牛流行熱病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒產(chǎn)品特點(diǎn)
2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物，與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測(cè)，避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
低溫運(yùn)輸、-20℃保存，有效期一年。
DNA 模板、10×ROX（根據(jù)機(jī)型決定，具體見使用方法）。
牛流行熱病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒使用方法
一、稀釋 PCR 陽(yáng)性對(duì)照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
6. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
8. 如果有 N 個(gè)樣品，必須設(shè)置 N+2 個(gè)提取，多出的一個(gè)是 PC（樣品制備陽(yáng)性對(duì)照），一個(gè)是 NC（樣品制備陰性對(duì)照）?？梢杂?10μL 上步制備的 PCR 陽(yáng)性對(duì)照的第 4號(hào)（濃度為 1×10E4 拷貝/μL，10μL 相當(dāng)于 1 萬拷貝）或第 5 號(hào)（濃度為 1×10E5拷貝/μL，10μL 相當(dāng)于 10 萬拷貝）再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此作為 PC。另外用水作為 NC。如果每次制備需要 200μL 樣品，則 PC 和 NC 的體積也必須是 200μL用自選方法純化樣品的 DNA，本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒 DNA 提取試劑盒兼容。也可以選購(gòu)本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級(jí)版柱式病毒 DNAout。本試劑盒免費(fèi)贈(zèng)送 15 次一管式病毒 DNAout
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)（20 μL 體系，在樣品制備室進(jìn)行）
10. 如果只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+9 個(gè) PCR 管，其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品，1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照，6 個(gè)用于 PCR 陽(yáng)性對(duì)照。如果做 2-3 次重復(fù)，則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加 2 或 3 倍。
11. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分（本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照，并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后最后加）：
注:僅 ABI7500、7700 和 7900 儀器需要使用 ROX 作為對(duì)照，其他熒光 PCR 儀
器（如 iCycler IQ、MJ Option、MJ Chromo4、MX3000、MX4000、RotorGene
3000、RotorGene 6000 和 LightCycler480）不需要使用 ROX，則用水替代
蓋上蓋子后上機(jī)，按下面參數(shù)進(jìn)行 PCR（具體 PCR 參數(shù)可以根據(jù)儀器不同而自行優(yōu)化）。
過程 溫度 時(shí)間
13. 數(shù)據(jù)采集
