【訶子PCR鑒定試劑盒重要指導(dǎo)意利用PCR原理，定性檢測病毒，對病毒引起的疾病診斷及療效評估有義。
【檢驗原理】
利用離心柱內(nèi)硅基質(zhì)膜提取RNA，在反轉(zhuǎn)錄酶的作用下，以RNA為模板，以引物為起點合成與RNA模板互補的cDNA鏈。在TaqDNA聚合酶的作用下，經(jīng)高溫變性、低溫退火、中溫延伸的循環(huán)，使特異DNA片段的拷貝數(shù)放大一倍。經(jīng)過35次循環(huán)，最終使擴增DNA片段放大了數(shù)百萬倍。將擴增DNA片段進行電泳，經(jīng)染色后，在紫外燈照射下，肉眼可見到DNA片段的擴增帶。
【主要組成成份】
組成 | 50T/盒 |
PPRV RT-PCR反應(yīng)液 | 750 μL×1管 |
PPRV 混合酶液 | 150 μL×1管 |
PPRV 陽性對照 | 40 μL×1管 |
PPRV 陰性對照 | 40 μL×1管 |
說明書 | 1份 |
注：陰性對照為基因組DNA，陽性對照為失去活性的貓冠狀病毒cDNA。
【儲存條件及有效期】-20℃以下保存，避免反復(fù)凍融，有效期12個月。
【需自備的物品】PCR擴增儀、電泳儀、電泳槽、紫外凝膠成像儀、可調(diào)移液器、瓊脂糖等相關(guān)試劑及設(shè)備。
【注意事項】
1.病毒具有很強的感染能力，操作前必須準備好各種防御措施。
2.操作時須嚴格按照步驟進行，廢物必須放入含消毒液的廢物缸，以免污染實驗室和工作人員。
3.為避免其他核酸的污染而出現(xiàn)假陽性，必須使用不含DNA和RNA的離心管、吸管、槍頭、試劑和手套，操作人員須戴口罩。
【實驗準備】
如果是提取病毒RNA，請選用RNase free Tip槍頭和1.5 ml離心管或?qū)岊^和離心管用0.1% DEPC水處理后再使用。
【訶子PCR鑒定試劑盒操作步驟】
1.樣品處理
(1). 適用標(biāo)本類型：發(fā)病動物血液、空腸及小腸腸內(nèi)容物及組織臟器(腸道組織、腸系膜及淋巴結(jié)等)和病毒培養(yǎng)液。
(2). 標(biāo)本采集，方法如下：
a.血清：用一次性注射器取靜脈血2-3ml，轉(zhuǎn)至5ml 的干燥管中，密閉送檢。
b.腸內(nèi)容物：無菌條件下取腸道內(nèi)容物約1g 左右，置入1ml 含有1.0ml PBS(或生理鹽水)的5ml 離心管中，立即送檢。
c.組織臟器：取發(fā)病動物腸道組織及腸系膜淋巴結(jié)等組織約1g，置一1.5ml的潔凈離心管中，密閉送檢。
(3).應(yīng)避免標(biāo)本間交叉污染。
(4).標(biāo)本收集后可立即檢測；若不能立即檢測，可置于2～8℃冷藏過夜保存；如需長期保存，標(biāo)本應(yīng)凍存于-80℃以下，避免反復(fù)凍融。
2. 提取過程
用QIAGEN、Roche公司RNA提取試劑盒提取RNA，具體操作按照其試劑盒說明書操作。
3. RT-PCR擴增
（1）每份總體積20 μL，含15 μL RT-PCR反應(yīng)液（用前混勻），3μL 混合酶液，2 μL模板RNA。
例如：n份樣品，配制n+1份，15×（n+1）RT-PCR反應(yīng)液， 3×（n+1）混合酶液勻后取18 μL分裝成n份，分別加入2 μL模板RNA，作好標(biāo)記。
（2）在PCR擴增儀上進行以下程序：50 ℃ 10 min，94 ℃ 3 min；循環(huán)94℃ 30 s，55 ℃ 30 s，72 ℃ 30 s，共35次；再72 ℃延伸7 min。
4. 電泳
稱1.5 g瓊脂糖放于500 mL錐形瓶中，加入1倍TAE電泳緩沖液100 mL（取2 mL 50倍TAE電泳緩沖液，用雙蒸水稀釋至100 mL），于微波爐中熔解，待冷卻至50℃左右再加入50 μL染色液（自備）混勻。在電泳槽內(nèi)放好梳子，倒入瓊脂糖凝膠，待凝固后將PCR擴增產(chǎn)物中加入4μL上樣緩沖液（自備）混勻后取10 μL點樣于瓊脂糖凝膠孔中，以110～120V電壓于1倍TAE電泳緩沖液中電泳，紫外燈下觀察結(jié)果。（注：染色液是2000×，上樣緩沖液是6×）
【結(jié)果判定】
