"HPC-Y5:人胰腺導管癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)
細胞生長:貼壁
凍存和復蘇的原則:慢凍快融》當細胞冷到零度以下,可以產生以下變化:細胞器脫水,細胞中可溶性物質濃度升GAO,并在細胞內形成冰晶。如果緩慢冷凍,可使細胞逐步脫水,細胞內不致產生大的冰晶;相反,結晶就大,大結晶會造成細胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復蘇過程應快融,目的是防止小冰晶形成大冰晶,即冰晶的重結晶。慢凍程序》1.標準程序:采用細胞凍存器》當溫度在-25℃以上時,1~2℃/min;當溫度達-25℃以下時,5~10℃/min;當溫度達-100℃時,可迅速放入液氮中。2.簡易程序:將冷凍管(管口要朝上)放入紗布袋內,紗布袋系以線繩,通過線繩將紗布袋固定于液氮罐罐口,按每分鐘溫度下降1~2℃的速度,在40min內降至液氮表面過夜,次晨投人液氮中。3.傳統(tǒng)程序:冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽長期儲存。細胞凍存方法:1.預先配制凍存液》(1)8%DMSO+細胞生長液(92%血清)2.取對數(shù)生長期細胞,經胰酶消化后,加入適量凍存液,用吸管吹打制成細胞懸液(1×10(6)~5×10(6)細胞/ml)。3.加入1ml細胞于凍存管中,密封后標記冷凍細胞名稱和冷凍日期。液氮長期保存。保存細胞的復蘇方法:1.快速解凍》凍存細胞從液氮中取出后,立即放入37℃水浴中,輕輕搖動冷凍管,使其在1分鐘內全部融化(不要超過3分鐘)。2.解凍后的細胞可直接接種到含完全生長培養(yǎng)液的細胞培養(yǎng)瓶中直接進行培養(yǎng),24小時后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液,以去除DMSO。3.如果細胞對冷凍保護劑別敏感解凍后的細胞應先通過離心去除冷凍保護劑,然后再接種到含完全生長培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
X63Ag8-653細胞類似產品::HCMEC(BL12-H)細胞、HCCLM3細胞、GNM細胞
NCI-H1618細胞類似產品::3396細胞、H-1417細胞、SNU-1細胞
HPDE6c7細胞類似產品::B16F1細胞、BCPAP細胞、RCC 786-O細胞
HLF-a細胞類似產品::TW01細胞、MDAMB330細胞、COLO.205細胞
[細胞產品包裝]鮮活細胞:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞:1ml凍存管(兩支)
細胞背景資料:胰腺管癌;淋巴結轉移
HPC-Y5:人胰腺導管癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)
細胞形態(tài):上皮細胞樣
K562/ADR細胞類似產品::LCMS細胞、PG-4細胞、HSC-I細胞
TE4細胞類似產品::RKO_AS45細胞、SNB-19細胞、BrCL18細胞
TW 01細胞類似產品::A20細胞、ECC-1細胞、SC細胞
培養(yǎng)細胞的凍存及復蘇:細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術。細胞凍存在-196℃液氮中,儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復蘇的原則是慢凍快融?!緝龃婕毎浚?選對數(shù)增生期細胞(證明無支原體污染),在凍存前1d換液;2)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細胞制備成懸液,計數(shù),使細胞密度達5×10/ml左右密度,離心,去上清;3)加入配制HAO的凍存液(培養(yǎng)液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO 1ml,5.6%NaHCO3 0.1ml),按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中,然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。凍存細胞時培養(yǎng)液中加入保護劑10%二甲基亞砜(DMSO)或甘油,可使冰點降低,使細胞內水分在凍結前透出細胞外;4)分裝于無菌凍存管中,每管加1.5m懸液;5)旋HAO凍存管并仔細檢查,一定要蓋緊,做HAO標記;6)凍存:在殊的儀器或簡易的液氮容器中,按-1℃/min的速度,在30~40min時間內,下降到液氮表面,再停30min后,直接投入液氮中。要適當掌握下降冷凍速度,過快能影響細胞內水分透出,太慢則促進冰晶形成。操作時應戴防護眼鏡和手套,以免液氮凍傷?!緩吞K細胞】1)從罐中取出凍存管;2)迅速放入36℃~37℃水浴,不時搖動,使其急速融化,30~60s內完成;3)凍存管用70%酒精擦拭消毒后,打開蓋子,用吸管將細胞懸液注入離心管中,再滴加10ml培養(yǎng)液;4)低速離心(500~1000r/min) 5min,去上清后再用培養(yǎng)液洗一次;5)用培養(yǎng)液適當稀釋后,裝入培養(yǎng)瓶37℃培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后,繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進行培養(yǎng)。凍存細胞數(shù)量要充分,密度應達到10/ml,在融后稀釋20倍時,仍能保持5×10/ml數(shù)量。
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫
HPC-Y5:人胰腺導管癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)
