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肝片吸蟲(chóng)病通用PCR試劑盒,Fasciola spp.
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肝片吸蟲(chóng)病通用PCR試劑盒

價(jià)格 3800
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發(fā)貨地 上海
更新日期 2024-12-25
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產(chǎn)品詳情

中文名稱(chēng):肝片吸蟲(chóng)病通用PCR試劑盒英文名稱(chēng):Fasciola spp.
保存條件: -20度產(chǎn)品類(lèi)別: PCR試劑盒
2024-12-25 肝片吸蟲(chóng)病通用PCR試劑盒 Fasciola spp. 1盒/3800RMB 3800 -20度 PCR試劑盒

肝片吸蟲(chóng)病通用PCR試劑盒利用PCR原理,定性檢測(cè)病毒,對(duì)病毒引起的疾病診斷及療效評(píng)估有重要指導(dǎo)意義。

【檢驗(yàn)原理】

利用離心柱內(nèi)硅基質(zhì)膜提取RNA,在反轉(zhuǎn)錄酶的作用下,以RNA為模板,以引物為起點(diǎn)合成與RNA模板互補(bǔ)的cDNA鏈。在TaqDNA聚合酶的作用下,經(jīng)高溫變性、低溫退火、中溫延伸的循環(huán),使特異DNA片段的拷貝數(shù)放大一倍。經(jīng)過(guò)35次循環(huán),最終使擴(kuò)增DNA片段放大了數(shù)百萬(wàn)倍。將擴(kuò)增DNA片段進(jìn)行電泳,經(jīng)染色后,在紫外燈照射下,肉眼可見(jiàn)到DNA片段的擴(kuò)增帶。

【主要組成成份】

組成

50T/

PPRV RT-PCR反應(yīng)液

750 μL×1

PPRV 混合酶液

150 μL×1

PPRV 陽(yáng)性對(duì)照

40 μL×1

PPRV 陰性對(duì)照

40 μL×1

說(shuō)明書(shū)

1

注:陰性對(duì)照為基因組DNA,陽(yáng)性對(duì)照為失去活性的貓冠狀病毒cDNA。

【儲(chǔ)存條件及有效期】-20℃以下保存,避免反復(fù)凍融,有效期12個(gè)月。

需自備的物品PCR擴(kuò)增儀、電泳儀、電泳槽、紫外凝膠成像儀、可調(diào)移液器、瓊脂糖等相關(guān)試劑及設(shè)備

【注意事項(xiàng)】

1.病毒具有很強(qiáng)的感染能力,操作前必須準(zhǔn)備好各種防御措施。

2.操作時(shí)須嚴(yán)格按照步驟進(jìn)行,廢物必須放入含消毒液的廢物缸,以免污染實(shí)驗(yàn)室和工作人員。

3.為避免其他核酸的污染而出現(xiàn)假陽(yáng)性,必須使用不含DNARNA的離心管、吸管、槍頭、試劑和手套,操作人員須戴口罩。

【實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備】

如果是提取病毒RNA,請(qǐng)選用RNase free Tip槍頭和1.5 ml離心管或?qū)岊^和離心管用0.1% DEPC水處理后再使用。

肝片吸蟲(chóng)病通用PCR試劑盒操作步驟】

1.樣品處理

(1). 適用標(biāo)本類(lèi)型:發(fā)病動(dòng)物血液、空腸及小腸腸內(nèi)容物及組織臟器(腸道組織、腸系膜及淋巴結(jié)等)和病毒培養(yǎng)液。

(2). 標(biāo)本采集,方法如下:

a.血清:用一次性注射器取靜脈血2-3ml,轉(zhuǎn)至5ml 的干燥管中,密閉送檢。

b.腸內(nèi)容物:無(wú)菌條件下取腸道內(nèi)容物約1g 左右,置入1ml 含有1.0ml PBS(或生理鹽水)5ml 離心管中,立即送檢。

c.組織臟器:取發(fā)病動(dòng)物腸道組織及腸系膜淋巴結(jié)等組織約1g,置一1.5ml的潔凈離心管中,密閉送檢。

(3).應(yīng)避免標(biāo)本間交叉污染。

(4).標(biāo)本收集后可立即檢測(cè);若不能立即檢測(cè),可置于28℃冷藏過(guò)夜保存;如需長(zhǎng)期保存,標(biāo)本應(yīng)凍存于-80以下,避免反復(fù)凍融。