陽性對照出現(xiàn)191 bp擴增帶、陰性對照無帶出現(xiàn)（引物帶除外）時，實驗結(jié)果成立。被檢樣品出現(xiàn)訶子PCR鑒定試劑盒關(guān)聯(lián)產(chǎn)品
Francisella spp.弗朗西斯菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒15-4570050次3990元
Francisella tularensis土拉熱弗朗西斯菌LAMP試劑盒16-4572050次3490元
Francisella tularensis土拉熱弗朗西斯菌PCR試劑盒13-45720y50次2990元點擊下載 13-45720-土拉熱弗朗西斯菌PCR試劑盒使用手冊1.0
Francisella tularensis土拉熱弗朗西斯菌染料法熒光定量PCR試劑盒14-45720y50次2990元點擊下載 14-45720土拉熱弗朗西斯菌染料法熒光定量PCR試劑盒使用手冊V1.1
Francisella tularensis土拉熱弗朗西斯菌探針法熒光定量PCR試劑盒15-45720y50次3990元點擊下載 15-45720Francisella tularensis土拉熱弗朗西斯菌探針法熒光定量PCR試劑盒使用手冊v1.0
Freesia Mosaic Virus(FreMV)小蒼蘭花葉病毒PCR試劑盒13-236050次2990元
Freudenthal改良剛果紅法淀粉樣物質(zhì)染色試劑盒160577100次1990元
Fructus arctii牛蒡子LAMP鑒定試劑盒16-9918650次3490元
Fructus arctii牛蒡子PCR鑒定試劑盒13-9918650次2990元
Fructus arctii牛蒡子染料法PCR鑒定試劑盒14-9918650次2990元
Fructus arctii牛蒡子探針法PCR鑒定試劑盒15-9918650次3990元
Fructus aristolochiae馬兜鈴LAMP鑒定試劑盒16-9916950次3490元
Fructus aristolochiae馬兜鈴PCR鑒定試劑盒13-9916950次2990元
Fructus aristolochiae馬兜鈴染料法PCR鑒定試劑盒14-9916950次2990元
Fructus aristolochiae馬兜鈴探針法PCR鑒定試劑盒15-9916950次3990元
Fructus aurantii immaturus枳實LAMP鑒定試劑盒16-9930950次3490元
Fructus aurantii immaturus枳實PCR鑒定試劑盒13-9930950次2990元
Fructus aurantii immaturus枳實染料法PCR鑒定試劑盒14-9930950次2990元
Fructus aurantii immaturus枳實探針法PCR鑒定試劑盒15-9930950次3990元
Fructus bruceae鴉膽子LAMP鑒定試劑盒16-9928450次3490元
Fructus bruceae鴉膽子PCR鑒定試劑盒13-9928450次2990元
Fructus bruceae鴉膽子染料法PCR鑒定試劑盒14-9928450次2990元
Fructus bruceae鴉膽子探針法PCR鑒定試劑盒15-9928450次3990元
Fructus canarii青果LAMP鑒定試劑盒16-9920650次3490元
Fructus canarii青果PCR鑒定試劑盒13-9920650次2990元
Fructus canarii青果染料法PCR鑒定試劑盒14-9920650次2990元
Fructus canarii青果探針法PCR鑒定試劑盒15-9920650次3990元
Fructus cannabis火麻仁LAMP鑒定試劑盒16-9913150次3490元
Fructus cannabis火麻仁PCR鑒定試劑盒13-9913150次2990元
Fructus cannabis火麻仁染料法PCR鑒定試劑盒14-9913150次2990元
Fructus cannabis火麻仁探針法PCR鑒定試劑盒15-9913150次3990元
Fructus chaenomelis木瓜LAMP鑒定試劑盒16-9918250次3490元
