"HepaRG:人肝癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)HAO與不HAO至關(guān)重要的考驗。很多同學(xué)都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺HAO的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非常肯定地說，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更HAO一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況把握）。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

KMH2細胞類似產(chǎn)品：：SKNBE(2)細胞、ARIP細胞、PG-4 (S+L-)細胞

Super Tube細胞類似產(chǎn)品：：SCCVII/St細胞、COR-L23/P細胞、TE5細胞

L cells (TK-)細胞類似產(chǎn)品：：Karpas 422細胞、H1882細胞、OV-CA 432細胞

UMUC14細胞類似產(chǎn)品：：Mono Mac 1細胞、CT26-clone 25細胞、MNNG-HOS細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：肝癌；女性

HepaRG:人肝癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

SBC3細胞類似產(chǎn)品：：L-M[TK-]細胞、RPE1細胞、WERI Rb-1細胞

SNU1細胞類似產(chǎn)品：：K-1735細胞、SNU449細胞、MM-1S細胞

U-87-MG細胞類似產(chǎn)品：：MFHL-2細胞、A375細胞、T98 G細胞

購買細胞注意事項：１)收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完HAO，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系；２)仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等；３)用７５%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落，將細胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜，隔天再取出觀察。此時多數(shù)細胞均會貼壁，若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力，如果證實細胞活力正常，請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細胞無活力，請拍下照片及時和我們聯(lián)系，信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次；４)建議客戶收到細胞后前３天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和公司技術(shù)部溝通交流?！炯毎麄鞔僮鞑襟E】一、貼壁細胞傳代：１)提前將培養(yǎng)基、PBS放入３７℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用７５%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)；２)吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞；３)加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，３７℃孵育，每隔２~３min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用；４)用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡；５)將細胞懸液分別接種到另外的２~３個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置３７℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。二、懸浮細胞傳代：１)將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，１０００rpm離心５min；２)棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液；３)將細胞懸液分別接種到另外的２~３個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置３７℃溫箱培養(yǎng)。

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

HepaRG:人肝癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長特性：貼壁

細胞培養(yǎng)中常用設(shè)施及設(shè)備：實驗室設(shè)計：細胞培養(yǎng)是一種無菌操作技術(shù)，要求工作環(huán)境和條件必須保證無微生物污染和不受其它有害因素的影響。細胞培養(yǎng)室和設(shè)計原則是防止微生物污染和有害因素影響，要求工作環(huán)境清潔、空氣清新，干燥和無煙塵。細胞培養(yǎng)室的設(shè)計原則一般是無菌操作區(qū)設(shè)在室內(nèi)較少走動的內(nèi)側(cè)，常規(guī)操作和封閉培養(yǎng)于一室，而洗刷消毒在另一室。常用設(shè)施及設(shè)備：1)超凈工作臺：也稱凈化工作臺，分為側(cè)流式、直流式和外流式三大類。2)無菌操作間：一般由更衣間、緩沖間和操作間三部分組成。操作間放置凈化工作臺及二氧化碳培養(yǎng)箱、離心機、倒置顯微鏡等。緩沖間可放置電冰箱、冷藏器及消毒HAO的無菌物品等。3)操作間：普通培養(yǎng)箱、離心機、水浴鍋、定時鐘、普通天平及日常分析處理物。4)洗刷消毒間：烤箱、消毒鍋、蒸餾水處理器及酸缸等。5)分析室：顯微鏡、計算機及打印機等。

HREC細胞類似產(chǎn)品：：H-1672細胞、J.E6-1細胞、PLC-PRF-5細胞

PLA-801D細胞類似產(chǎn)品：：THP1細胞、PMVEC細胞、NCIH64細胞

NCIH1694細胞類似產(chǎn)品：：GC1-SPG細胞、S3-HeLa細胞、Hs 636 T細胞

U266 B1細胞類似產(chǎn)品：：NCIH727細胞、NHA細胞、H920細胞

NCI-H295細胞類似產(chǎn)品：：NCIH2141細胞、HUC-1細胞、Keio University-19-19細胞

DLD 1細胞類似產(chǎn)品：：PC-3細胞、MCF-12A細胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞

A431/P細胞類似產(chǎn)品：：NCIH2135細胞、MCF12F細胞、LMTK-細胞

HEK 293T/17細胞類似產(chǎn)品：：SKML-28細胞、FHs 74 Int細胞、BHT-101細胞

CAMA1細胞類似產(chǎn)品：：HL-7702細胞、MX-1細胞、2V6.11細胞

SW756細胞類似產(chǎn)品：：UCLA-SO-M14細胞、7860細胞、CAL120細胞

LL/2細胞類似產(chǎn)品：：MDA-436細胞、TCCPAN2細胞、BEP2D細胞

JEG3細胞類似產(chǎn)品：：L428細胞、CCRF-CEM C1細胞、HuO9細胞

KMST-6細胞類似產(chǎn)品：：DF-1細胞、TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、NCIH441細胞

PE CA PJ34細胞類似產(chǎn)品：：H-716細胞、H-2286細胞、U-hth74細胞

Hs852細胞類似產(chǎn)品：：FDCP1細胞、OCI-AML4細胞、PC-3M細胞

TM-4細胞類似產(chǎn)品：：OAC-P4C細胞、HEC-1-B細胞、CCD966SK細胞

TM-4細胞類似產(chǎn)品：：OAC-P4C細胞、HEC-1-B細胞、CCD966SK細胞

GA-10 (Clone 4)細胞類似產(chǎn)品：：JM細胞、CEM細胞、KMY1022細胞

SW-1088細胞類似產(chǎn)品：：CEMO-1細胞、C17細胞、PL45細胞

HEK293細胞類似產(chǎn)品：：U-343-MG細胞、HIMEC細胞、Murine Carcinoma-38細胞

MDA-175細胞類似產(chǎn)品：：Tn-5細胞、KY180細胞、M4e細胞

MIN-6細胞類似產(chǎn)品：：SCC090細胞、DCS細胞、Caov-4細胞

451-LU細胞類似產(chǎn)品：：U-138 MG細胞、LY-R細胞、HOP92細胞

C57 Mouse Tumor 64細胞類似產(chǎn)品：：BALB/3T3細胞、MDAPCa2b細胞、RT-4細胞

HepaRG:人肝癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

Ls-174-T細胞類似產(chǎn)品：：H87細胞、MC-CAR細胞、RMS13細胞

OP-9細胞類似產(chǎn)品：：MADB-106細胞、RERF-LCMS細胞、Y3-Ag1.2.3細胞

THLE-2細胞類似產(chǎn)品：：TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞、EBC-1細胞、NPC-TW039細胞

SK Col 1細胞類似產(chǎn)品：：KOSC-2細胞、NCIH2228細胞、NCI H929細胞

RCF細胞類似產(chǎn)品：：HA細胞、Malme-3 M細胞、MRASMC細胞

SO-RB50細胞類似產(chǎn)品：：U118-MG細胞、NP69SV40T細胞、H-660細胞

SUDHL-10細胞類似產(chǎn)品：：MDCC-MSB-1細胞、HPAC細胞、MDA-MB415細胞

RKO_AS45細胞類似產(chǎn)品：：NCL-H548細胞、X63-Ag8.653細胞、Saos2細胞

ME180細胞類似產(chǎn)品：：PNT1-a細胞、L78細胞、Fetal Human Colon細胞

OCI-LY-8細胞類似產(chǎn)品：：SKO007細胞、NCI-H2591細胞、HOP-62細胞

MS 751細胞類似產(chǎn)品：：OVCA5細胞、BALB 3T3 clone A31細胞、NCI-H520細胞

GM17346細胞類似產(chǎn)品：：A-375.S2細胞、Line 697細胞、NCIH2342細胞

SW-982細胞類似產(chǎn)品：：LADMAC細胞、C4I細胞、YD-38細胞

F81細胞類似產(chǎn)品：：UPCI-SCC-90細胞、Natural Killer-92細胞、BHK21細胞

MDA-MB-231-GFP細胞類似產(chǎn)品：：EJ細胞、LuCL4細胞、BTI-Tn-5B1-4細胞

P3J HR1-K細胞類似產(chǎn)品：：A-101D細胞、HCC1008細胞、NCIH1563細胞

MNNG/HOS Cl #5細胞類似產(chǎn)品：：Chinese Hamster Lung細胞、CHP-212細胞、Hs 895 T細胞

SUM-159細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1341細胞、HS5細胞、JurkatE6-1細胞