2. 提取過(guò)程

QIAGEN、Roche公司RNA提取試劑盒提取RNA,具體操作按照其試劑盒說(shuō)明書(shū)操作。

3. RT-PCR擴(kuò)增

1)每份總體積20 μL,15 μL RT-PCR反應(yīng)液(用前混勻),3μL 混合酶液,2 μL模板RNA。

例如:n份樣品,配制n+1份,15×n+1RT-PCR反應(yīng)液, n+1)混合酶液勻后取18 μL分裝成n份,分別加入2 μL模板RNA,作好標(biāo)記。

2)在PCR擴(kuò)增儀上進(jìn)行以下程序:50 ℃ 10 min,94 ℃ 3 min;循環(huán)94℃ 30 s55 ℃ 30 s,72 ℃ 30 s,共35次;再72 ℃延伸7 min。

4. 電泳

稱(chēng)1.5 g瓊脂糖放于500 mL錐形瓶中,加入1倍TAE電泳緩沖液100 mL(取2 mL 50倍TAE電泳緩沖液,用雙蒸水稀釋至100 mL),于微波爐中熔解,待冷卻至50℃左右再加入50 μL染色液(自備)混勻。在電泳槽內(nèi)放好梳子,倒入瓊脂糖凝膠,待凝固后將PCR擴(kuò)增產(chǎn)物中加入4μL上樣緩沖液(自備)混勻后取10 μL點(diǎn)樣于瓊脂糖凝膠孔中,以110~120V電壓于1倍TAE電泳緩沖液中電泳,紫外燈下觀察結(jié)果。(注:染色液是2000×,上樣緩沖液是6×)

結(jié)果判定

陽(yáng)性對(duì)照出現(xiàn)191 bp擴(kuò)增帶、陰性對(duì)照無(wú)帶出現(xiàn)引物帶除外時(shí),實(shí)驗(yàn)結(jié)果成立。被檢樣品出現(xiàn)肝片吸蟲(chóng)病通用PCR試劑盒關(guān)聯(lián)產(chǎn)品

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公司簡(jiǎn)介

上海雅吉生物科技有限公司成立于2011年3月,是一家面向生命科學(xué)領(lǐng)域,提供科研類(lèi)試劑、耗材、儀器、技術(shù)服務(wù)的生物企業(yè)。包括分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、細(xì)胞學(xué)等 。旗下?lián)碛?“雅吉生物”、“晶風(fēng)生物”、“彩佑實(shí)業(yè)”、“GTX” 品牌。通過(guò)公司各部門(mén)員工的共同努力在行業(yè)內(nèi)擁有較高知名度,深得新老客戶(hù)厚愛(ài),本著“優(yōu)質(zhì)、服務(wù)、信譽(yù)”的精神,堅(jiān)持以?xún)?yōu)良的技術(shù)、優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品、良好的信譽(yù)為國(guó)內(nèi)外廣大用戶(hù)提供優(yōu)質(zhì)生物產(chǎn)品和服務(wù)。 公司在重視產(chǎn)品質(zhì)量的同時(shí),也建立了一套集技術(shù)支持,物流售后服務(wù)等多部門(mén)聯(lián)動(dòng)服務(wù)體系,努力把我們方便、快捷、周到的服務(wù)提供給每一個(gè)客戶(hù),雅吉生物的試劑盒,在國(guó)內(nèi)眾多重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室廣泛使用,深受廣大科研人員好評(píng),先后在權(quán)威雜志文章中被引用。 本公司鄭重承諾:質(zhì)量保證、供貨及時(shí)、服務(wù)周到。
成立日期 2011-04-17 (14年) 注冊(cè)資本 50.000000萬(wàn)人民幣
員工人數(shù) 50-100人 年?duì)I業(yè)額 ¥ 100萬(wàn)以?xún)?nèi)
主營(yíng)行業(yè) 抗體,抗體 經(jīng)營(yíng)模式 試劑,定制,試劑,定制
  • 上海雅吉生物科技有限公司
VIP 3年
  • 公司成立:14年
  • 注冊(cè)資本:50.000000萬(wàn)人民幣
  • 企業(yè)類(lèi)型:有限責(zé)任公司(自然人投資或控股)
  • 主營(yíng)產(chǎn)品:抗體,細(xì)胞,生物試劑等
  • 公司地址:上海市閔行區(qū)元江路5500號(hào)第 1幢5658室
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