"hTERT-RPE1:人視網膜色素上皮復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可。吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足夠消化細胞。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后37℃消化。比較難消化的細胞（潤洗方法5min還不能消化），這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育。不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化HAO了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質材料的附著已經消失了，細胞之間的附著也已經消失了，細胞已經獨立分布了（雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布）。這個時候應該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常HAO，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個性。如果和標準形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化HAO導致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細胞的性，是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細胞之后會對你越來越不HAO。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

Bac12F5細胞類似產品：：RERF-LCMS細胞、WEHI 164細胞、H-28細胞

GM04679細胞類似產品：：HEK-2細胞、CO115細胞、SK-RC-42細胞

MA-c細胞類似產品：：H69/P細胞、UMUC-3細胞、Alexander cells細胞

NCIH2085細胞類似產品：：Hs840T細胞、Mino細胞、IEC6細胞

[細胞產品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：視網膜色素上皮；hTERT永生；女性

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細胞形態(tài)：上皮細胞樣

LS-174細胞類似產品：：OLN-93細胞、NCI-H1703細胞、HCC-2279細胞

GM05862細胞類似產品：：H-1404細胞、Hs695T細胞、OVCA-433細胞

SUIT-2細胞類似產品：：K1735細胞、GalK 1細胞、HLCL9B10細胞

細胞培養(yǎng)實驗基本操作：①進無菌室前要徹底洗手，按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用７５%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。②操作者動作要輕，安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應在火焰近處并經過燒灼進行。但要注意，金屬器械不能在火焰中長時間燒灼，以防退火；燒過的器械要冷卻后才能使用；已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼，因殘留在吸管內的培養(yǎng)液成分如蛋白質等燒焦后會產生有害物質，吸管再用時會將其帶到培養(yǎng)液中；膠塞、橡皮乳頭及塑料的細胞培養(yǎng)用品過火焰是也不能時間太長，以免燒焦產生有毒氣體，危害培養(yǎng)細胞，同時塑料細胞培養(yǎng)用品也會產生變形影響使用。③使用培養(yǎng)液前不宜過早開瓶，開瓶后的培養(yǎng)液應保持斜位，避免直立，以防止下落細菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應立即封閉瓶口，培養(yǎng)的細胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。④操作時盡量不要談話，咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。⑤吸取培養(yǎng)液、細胞懸液時，應專管專用，一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應棄去，以防止污染擴大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。⑥操作完畢后應整理HAO工作臺面，用消毒水浸泡的紗布擦拭臺面；防止細胞交叉污染：所有從別處轉來的或是自己所建的細胞系都要早期留有的充足的凍存儲備，一旦懷疑發(fā)生交叉污染，可做細胞遺傳學方面的鑒定，如發(fā)現(xiàn)原有的細胞遺傳物發(fā)生改變，可以復蘇早期凍存的細胞使用。重要細胞系的傳代工作應由兩人獨立進行；無菌室的徹底消毒①新潔爾滅全面徹底擦洗無菌室。使用前應稀釋即配即用。新潔爾滅和酒精相比，Zui大的YOU點是便宜，而且可以稀釋５０倍用，而同樣量的酒精價格可能是新潔爾滅的幾十倍。②甲醛熏蒸法：甲醛是一種廣譜滅菌劑菌，其水溶液和氣體對各種細菌、芽孢及真菌等微生物均有殺滅作用。甲醛價廉，熏蒸消毒時不損壞衣服、家具、皮革、橡膠等。市售的甲醛水溶液中一般含３７－４０%的甲醛。

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

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細胞生長特性：貼壁

貼壁細胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，將細胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長，此時細胞生長狀態(tài)良HAO，當補液時，需避免反復吹打。

NCIH2171細胞類似產品：：CAL-148細胞、NCI-H2073細胞、LICR-LON-HN6細胞

HT-29/CX-1細胞類似產品：：231-luc細胞、PC-3/M細胞、HL60細胞

Tsup-1細胞類似產品：：CCFSTTG1細胞、58F細胞、HCC-1954BL細胞

JiyoyeP-2003細胞類似產品：：UCLA SO M14細胞、B5537SKIN細胞、Panc813細胞

P3 88 D1細胞類似產品：：UM-UC-14細胞、SF-539 BT細胞、MES13細胞

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SKCO1細胞類似產品：：PC3M-1E8細胞、NG108-15細胞、RBVEC細胞

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1.1B4細胞類似產品：：LN-18細胞、GM637A細胞、Human Kidney-2細胞

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Hep G2-Luc細胞類似產品：：SUDHL-5細胞、A673細胞、Ls-174-T細胞

PANC0813細胞類似產品：：293c18細胞、P3/ag細胞、BRL-3A細胞

FL-83B細胞類似產品：：SW954細胞、Hi-5細胞、MDA175細胞

SKG-3a細胞類似產品：：TALL1細胞、NIT-1細胞、Hs 604.T細胞

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251MG細胞類似產品：：Hs-578T細胞、IMCD-3細胞、HN 4細胞

WIL2S細胞類似產品：：TGW細胞、HOC細胞、SF-539細胞

SW1353細胞類似產品：：GP293細胞、L5178Y細胞、CAL-51細胞

B 95.8細胞類似產品：：NS20Y細胞、KBM5細胞、HFE-145細胞

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H-87細胞類似產品：：Panc813細胞、Karpas299細胞、ZR75-30細胞

NCI-H526細胞類似產品：：P3-X63-Ag8.653細胞、HS-940-T細胞、MCMEC細胞

L(TK-)細胞類似產品：：MC57G細胞、SUNE-1細胞、RKO-AS-45-1細胞

Jeko1細胞類似產品：：Mel-RM細胞、MMVECs細胞、ChaGo-K1細胞

NCI-H2591細胞類似產品：：AML 12細胞、MC38細胞、Tu 212細胞

PANC-28細胞類似產品：：CHAGOK1細胞、NCI-H510A細胞、H-EMC-SS細胞

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