細胞生長特性:貼壁
細胞傳代后放入培養(yǎng)箱沒有搖勻,或者放入時搖勻,但在細胞貼壁前,又移動了培養(yǎng)瓶,頻繁開關培養(yǎng)箱引起的振動或者培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液過少,培養(yǎng)箱擱板表面不平整,這些因素會導致細胞生長不均勻。研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質不佳。血清使用錯誤或血清的品質不佳。運輸過程對細胞有嚴重影響。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C 太久。一些懸浮細胞抱團生長是正常現(xiàn)象,大部分懸浮細胞在細胞密度很GAO的情況下,很可能會出現(xiàn)部分細胞抱團生長的現(xiàn)象,聚團細胞很容易死亡并演化成絮狀物,殃及周圍的懸浮細胞,因此在培養(yǎng)懸浮細胞時需控制HAO細胞密度。如果出現(xiàn)了細胞團,可以通過細胞篩去掉部分較大的細胞團,也可以嘗試一下方法:將細胞懸液收集到15ml離心管中,靜置20min左右,小心取上層細胞上清培養(yǎng)(該方法只能去除部分較大的細胞團)。部分細胞本身存在一定的空泡(如HepG2,Ishikawa及一些耐藥株等),這個是正?,F(xiàn)象。如果只有少數(shù)細胞有內出現(xiàn)極少空泡,則很可能是細胞狀態(tài)不佳,可以通過調整血清濃度,控制消化,控制傳代比例及時間等方法來調整細胞狀態(tài);如果大部分細胞出現(xiàn)空泡,且單個細胞內空泡數(shù)目偏多,則可能細胞代次較GAO,細胞老化所致,需更換代次較早的細胞。
Hs578Bst細胞類似產品::RCC10 RGB細胞、A427細胞、EFM192C細胞
P31/Fujioka細胞類似產品::B958細胞、SK BR 03細胞、D562細胞
HT-115細胞類似產品::32D.3細胞、HSMC細胞、A-172 MG細胞
Tu686細胞類似產品::UCLA-RO 81細胞、SUM102細胞、RPMI8402細胞
HS688AT細胞類似產品::OPM2細胞、COV 504細胞、Adeno 293細胞
H1105細胞類似產品::CHP 126細胞、SW579細胞、D-324MED細胞
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OVCA420細胞類似產品::H 9細胞、MGH-U1細胞、CEM-CCRF細胞
SU.86.86細胞類似產品::D6P2T細胞、U031細胞、IMR90細胞
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C3H10T1/2CL8細胞類似產品::SKNFI細胞、TE-15細胞、H-2073細胞
SGC996細胞類似產品::HEI-193細胞、HDF-a細胞、SNU-407細胞
NCI-H498細胞類似產品::RPE1-hTERT細胞、B16 subline B78細胞、22Rv-1細胞
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Wistar Institute-38細胞類似產品::PK(15)細胞、WM115細胞、PC 61-5-3細胞
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A375-MEL細胞類似產品::Hs 746.T細胞、SKLU-1細胞、Porcine Kidney-15細胞
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UWB1289細胞類似產品::A 2780 CP細胞、Panc_05_04細胞、NCIH2081細胞
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Granta 519細胞類似產品::HET-1A細胞、J 774A.1細胞、Central Adrenergic TH-expressing a細胞
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H64細胞類似產品::EC109細胞、NCI H82細胞、PLC PRF 5細胞
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TCMK1細胞類似產品::CMT.64細胞、OCI Ly1細胞、H-23細胞
NCI-H1781細胞類似產品::253JBV細胞、NHEK細胞、ESC-410細胞
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PSN-1細胞類似產品::BJ1細胞、NB-19細胞、293E細胞
HPC-Y5:人胰腺導管癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)
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HR8348細胞類似產品::DHL10細胞、LS174T細胞、DMS153細胞
OCI/AML5細胞類似產品::ACC3細胞、Panc 8.13細胞、B16 F10細胞
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關鍵字: HPC-Y5:人胰腺導管癌復蘇細胞(提供;
上海冠導生物工程有限公司,先后從ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、PromoCell、ScienCell、JCRB等國內外細胞庫引進細胞2000余株。以此為契機,公司組建了冠導細胞庫,我司細胞均由資深細胞培養(yǎng)工程師進行培養(yǎng)。我司可以提供的細胞有:①細胞系②原代細胞③穩(wěn)轉株④耐藥株⑤標記細胞⑥細胞配套試劑等。