釋（A540 <0.09濃縮，A540 > 1.5 適當(dāng)稀釋）。
4. 最低檢出限為0.5μg/g。
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上海雅吉生物科技有限公司成立于2011年3月，是一家面向生命科學(xué)領(lǐng)域，提供科研類試劑、耗材、儀器、技術(shù)服務(wù)的生物企業(yè)。包括分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、細(xì)胞學(xué)等 。旗下?lián)碛?“雅吉生物”、“晶風(fēng)生物”、“彩佑實(shí)業(yè)”、“GTX” 品牌。通過(guò)公司各部門員工的共同努力在行業(yè)內(nèi)擁有較高知名度，深得新老客戶厚愛，本著“優(yōu)質(zhì)、服務(wù)、信譽(yù)”的精神，堅(jiān)持以優(yōu)良的技術(shù)、優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品、良好的信譽(yù)為國(guó)內(nèi)外廣大用戶提供優(yōu)質(zhì)生物產(chǎn)品和服務(wù)。
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