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口蹄疫病毒SAT2亞型RT-PCR試劑盒,Foot-and-Mouth Disease Virus(FMDV)
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口蹄疫病毒SAT2亞型RT-PCR試劑盒

價格 3800
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發(fā)貨地 上海
更新日期 2024-11-01
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產品詳情

中文名稱:口蹄疫病毒SAT2亞型RT-PCR試劑盒英文名稱:Foot-and-Mouth Disease Virus(FMDV)
保存條件: -20度產品類別: PCR試劑盒
2024-11-01 口蹄疫病毒SAT2亞型RT-PCR試劑盒 Foot-and-Mouth Disease Virus(FMDV) 1盒/3800RMB 3800 -20度 PCR試劑盒

【口蹄疫病毒SAT2亞型RT-PCR試劑盒利用PCR原理,定性檢測病毒,對病毒引起的疾病診斷及療效評估有重要指導意義。

【檢驗原理】

利用離心柱內硅基質膜提取RNA,在反轉錄酶的作用下,以RNA為模板,以引物為起點合成與RNA模板互補的cDNA鏈。在TaqDNA聚合酶的作用下,經(jīng)高溫變性、低溫退火、中溫延伸的循環(huán),使特異DNA片段的拷貝數(shù)放大一倍。經(jīng)過35次循環(huán),最終使擴增DNA片段放大了數(shù)百萬倍。將擴增DNA片段進行電泳,經(jīng)染色后,在紫外燈照射下,肉眼可見到DNA片段的擴增帶。

【主要組成成份】

組成

50T/

PPRV RT-PCR反應液

750 μL×1

PPRV 混合酶液

150 μL×1

PPRV 陽性對照

40 μL×1

PPRV 陰性對照

40 μL×1

說明書

1

注:陰性對照為基因組DNA,陽性對照為失去活性的貓冠狀病毒cDNA。

【儲存條件及有效期】-20℃以下保存,避免反復凍融,有效期12個月。

需自備的物品PCR擴增儀、電泳儀、電泳槽、紫外凝膠成像儀可調移液器、瓊脂糖等相關試劑及設備。

【注意事項】

1.病毒具有很強的感染能力,操作前必須準備好各種防御措施。

2.操作時須嚴格按照步驟進行,廢物必須放入含消毒液的廢物缸,以免污染實驗室和工作人員。

3.為避免其他核酸的污染而出現(xiàn)假陽性,必須使用不含DNARNA的離心管、吸管、槍頭、試劑和手套,操作人員須戴口罩。

【實驗準備】

如果是提取病毒RNA,請選用RNase free Tip槍頭和1.5 ml離心管或將槍頭和離心管用0.1% DEPC水處理后再使用。

口蹄疫病毒SAT2亞型RT-PCR試劑盒操作步驟】

1.樣品處理

(1). 適用標本類型:發(fā)病動物血液、空腸及小腸腸內容物及組織臟器(腸道組織、腸系膜及淋巴結等)和病毒培養(yǎng)液。

(2). 標本采集,方法如下:

a.血清:用一次性注射器取靜脈血2-3ml,轉至5ml 的干燥管中,密閉送檢。

b.腸內容物:無菌條件下取腸道內容物約1g 左右,置入1ml 含有1.0ml PBS(或生理鹽水)5ml 離心管中,立即送檢。

c.組織臟器:取發(fā)病動物腸道組織及腸系膜淋巴結等組織約1g,置一1.5ml的潔凈離心管中,密閉送檢。

(3).應避免標本間交叉污染。

(4).標本收集后可立即檢測;若不能立即檢測,可置于28℃冷藏過夜保存;如需長期保存,標本應凍存于-80以下,避免反復凍融。

2. 提取過程

QIAGENRoche公司RNA提取試劑盒提取RNA,具體操作按照其試劑盒說明書操作。

3. RT-PCR擴增

1)每份總體積20 μL15 μL RT-PCR反應液(用前混勻),3μL 混合酶液,2 μL模板RNA。

例如:n份樣品,配制n+1份,15×n+1RT-PCR反應液, n+1)混合酶液勻后取18 μL分裝成n份,分別加入2 μL模板RNA,作好標記。

2)在PCR擴增儀上進行以下程序:50 ℃ 10 min94 ℃ 3 min;循環(huán)94℃ 30 s,55 ℃ 30 s,72 ℃ 30 s,共35次;再72 ℃延伸7 min。

4. 電泳

1.5 g瓊脂糖放于500 mL錐形瓶中,加入1倍TAE電泳緩沖液100 mL(取2 mL 50倍TAE電泳緩沖液,用雙蒸水稀釋至100 mL),于微波爐中熔解,待冷卻至50℃左右再加入50 μL染色液(自備)混勻。在電泳槽內放好梳子,倒入瓊脂糖凝膠,待凝固后將PCR擴增產物中加入4μL上樣緩沖液(自備)混勻后取10 μL點樣于瓊脂糖凝膠孔中,以110~120V電壓于1倍TAE電泳緩沖液中電泳,紫外燈下觀察結果。(注:染色液是2000×,上樣緩沖液是6×)

結果判定

陽性對照出現(xiàn)191 bp擴增帶、陰性對照無帶出現(xiàn)引物帶除外時,實驗結果成立。被檢樣品出現(xiàn)口蹄疫病毒SAT2亞型RT-PCR試劑盒關聯(lián)產品

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公司簡介

上海雅吉生物科技有限公司成立于2011年3月,是一家面向生命科學領域,提供科研類試劑、耗材、儀器、技術服務的生物企業(yè)。包括分子生物學、免疫學、微生物學、細胞學等 。旗下?lián)碛?“雅吉生物”、“晶風生物”、“彩佑實業(yè)”、“GTX” 品牌。通過公司各部門員工的共同努力在行業(yè)內擁有較高知名度,深得新老客戶厚愛,本著“優(yōu)質、服務、信譽”的精神,堅持以優(yōu)良的技術、優(yōu)質的產品、良好的信譽為國內外廣大用戶提供優(yōu)質生物產品和服務。 公司在重視產品質量的同時,也建立了一套集技術支持,物流售后服務等多部門聯(lián)動服務體系,努力把我們方便、快捷、周到的服務提供給每一個客戶,雅吉生物的試劑盒,在國內眾多重點實驗室廣泛使用,深受廣大科研人員好評,先后在權威雜志文章中被引用。 本公司鄭重承諾:質量保證、供貨及時、服務周到。
成立日期 2011-04-17 (14年) 注冊資本 50.000000萬人民幣
員工人數(shù) 50-100人 年營業(yè)額 ¥ 100萬以內
主營行業(yè) 抗體,抗體 經(jīng)營模式 試劑,定制,試劑,定制
  • 上海雅吉生物科技有限公司
VIP 3年
  • 公司成立:14年
  • 注冊資本:50.000000萬人民幣
  • 企業(yè)類型:有限責任公司(自然人投資或控股)
  • 主營產品:抗體,細胞,生物試劑等
  • 公司地址:上海市閔行區(qū)元江路5500號第 1幢5658室
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