"LAD 2:人肥大復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

貼壁細胞凍存注意事項：細胞凍存液需提前配制，不可直接將DMSO加入細胞懸液中；不同細胞消化時間有差異，以實際鏡檢結果為準，大部分細胞回縮變圓并有少量細胞脫落即可中止消化，消化時間不宜過長；應選擇匯合度80%-90%左右，細胞處于對數生長期時進行凍存操作，確保細胞凍存時狀態(tài)Zui佳，凍存密度可根據細胞性進行調整；凍存細胞保存溫度應低于-130℃，不可在-80℃長期保存。貼壁細胞凍存操作步驟：從培養(yǎng)箱中取出準備凍存的細胞；顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)并拍照記錄；酒精消毒培養(yǎng)瓶后放入安全柜中；吸去多余的培養(yǎng)基，加人2~3ml(PBS緩沖液)潤洗一次；加入1ml胰酶，放入37℃消化；消化1min左右，在顯微鏡下觀察細胞消化情況；消化完全后，加3ml完全培養(yǎng)基終止；將細胞懸液移入15ml離心管中離心，1000rpm/min（約200g）離心3-5min；吸去多余的液體，向細胞沉淀中加入適量的凍存液，輕輕吸打混勻；按比例分裝至凍存管中；貼HAO標簽后放入梯度凍存盒中；將凍存盒放入-80℃，降溫過夜后，移入液氮中保存。貼壁細胞凍存實驗準備事項：將15mL離心管、凍存管、PBS緩沖液、移液管、電動移液器等物品提前放入生物安全柜中，紫外照射30min消毒滅菌；細胞完全培養(yǎng)基、0.25%胰酶-0.02%EDTA、細胞凍存液等從4℃冰箱中取出后，復溫至室溫，備用；程序降溫盒復溫至室溫備用。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

HEC1-B細胞類似產品：：HConEpic細胞、HT 1376.T細胞、GDM-1細胞

CMT-64細胞類似產品：：GP2d細胞、tdott細胞、UMNSAH-DF1細胞

LoVo細胞類似產品：：KYSE 270細胞、SNU878細胞、NCI-H1105細胞

EAhy926細胞類似產品：：Hs.27細胞、C-33 A細胞、NCI-322細胞

[細胞產品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：肥大細胞

LAD 2:人肥大復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

U-937細胞類似產品：：MPC 11細胞、JM細胞、Epstein-Barr-2細胞

Baby Hamster Kidney-21細胞類似產品：：UMC-11細胞、SW527細胞、HCC4006細胞

SUM-159-PT細胞類似產品：：Sp2/0-Ag-14細胞、SW1271細胞、OVCAR4細胞

細胞傳代注意事項：①傳代培養(yǎng)時注意無菌操作并防止細胞間的交叉污染。所有操作盡量靠近酒精燈火焰。每次ZuiHAO只進行一種細胞的操作。每種細胞使用一套器材；②每天觀察細胞形態(tài)，掌握HAO細胞是否健康的標準：健康細胞的形態(tài)飽滿，折光性HAO，生長致密時即可傳代；③如發(fā)現細胞有污染跡象，應立即采取措施，一般應棄置污染的細胞，如果必須挽救，可加含有抗生素的BBS或培養(yǎng)基反復清洗，隨后培養(yǎng)基中加入較大量的抗生素，并經常更換培養(yǎng)基。傳代細胞的建系和維持：細胞系的維持通過換液傳代再換液、再傳代和細胞種子凍存來實現。對每一個細胞系來說都有其自身的點，要做HAO建系的維持必須記錄HAO細胞檔案,換液傳代和做HAO細胞系的管理工作。培養(yǎng)細胞的凍存及復蘇：細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術。細胞凍存在-１９６℃液氮中，儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復蘇的原則是慢凍快融。