Fructus chaenomelis木瓜PCR鑒定試劑盒13-9918250次2990元
Fructus chaenomelis木瓜染料法PCR鑒定試劑盒14-9918250次2990元
Fructus chaenomelis木瓜探針法PCR鑒定試劑盒15-9918250次3990元
Fructus chebulae訶子LAMP鑒定試劑盒16-9911650次3490元
Fructus chebulae訶子PCR鑒定試劑盒13-9911650次2990元
Fructus chebulae訶子染料法PCR鑒定試劑盒14-9911650次2990元
Fructus chebulae訶子探針法PCR鑒定試劑盒15-9911650次3990元
Fructus citri sarcodactylis佛手LAMP鑒定試劑盒16-9908750次3490元
Fructus citri sarcodactylis佛手PCR鑒定試劑盒13-9908750次2990元
Fructus citri sarcodactylis佛手染料法PCR鑒定試劑盒14-9908750次2990元
Fructus citri sarcodactylis佛手探針法PCR鑒定試劑盒15-9908750次3990元
Fructus citri香櫞LAMP鑒定試劑盒16-9927450次3490元
Fructus citri香櫞PCR鑒定試劑盒13-9927450次2990元
Fructus citri香櫞染料法PCR鑒定試劑盒14-9927450次2990元
Fructus citri香櫞探針法PCR鑒定試劑盒15-9927450次3990元
Fructus cnidii蛇床子LAMP鑒定試劑盒16-9922950次3490元
Fructus cnidii蛇床子PCR鑒定試劑盒13-9922950次2990元
Fructus cnidii蛇床子染料法PCR鑒定試劑盒14-9922950次2990元
Fructus cnidii蛇床子探針法PCR鑒定試劑盒15-9922950次3990元
Fructus corni山茱萸LAMP鑒定試劑盒16-9922850次3490元
Fructus corni山茱萸PCR鑒定試劑盒13-9922850次2990元
Fructus corni山茱萸染料法PCR鑒定試劑盒14-9922850次2990元
Fructus corni山茱萸探針法PCR鑒定試劑盒15-9922850次3990元
Fructus crataegi山楂LAMP鑒定試劑盒16-9922750次3490元
Fructus crataegi山楂PCR鑒定試劑盒13-9922750次2990元
Fructus crataegi山楂染料法PCR鑒定試劑盒14-9922750次2990元
關(guān)鍵字： 訶子PCR鑒定試劑盒;
上海雅吉生物科技有限公司成立于2011年3月，是一家面向生命科學(xué)領(lǐng)域，提供科研類試劑、耗材、儀器、技術(shù)服務(wù)的生物企業(yè)。包括分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、細胞學(xué)等 。旗下?lián)碛?“雅吉生物”、“晶風(fēng)生物”、“彩佑實業(yè)”、“GTX” 品牌。通過公司各部門員工的共同努力在行業(yè)內(nèi)擁有較高知名度，深得新老客戶厚愛，本著“優(yōu)質(zhì)、服務(wù)、信譽”的精神，堅持以優(yōu)良的技術(shù)、優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品、良好的信譽為國內(nèi)外廣大用戶提供優(yōu)質(zhì)生物產(chǎn)品和服務(wù)。
公司在重視產(chǎn)品質(zhì)量的同時，也建立了一套集技術(shù)支持，物流售后服務(wù)等多部門聯(lián)動服務(wù)體系，努力把我們方便、快捷、周到的服務(wù)提供給每一個客戶，雅吉生物的試劑盒，在國內(nèi)眾多重點實驗室廣泛使用，深受廣大科研人員好評，先后在權(quán)威雜志文章中被引用。
本公司鄭重承諾：質(zhì)量保證、供貨及時、服務(wù)周到。