具體操作按所用儀器推薦的流程進(jìn)行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合 DNA 時(shí)，吸收光譜在 471 nm，結(jié)合 DNA 時(shí)的吸收光譜在 500 nm，發(fā)射光譜在 530 nm。信號(hào)采集可以設(shè)置在復(fù)性或延伸步驟。
四、數(shù)據(jù)處理
14. 如果把本試劑盒用于定量檢測(cè)，則以陽(yáng)性對(duì)照濃度的 log 值為橫軸，以 Ct 值為縱軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再以待測(cè)樣品的 Ct 值從標(biāo)準(zhǔn)曲線上推算出樣品 DNA 濃度的log 值，再推算出其濃度。
15. 如果把本試劑盒用于定性檢測(cè)，只判斷陽(yáng)性或陰性，則陰性對(duì)照 Ct 必須大于或等于 40。陽(yáng)性對(duì)照必須有熒光對(duì)數(shù)增長(zhǎng)，有典型擴(kuò)增曲線，Ct 值應(yīng)該小于或等于30。對(duì)待測(cè)樣品，如果其 Ct 大于或等于 40 則為陰性，如果小于或等于 35 則為陽(yáng)性。如果在 35-40 之間，則重復(fù)一次。重復(fù)實(shí)驗(yàn)的 Ct 值如果大于或等于 40 則為陰性，如果小于 40，則為陽(yáng)性。
牛流行熱病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒關(guān)聯(lián)產(chǎn)品
| Neisseriameningitidis腦膜炎奈瑟菌染料法熒光定量試劑盒 | 腦膜炎奈瑟菌染料法熒光定量PCR試劑盒 |
| Neisseriaspp奈瑟菌通用試劑盒 | 奈瑟菌通用PCR試劑盒 |
| Neisseriaspp奈瑟菌通用染料法熒光定量試劑盒 | 奈瑟菌通用染料法熒光定量PCR試劑盒 |
| Nematodirusabnormalis畸形細(xì)頸線蟲試劑盒 | 畸形細(xì)頸線蟲PCR試劑盒 |
| Nematodirusabnormalis畸形細(xì)頸線蟲染料法熒光定量試劑盒 | 畸形細(xì)頸線蟲染料法熒光定量PCR試劑盒 |
| Nematodirusbattus巴氏細(xì)頸線蟲試劑盒 | 巴氏細(xì)頸線蟲PCR試劑盒 |
| Nematodirusbattus巴氏細(xì)頸線蟲染料法熒光定量試劑盒 | 巴氏細(xì)頸線蟲染料法熒光定量PCR試劑盒 |
| Nematodirusfilicollis線頸細(xì)頸線蟲試劑盒 | 線頸細(xì)頸線蟲PCR試劑盒 |
| Nematodirusfilicollis線頸細(xì)頸線蟲染料法熒光定量試劑盒 | 線頸細(xì)頸線蟲染料法熒光定量PCR試劑盒 |
| Nematodirushelvetianus微黃細(xì)頸線蟲試劑盒 | 微黃細(xì)頸線蟲PCR試劑盒 |
| Nematodirushelvetianus微黃細(xì)頸線蟲染料法熒光定量試劑盒 | 微黃細(xì)頸線蟲染料法熒光定量PCR試劑盒 |
| Nematodirusspathiger匙狀細(xì)頸毛樣線蟲試劑盒 | 匙狀細(xì)頸毛樣線蟲PCR試劑盒 |
| Nematodirusspathiger匙狀細(xì)頸毛樣線蟲染料法熒光定量試劑盒 | 匙狀細(xì)頸毛樣線蟲染料法熒光定量PCR試劑盒 |
| Nematodirusspp細(xì)頸線蟲通用試劑盒 | 細(xì)頸線蟲通用PCR試劑盒 |
| Nematodirusspp細(xì)頸線蟲通用染料法熒光定量試劑盒 | 細(xì)頸線蟲通用染料法熒光定量PCR試劑盒 |
| Neosporacaninum犬新孢子蟲試劑盒 | 犬新孢子蟲PCR試劑盒 |
| Neosporacaninum犬新孢子蟲染料法熒光定量試劑盒 | 犬新孢子蟲染料法熒光定量PCR試劑盒 |
| Neosporahughsi休斯新孢子蟲試劑盒 | 休斯新孢子蟲PCR試劑盒 |
| Neosporahughsi休斯新孢子蟲染料法熒光定量試劑盒 | 休斯新孢子蟲染料法熒光定量PCR試劑盒 |
| Neosporaspp新孢子蟲通用試劑盒 | 新孢子蟲通用PCR試劑盒 |
| Neosporaspp新孢子蟲通用染料法熒光定量試劑盒 | 新孢子蟲通用染料法熒光定量PCR試劑盒 |
| NewDelhi-Metallo-1(NDM-1)超級(jí)細(xì)菌試劑盒 | 超級(jí)細(xì)菌PCR試劑盒 |