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

LAD 2:人肥大復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長特性：懸浮

一般使用trypsin-EDTA 濃度為0.25%trypsin-0.53mM EDTA.2Na或0.05%trypsin-0.02mM EDTA.2Na。消化液濃度過GAO時，易造成培養(yǎng)基中細胞碎片增多，黑渣子增多，常規(guī)細胞傳代時建議用0.05%的胰酶進行消化，對于難消化的細胞可采用0.25%胰酶進行消化，細胞密度過GAO超過80%時，采用分步消化法。胰酶儲存在-20°C，解凍在4°C進行，次開瓶后應立即少量分裝于無菌試管中，保存于-20°C，避免反復冷凍解凍造成trypsin之活性降低，并可減少污染之機會。胰酶消化的程度是細胞培養(yǎng)中的一個關鍵步驟：消化過度細胞碎片增多，黑渣子增多，細胞會成片脫落，嚴重影響細胞活性，并有部分細胞漂浮，隨棄去的胰酶流失；消化不足則細胞難于從瓶壁上吹下，反復吹打同樣也會損傷細胞活性。不同細胞對消化液的敏感性不同，胰酶消化的時間也會有差異。胰酶消化時間與胰酶的濃度，是否含EDTA，胰酶的儲存時間，胰酶的儲存溫度，是否反復凍融，消化加入的胰酶體積，消化溫度及細胞的密度有關。對于新購買的細胞，建議客戶先用低濃度的胰酶仔細去摸索一下消化時間，可每隔1分鐘鏡下觀察細胞是否變圓，記錄Zui佳消化時間，下一次操作參考之前的記錄來控制時間即可。

B95.8細胞類似產品：：BC-3-H-I細胞、HT29細胞、Kit-225-K6細胞

DHL-6細胞類似產品：：MLMA細胞、H719細胞、A549/DDP細胞

MDA-MB453細胞類似產品：：CCD966SK細胞、NCI-H1734細胞、NCIH2135細胞

Hs 888.Lu細胞類似產品：：HT細胞、PL12細胞、P3J細胞

OCI/AML-4細胞類似產品：：IGR.OV1細胞、PTK 2細胞、COLO 16細胞

EU-2細胞類似產品：：TE-11細胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細胞、NCI-H1404細胞

U-343 MG細胞類似產品：：MGH-U3 (RN)細胞、H735細胞、H1385細胞

NW-MEL-38細胞類似產品：：LL/2(LLc1)細胞、D324 Med細胞、NCIH1944細胞

HDLM2細胞類似產品：：HT-115細胞、HIC細胞、Duke University 4475細胞

Hs 636 T細胞類似產品：：SNG-M細胞、Hs.27細胞、A-101D細胞

Karpas 422細胞類似產品：：WC00059細胞、NS-1細胞、TC7細胞

SP2-0-Ag14細胞類似產品：：KNS-81細胞、Toledo細胞、MHH-CALL2細胞

TGW-nu細胞類似產品：：SKNEP細胞、OCI Ly10細胞、TE-85細胞

Ect1/E6E7細胞類似產品：：NIH-3T3-L1細胞、H-676B細胞、End1/E6E7細胞

Human Hepatocyte Line 5細胞類似產品：：COLO206F細胞、NB.4細胞、Huh7.5細胞

hA549細胞類似產品：：MOLT16細胞、OVCA420細胞、Hs863T細胞

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PK15細胞類似產品：：WM 2664細胞、HEC151細胞、Mel RM細胞

293/EBNA-1細胞類似產品：：SK_N_FI細胞、Ly3細胞、U2-OS細胞

GM-346細胞類似產品：：OVHM細胞、KM H-2細胞、NBLS細胞

Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞類似產品：：QGY7701細胞、CNE-2細胞、PK (15)細胞

HCAEC細胞類似產品：：NCIH522細胞、H.Ep.-2細胞、PLC細胞

SK-MEL3細胞類似產品：：D283MED細胞、MDA-MB231細胞、PaTu 8988s細胞

MKN45細胞類似產品：：TE-671細胞、MCMEC細胞、SVG(P12)細胞

LAD 2:人肥大復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

MX-1細胞類似產品：：HFE-145細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞、N-2a細胞

