一、細(xì)胞基本屬性 |
細(xì)胞名稱 | 小鼠骨髓瘤細(xì)胞 |
細(xì)胞別稱 | SP2/0-Ag14; SP2/0-Ag14; SP2/0-AG14; SP2/0-ag14; Sp2/O-Ag14; SP2/O-Ag14; Sp2/0-Ag-14; SP2-0-Ag14; SP2/0 Ag-14; SP-2/0-AG14; Sp 2/0-Ag 14; Sp2/0; SP2/0;Sp2/0; SP2/O; SP-2;SP2; GM03569; GM03569B; GM3569 |
細(xì)胞貨號 | SNL-187 |
細(xì)胞種屬 | 小鼠 |
生長情況 | 半貼壁 |
培養(yǎng)條件 | 1640+10%FBS+1%雙抗 |
培養(yǎng)環(huán)境 | air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5% |
二、細(xì)胞培養(yǎng)操作 |
換液周期 | 2-3天 |
培養(yǎng)基體積 | T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml |
傳代比例 | 1:2-1:4(具體情況視細(xì)胞生長速度及密度決定) |
傳代方法 | 1.輕輕吸走培養(yǎng)上清,留2-3ml培養(yǎng)基輕輕吹打細(xì)胞面吹下細(xì)胞; 2.混勻細(xì)胞,收集細(xì)胞培養(yǎng)基,900rpm離心3-5min,棄上清; 3.加新的完全培養(yǎng)基輕輕重懸細(xì)胞,均勻分到新的培養(yǎng)瓶里; 4.補(bǔ)足完全培養(yǎng)基,將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng); |
注意事項(xiàng) | 半貼壁細(xì)胞會附著瓶底,但貼壁不緊,輕輕吸取培養(yǎng)基輕輕吹打細(xì)胞面就會脫落,不需要胰酶消化。建議使用培養(yǎng)皿培養(yǎng),更適合吹打細(xì)胞操作,吹打細(xì)胞注意盡量輕柔,不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細(xì)胞狀態(tài)。 |
三、細(xì)胞凍存操作 |
凍存液配方 | 92%FBS+8%DMSO(新手推薦)或92%完全培養(yǎng)基+8%DMSO(高手推薦); |
凍存規(guī)格 | 200-300萬/ml,1ml每管 |
凍存方法 | 1.離心獲得細(xì)胞沉淀后,加配置好的凍存液輕輕重懸細(xì)胞; 2.將細(xì)胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標(biāo)記的凍存管; 3.將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒,放入-80度冰箱過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存;沒有程序凍存盒的實(shí)驗(yàn)室,加入細(xì)胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min,再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存 |
注意事項(xiàng) | 凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮后及時復(fù)蘇一管檢查細(xì)胞凍存活性,若有異常,及時調(diào)整實(shí)驗(yàn)方案 |
Tips:
1.細(xì)胞半貼壁圓形生長,部分懸浮圓形,傳代時均可收集培養(yǎng),換液時將懸浮細(xì)胞離心收集后重新接回原瓶,若貼壁細(xì)胞較多活性較好時可以不要懸浮的細(xì)胞;
2.傳代有部分細(xì)胞碎片可以換液后用PBS潤洗細(xì)胞清除,使用的PBS需要恢復(fù)到室溫,加入時不要沖到細(xì)胞面,潤洗盡量輕柔;
3.該細(xì)胞生長較快,培養(yǎng)基消耗較快,培養(yǎng)時注意密切關(guān)注細(xì)胞狀態(tài),密度較高、培養(yǎng)基有變黃趨勢時及時換液避免細(xì)胞狀態(tài)變差;
我們推薦使用尚恩生物SP2/0-Ag14(小鼠骨髓瘤細(xì)胞)專用完全培養(yǎng)基(產(chǎn)品貨號:SNLM-187)作為體外培養(yǎng)SP2/0-Ag14(小鼠骨髓瘤細(xì)胞)的培養(yǎng)基。
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2、質(zhì)量保證:產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定,10年以上細(xì)胞研發(fā)經(jīng)驗(yàn) 通過ISO認(rèn)證和CE認(rèn)證;
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