| NewDelhi-Metallo-1(NDM-1)超級(jí)細(xì)菌染料法熒光定量試劑盒 | 超級(jí)細(xì)菌染料法熒光定量PCR試劑盒 |
| NewcastleDiseaseVirus(NDV)新城疫病毒(=禽副粘病毒1型)試劑盒 | 新城疫病毒(=禽副粘病毒1型)PCR試劑盒 |
| NewcastleDiseaseVirus(NDV)新城疫病毒(=禽副粘病毒1型)染料法熒光定量試劑盒 | 新城疫病毒(=禽副粘病毒1型)染料法熒光定量PCR試劑盒 |
| NipahVirus(NiV)尼帕病毒試劑盒 | 尼帕病毒PCR試劑盒 |
| NipahVirus(NiV)尼帕病毒染料法熒光定量試劑盒 | 尼帕病毒染料法熒光定量PCR試劑盒 |
| Nocardiaasteroides星狀諾卡菌試劑盒 | 星狀諾卡菌PCR試劑盒 |
| Nocardiaasteroides星狀諾卡菌染料法熒光定量試劑盒 | 星狀諾卡菌染料法熒光定量PCR試劑盒 |
| Nocardiabrasiliensis巴西諾卡菌試劑盒 | 巴西諾卡菌PCR試劑盒 |
| Nocardiabrasiliensis巴西諾卡菌染料法熒光定量試劑盒 | 巴西諾卡菌染料法熒光定量PCR試劑盒 |
| Nocardiacarnea肉色諾卡菌試劑盒 | 肉色諾卡菌PCR試劑盒 |
| Nocardiacarnea肉色諾卡菌染料法熒光定量試劑盒 | 肉色諾卡菌染料法熒光定量PCR試劑盒 |
| Nocardiafarcinica皮諾卡菌試劑盒 | 皮諾卡菌PCR試劑盒 |
| Nocardiafarcinica皮諾卡菌染料法熒光定量試劑盒 | 皮諾卡菌染料法熒光定量PCR試劑盒 |
| Nocardianova新星諾卡菌試劑盒 | 新星諾卡菌PCR試劑盒 |
| Nocardianova新星諾卡菌染料法熒光定量試劑盒 | 新星諾卡菌染料法熒光定量PCR試劑盒 |
| Nocardiaotitidiscaviarum豚鼠耳炎諾卡菌試劑盒 | 豚鼠耳炎諾卡菌PCR試劑盒 |
| Nocardiaotitidiscaviarum豚鼠耳炎諾卡菌染料法熒光定量試劑盒 | 豚鼠耳炎諾卡菌染料法熒光定量PCR試劑盒 |
| Nocardiaspp諾卡菌通用試劑盒 | 諾卡菌通用PCR試劑盒 |
| Nocardiaspp諾卡菌通用染料法熒光定量試劑盒 | 諾卡菌通用染料法熒光定量PCR試劑盒 |
| Nocardiatransvalensis南非諾卡菌試劑盒 | 南非諾卡菌PCR試劑盒 |
| Nocardiatransvalensis南非諾卡菌染料法熒光定量試劑盒 | 南非諾卡菌染料法熒光定量PCR試劑盒 |
| NorwalkVirusesG1(NV-1)諾如病毒G1型試劑盒 | 諾如病毒G1型PCR試劑盒 |
| NorwalkVirusesG1(NV-1)諾如病毒G1型染料法熒光定量試劑盒 | 諾如病毒G1型染料法熒光定量PCR試劑盒 |
| NorwalkVirusesG2(NV-2)諾如病毒G2型試劑盒 | 諾如病毒G2型PCR試劑盒 |
| NorwalkVirusesG2(NV-2)諾如病毒G2型染料法熒光定量試劑盒 | 諾如病毒G2型染料法熒光定量PCR試劑盒 |
| NorwalkVirusesG3(NV-3)諾如病毒G3型試劑盒 | 諾如病毒G3型PCR試劑盒 |
| NorwalkVirusesG3(NV-3)諾如病毒G3型染料法熒光定量試劑盒 | 諾如病毒G3型染料法熒光定量PCR試劑盒 |
| NorwalkVirusesG4(NV-4)諾如病毒G4型試劑盒 | 諾如病毒G4型PCR試劑盒 |
| NorwalkVirusesG4(NV-4)諾如病毒G4型染料法熒光定量試劑盒 | 諾如病毒G4型染料法熒光定量PCR試劑盒 |
| NorwalkVirusesG5(NV-5)諾如病毒G5型試劑盒 | 諾如病毒G5型PCR試劑盒 |
| NorwalkVirusesG5(NV-5)諾如病毒G5型染料法熒光定量試劑盒 | 諾如病毒G5型染料法熒光定量PCR試劑盒 |
| NorwalkViruses(NV)諾如病毒通用試劑盒 | 諾如病毒通用PCR試劑盒 |
| NorwalkViruses(NV)諾如病毒通用染料法熒光定量試劑盒 | 諾如病毒通用染料法熒光定量PCR試劑盒 |
| Nosemaapis西方蜜蜂微孢子蟲試劑盒 | 西方蜜蜂微孢子蟲PCR試劑盒 |
| Nosemaapis西方蜜蜂微孢子蟲染料法熒光定量試劑盒 | 西方蜜蜂微孢子蟲染料法熒光定量PCR試劑盒 |