Kit 225 K6細胞類似產(chǎn)品：：H-1385細胞、251 MG細胞、VMM5細胞

KU 19-19細胞類似產(chǎn)品：：Bovine Turbinate細胞、NCIH2141細胞、Caco-2BBe細胞

RPPVEC細胞類似產(chǎn)品：：H209細胞、HCT FET細胞、UACC893細胞

Caco-2 BBe細胞類似產(chǎn)品：：RPMI 6666細胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞、Colo-678細胞

K562細胞類似產(chǎn)品：：SUM52細胞、LWnt-3A細胞、EO771細胞

H-2342細胞類似產(chǎn)品：：HCT116/L細胞、LoVo細胞、H1563細胞

A-2780細胞類似產(chǎn)品：：H9c2細胞、SCL-2細胞、BALL1細胞

NU-GC-3細胞類似產(chǎn)品：：MGC803細胞、ACCM細胞、MC 116細胞

Sp2/mIL-6細胞類似產(chǎn)品：：MDAPCa2b細胞、WM239A細胞、UCLA RO-81-A-1細胞

PC12(高分化)細胞類似產(chǎn)品：：Oregon J-111細胞、HO-1-N-1細胞、PC3細胞

C57 Mouse Tumor 64細胞類似產(chǎn)品：：BALB/3T3細胞、MDAPCa2b細胞、RT-4細胞

SUNE 1細胞類似產(chǎn)品：：Buffalo Rat Liver-3A細胞、SUDHL6細胞、GLAG-66細胞

CCK81細胞類似產(chǎn)品：：HLE-B3細胞、IOSE29細胞、NCI H23細胞

MEL細胞類似產(chǎn)品：：RS411細胞、QGP1細胞、TE 85 ClF-5細胞

HCC-44細胞類似產(chǎn)品：：NU-GC-2細胞、BLO11細胞、TH1細胞

NW38細胞類似產(chǎn)品：：H1648細胞、MDA MB 361細胞、NTERA2-D1細胞

KU 812F細胞類似產(chǎn)品：：RPMI-8226S細胞、MRC-9細胞、HCC1171細胞

TE-14細胞類似產(chǎn)品：：A-20細胞、SF 767細胞、SCLC-21H細胞

VMM-5A細胞類似產(chǎn)品：：CC-LP-I細胞、CWR-22rv1細胞、HOMEC細胞

NCIH1694細胞類似產(chǎn)品：：GC1-SPG細胞、PL5細胞、OVCAR.5細胞

H-EMC-SS細胞類似產(chǎn)品：：BSC-40細胞、HS 683T細胞、U-373 MG細胞

LIPF178C細胞類似產(chǎn)品：：NEC8細胞、GM04154細胞、C41細胞

VE細胞類似產(chǎn)品：：GC-2spd(ts)細胞、LM3細胞、EA.Hy926細胞

SK RC 20細胞類似產(chǎn)品：：OV1-P細胞、3T3-J2細胞、P3X63Ag8細胞

IMR 90細胞類似產(chǎn)品：：SNU-398細胞、SCLC-21H細胞、Sp2/mIL-6細胞

M1細胞類似產(chǎn)品：：VM-CUB-1細胞、COLO-320細胞、MDA-MB-435S細胞

BT細胞類似產(chǎn)品：：OCI-Ly 19細胞、SHP-77細胞、SCC25細胞

HAVSMC細胞類似產(chǎn)品：：HCC95細胞、P3/NS1/1-Ag4-1細胞、Colon-38細胞

BIC1細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1048細胞、TR 146細胞、AHH-1細胞

TALL 1細胞類似產(chǎn)品：：Michigan Cancer Foundation-12F細胞、SW837細胞、MPC-5細胞

COLO-1細胞類似產(chǎn)品：：Hs 766T細胞、OACP4 C細胞、Hs-675-T細胞

Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞類似產(chǎn)品：：U251細胞、SNU1040細胞、MLFC細胞

