"LNCaP C4-2:人前列腺癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)
細胞生長:貼壁
細胞可選擇干冰運輸及發(fā)送復蘇存活細胞方式:干冰運輸,收到后立即轉入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇;存活細胞,收到后應繼續(xù)生長,傳代達到細胞生長狀態(tài)良HAO時,再進行凍存。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。細胞接收后的處理方式:收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們;請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h;棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml新的完全培養(yǎng)基;如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代;接到細胞第二天,請檢查細胞是否污染,若發(fā)現污染或疑似污染,請及時與我們取得聯系。細胞培養(yǎng)步及凍存條件:驟準備細胞所需培養(yǎng)基;YOU質胎牛血清,10%;雙抗,1%;培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%;凍存液:92%血清,8%DMSO,現用現配。細胞復蘇及何時傳代:復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
H-1703細胞類似產品::Porcine Kidney-13細胞、IOSE 80細胞、U343MG細胞
MGECs細胞類似產品::SKBR-3細胞、Hs 611.T細胞、QBC(939)細胞
HaCaT細胞類似產品::HO-1-N-1細胞、Be Wo細胞、MGSMC細胞
VP 267細胞類似產品::Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細胞、ELD-1細胞、GM03190細胞
[細胞產品包裝]鮮活細胞:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞:1ml凍存管(兩支)
細胞背景資料:前列腺癌;左鎖骨上淋巴結轉移;男性
LNCaP C4-2:人前列腺癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)
細胞形態(tài):上皮細胞樣
HCC1599細胞類似產品::ARO 81-1細胞、ChaGo-K-1細胞、HCC95細胞
High5細胞類似產品::C2BBe 1細胞、Kit225 K6細胞、BrCL15細胞
PC3M-1E8細胞類似產品::CEMx721.174.T2細胞、MC3T3-E1 Subclone 4細胞、Hs839.T細胞
培養(yǎng)細胞的凍存及復蘇:細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術。細胞凍存在-196℃液氮中,儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復蘇的原則是慢凍快融?!緝龃婕毎浚?選對數增生期細胞(證明無支原體污染),在凍存前1d換液;2)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細胞制備成懸液,計數,使細胞密度達5×10/ml左右密度,離心,去上清;3)加入配制HAO的凍存液(培養(yǎng)液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO 1ml,5.6%NaHCO3 0.1ml),按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中,然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。凍存細胞時培養(yǎng)液中加入保護劑10%二甲基亞砜(DMSO)或甘油,可使冰點降低,使細胞內水分在凍結前透出細胞外;4)分裝于無菌凍存管中,每管加1.5m懸液;5)旋HAO凍存管并仔細檢查,一定要蓋緊,做HAO標記;6)凍存:在殊的儀器或簡易的液氮容器中,按-1℃/min的速度,在30~40min時間內,下降到液氮表面,再停30min后,直接投入液氮中。要適當掌握下降冷凍速度,過快能影響細胞內水分透出,太慢則促進冰晶形成。操作時應戴防護眼鏡和手套,以免液氮凍傷?!緩吞K細胞】1)從罐中取出凍存管;2)迅速放入36℃~37℃水浴,不時搖動,使其急速融化,30~60s內完成;3)凍存管用70%酒精擦拭消毒后,打開蓋子,用吸管將細胞懸液注入離心管中,再滴加10ml培養(yǎng)液;4)低速離心(500~1000r/min) 5min,去上清后再用培養(yǎng)液洗一次;5)用培養(yǎng)液適當稀釋后,裝入培養(yǎng)瓶37℃培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后,繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進行培養(yǎng)。凍存細胞數量要充分,密度應達到10/ml,在融后稀釋20倍時,仍能保持5×10/ml數量。
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫
LNCaP C4-2:人前列腺癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)
細胞生長特性:貼壁
貼壁細胞傳代:去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;棄PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞,顯微鏡下觀察,待細胞變圓,細胞間隙明顯,部分細胞剛開始脫離瓶壁,加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化,將細胞小心吹打下來,1000rpm/min室溫離心5min;棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代:一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,將細胞懸液移入離心管中,1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長,此時細胞生長狀態(tài)良HAO,當補液時,需避免反復吹打。
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ZR751細胞類似產品::PK (15)細胞、DI TNC1細胞、CHP-212細胞
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關鍵字: LNCaP C4-2:人前列腺癌復蘇細胞;
上海冠導生物工程有限公司,先后從ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、PromoCell、ScienCell、JCRB等國內外細胞庫引進細胞2000余株。以此為契機,公司組建了冠導細胞庫,我司細胞均由資深細胞培養(yǎng)工程師進行培養(yǎng)。我司可以提供的細胞有:①細胞系②原代細胞③穩(wěn)轉株④耐藥株⑤標記細胞⑥細胞配套試劑等。