| Nosemaceranae東方蜜蜂微孢子蟲試劑盒 | 東方蜜蜂微孢子蟲PCR試劑盒 |
| Nosemaceranae東方蜜蜂微孢子蟲染料法熒光定量試劑盒 | 東方蜜蜂微孢子蟲染料法熒光定量PCR試劑盒 |
| Nosemaspp蜜蜂微孢子蟲通用試劑盒 | 蜜蜂微孢子蟲通用PCR試劑盒 |
| Nosemaspp蜜蜂微孢子蟲通用染料法熒光定量試劑盒 | 蜜蜂微孢子蟲通用染料法熒光定量PCR試劑盒 |
| NuclearPolyhedrosisVirus(NPV)核型多角體病毒試劑盒 | 核型多角體病毒PCR試劑盒 |
| NuclearPolyhedrosisVirus(NPV)核型多角體病毒染料法熒光定量試劑盒 | 核型多角體病毒染料法熒光定量PCR試劑盒 |
| Onyong-nyongVirus(ONNV)阿尼昂-尼昂病毒試劑盒 | 尼昂-尼昂病毒PCR試劑盒 |
| Onyong-nyongVirus(ONNV)阿尼昂-尼昂病毒染料法熒光定量試劑盒 | 尼昂-尼昂病毒染料法熒光定量PCR試劑盒 |
| OatMosaicVirus(OMV)燕麥花葉病毒試劑盒 | 燕麥花葉病毒PCR試劑盒 |
| Ochroconisgallopava奔馬赭霉試劑盒 | 奔馬赭霉PCR試劑盒 |
| Ochroconisgallopava奔馬赭霉染料法熒光定量試劑盒 | 奔馬赭霉染料法熒光定量PCR試劑盒 |
| OdontoglossumRingspotVirus(ORSV)齒舌蘭環(huán)斑病毒試劑盒 | 齒舌蘭環(huán)斑病毒PCR試劑盒 |
| Oesophagostomumclumbianum克氏食道線蟲試劑盒 | 克氏食道線蟲PCR試劑盒 |
| Oesophagostomumclumbianum克氏食道線蟲染料法熒光定量試劑盒 | 克氏食道線蟲染料法熒光定量PCR試劑盒 |
| OliveLatentVirus-1(OLV-1)橄欖潛隱病毒1型試劑盒 | 欖潛隱病毒1型PCR試劑盒 |
| Oliverosvirus(OLVV)奧利華斯病毒試劑盒 | 奧利華斯病毒PCR試劑盒 |
| Oliverosvirus(OLVV)奧利華斯病毒染料法熒光定量試劑盒 | 奧利華斯病毒染料法熒光定量PCR試劑盒 |
| OmskHemorrhagicFeverVirus(OHFV)鄂木斯克出血熱病毒試劑盒 | 鄂木斯克出血熱病毒PCR試劑盒 |
| OmskHemorrhagicFeverVirus(OHFV)鄂木斯克出血熱病毒染料法熒光定量試劑盒 | 鄂木斯克出血熱病毒染料法熒光定量PCR試劑盒 |
| OncorhynchusMasouVirus(OMV)馬蘇大麻哈魚病毒試劑盒 | 馬蘇大麻哈魚病毒PCR試劑盒 |
關(guān)鍵字： 牛流行熱病毒探針法熒光定量RT-PCR試;
上海雅吉生物科技有限公司成立于2011年3月，是一家面向生命科學(xué)領(lǐng)域，提供科研類試劑、耗材、儀器、技術(shù)服務(wù)的生物企業(yè)。包括分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、細(xì)胞學(xué)等 。旗下?lián)碛?“雅吉生物”、“晶風(fēng)生物”、“彩佑實(shí)業(yè)”、“GTX” 品牌。通過公司各部門員工的共同努力在行業(yè)內(nèi)擁有較高知名度，深得新老客戶厚愛，本著“優(yōu)質(zhì)、服務(wù)、信譽(yù)”的精神，堅(jiān)持以優(yōu)良的技術(shù)、優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品、良好的信譽(yù)為國(guó)內(nèi)外廣大用戶提供優(yōu)質(zhì)生物產(chǎn)品和服務(wù)。
公司在重視產(chǎn)品質(zhì)量的同時(shí)，也建立了一套集技術(shù)支持，物流售后服務(wù)等多部門聯(lián)動(dòng)服務(wù)體系，努力把我們方便、快捷、周到的服務(wù)提供給每一個(gè)客戶，雅吉生物的試劑盒，在國(guó)內(nèi)眾多重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室廣泛使用，深受廣大科研人員好評(píng)，先后在權(quán)威雜志文章中被引用。
本公司鄭重承諾：質(zhì)量保證、供貨及時(shí)、服務(wù)周到。