MLE 12細胞類似產(chǎn)品：：MLA144細胞、MDA MB 453細胞、GM03569細胞

NRK細胞類似產(chǎn)品：：DC2.4細胞、Sp2/O-Ag14細胞、NCTC-3960細胞

H1573細胞類似產(chǎn)品：：HUT 125細胞、OSK-1細胞、NK-10A細胞

C-Lu65細胞類似產(chǎn)品：：MOLP-2細胞、RCC10細胞、NCIH2009細胞

COLO-320-DM細胞類似產(chǎn)品：：GEO細胞、KYSE-520細胞、SW1353細胞

5-8F細胞類似產(chǎn)品：：Hs852細胞、TE1細胞、NCI-H1417細胞

BT474細胞類似產(chǎn)品：：H-727細胞、McA-RH8994細胞、MS-751細胞

H748細胞類似產(chǎn)品：：MJ細胞、H-2009細胞、CAL 27細胞

H748細胞類似產(chǎn)品：：MJ細胞、H-2009細胞、CAL 27細胞

KYSE30細胞類似產(chǎn)品：：MCF7/WT細胞、Lymph Node Carcinoma of the prostate細胞、HCA7細胞

N9細胞類似產(chǎn)品：：KB細胞、KU-812-F細胞、HT144mel細胞

HOCF細胞類似產(chǎn)品：：Psi2-DAP細胞、RPMI1788細胞、Clone Y1細胞

YAC-1細胞類似產(chǎn)品：：THLE-3細胞、Hu-P-T3細胞、THP 1細胞

ABC-1細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1869細胞、L 363細胞、NCIH1930細胞

PMVEC細胞類似產(chǎn)品：：BC3H1細胞、FM-88細胞、RMS1598細胞

HuPT3細胞類似產(chǎn)品：：LU165細胞、624-mel細胞、COLO-738細胞

SUD6細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1623細胞、RCS細胞、Walker-256-TC細胞

HIT clone T15細胞類似產(chǎn)品：：NL20細胞、SVEC4-10細胞、NW-38細胞

BTI-Tn5B14細胞類似產(chǎn)品：：Hs 281.T細胞、CNE2細胞、LNCaP-ATCC細胞

U-118MG細胞類似產(chǎn)品：：PK-15細胞、293EBNA細胞、HPDEC細胞

SiHa細胞類似產(chǎn)品：：SW 620細胞、HCT8細胞、A.704細胞

HuO9細胞類似產(chǎn)品：：SW1990細胞、MDA-436細胞、BT.549細胞

COLO206細胞類似產(chǎn)品：：NALM-6-M1細胞、H-II-E-C3細胞、SU-DHL-16細胞

NCIH1299細胞類似產(chǎn)品：：H1650_CO細胞、JS1細胞、Swiss 3T6細胞

OCI/AML3細胞類似產(chǎn)品：：hRMECs細胞、Fetal Bovine Heart Endothelial細胞、PC.3細胞

SW-962細胞類似產(chǎn)品：：H2126細胞、Jiyoye (P-2003)細胞、CFPAC1細胞

MN-9D細胞類似產(chǎn)品：：Mono Mac6細胞、BT549細胞、H-2405細胞

Neuro-2a細胞類似產(chǎn)品：：HBSMC細胞、IOSE80細胞、Madin Darby Bovine Kidney細胞

QGY-7701細胞類似產(chǎn)品：：CMT 93細胞、CAL 12T細胞、U20S細胞

HCC1008細胞類似產(chǎn)品：：HCC1588細胞、REC細胞、SNU-16細胞

A204細胞類似產(chǎn)品：：HuT 102細胞、KY-270細胞、TK10細胞

MKN 28細胞類似產(chǎn)品：：AG06814-N細胞、RPMI #1846細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細胞

HepaRG:人肝癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

CPA 47細胞類似產(chǎn)品：：HCC1954-BL細胞、CEM T4細胞、FHL-124細胞

RCK-8細胞類似產(chǎn)品：：University of Arizona Cell Culture-893細胞、WC00079細胞、RPMI 7666細胞

NCI-H146細胞類似產(chǎn)品：：B16-F10細胞、HCC1143細胞、DLD-1細胞

Kit 225 K6細胞類似產(chǎn)品：：H-1385細胞、251 MG細胞、VMM5細胞

KTA-7細胞類似產(chǎn)品：：Y3-Ag 1.2.3細胞、Colon-38細胞、HOS細胞

BMDC細胞類似產(chǎn)品：：KGN細胞、AHH-1細胞、MDA MB 231細胞

"