Pt K1 (NBL-3)細胞類似產品：：Jurkat 77細胞、Hs-281-T細胞、Huh-7.5.1細胞

Melan-a細胞類似產品：：HCC15細胞、HNE1細胞、HPAF-2細胞

NCl-H157細胞類似產品：：BC-027細胞、HITT15細胞、MDA-134細胞

H1792細胞類似產品：：IM9細胞、Caco-2BBe細胞、MRC-V細胞

R 2 C細胞類似產品：：CCD-841-CoTr細胞、MDA-468細胞、HCEC-12細胞

Mv1Lu細胞類似產品：：P3X63-Ag8.653細胞、KU-812細胞、BIU-87細胞

KBM-5細胞類似產品：：BPH-1細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細胞、Oregon J-111細胞

P3-X63-Ag8-6-5-3細胞類似產品：：JJN-3細胞、CT26細胞、HEK293-EBNA1細胞

HuP-T3細胞類似產品：：SK-CO-1細胞、SMMC-7721細胞、HCT-116細胞

ARO81-1細胞類似產品：：IBRS2細胞、Bowes melanoma cells細胞、CoCL2細胞

QGP-1細胞類似產品：：BALB 3T3 clone A31細胞、HSC-1細胞、JB6 Cl 30細胞

HELA-GFP細胞類似產品：：251MG細胞、NCI-128細胞、HuPT4細胞

DLD-1細胞類似產品：：HCC1419細胞、BGC-823細胞、LS1034細胞

293FT細胞類似產品：：Panc327細胞、BC3 H1細胞、C4-2 B細胞

CV 1細胞類似產品：：hADSCs細胞、BALL-1細胞、Z310細胞

C2-C12細胞類似產品：：AQ-Mel細胞、WEHI3細胞、KYSE-450細胞

Hep 3B細胞類似產品：：Factor Dependent Continuous-Paterson 1細胞、SNGM細胞、HEK 293 c18細胞

Hx147細胞類似產品：：343 MG細胞、BJAB細胞、COLO 394細胞

H2196細胞類似產品：：LA-N-6(OAN)細胞、MC/CAR細胞、IGR-OV1細胞

SJRH 30細胞類似產品：：NCI-H498細胞、GA-10(Clone 4)細胞、HVSMC細胞

OCI/AML-5細胞類似產品：：EC-GI-10細胞、253J-Bladder-V細胞、MHCC97-H細胞

MPC-11細胞類似產品：：U2OS細胞、SJSA細胞、HIT.T15細胞

Epstein-Barr-1細胞類似產品：：HIT T-15細胞、HCC1359細胞、MDCC-MSB-1細胞

HHL-5細胞類似產品：：PL 5細胞、NCI-H1963細胞、LAD2細胞

2E8細胞類似產品：：HCT 8細胞、U-87細胞、SKUT1細胞

HEK293EBNA細胞類似產品：：OACP4 C細胞、NCIH2110細胞、3AA細胞

D283 Med細胞類似產品：：253JB-V細胞、L 428細胞、BC3H1細胞

NCI H345細胞類似產品：：TOV112D細胞、Earles's cells細胞、PATU-S細胞

MOLT-16細胞類似產品：：T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞、HT 144細胞、NCIH1437細胞

HCC78細胞類似產品：：SK-N-SH細胞、SK-MEL2細胞、SW-837細胞

Panc08.13細胞類似產品：：PC-3M-1E8細胞、MEL-526細胞、NIH3T3-L1細胞

MPASMC細胞類似產品：：Panc_03_27細胞、H-1672細胞、T-HSC細胞

ONS76細胞類似產品：：TCam 2細胞、He-La細胞、MG63細胞

OCI/AML-3細胞類似產品：：MDST8細胞、293FT細胞、He La細胞

MM6細胞類似產品：：Kit225細胞、HT29細胞、H2081細胞

OVMANA細胞類似產品：：SK-MEL-5細胞、SK-RC 52細胞、VeroE6細胞

MDA-MB453細胞類似產品：：CCD966SK細胞、HEC-1-B細胞、B16/BL6細胞

CCD-841CoN細胞類似產品：：HPF細胞、Tsup-1細胞、hTERT-RPE細胞

CCLP1細胞類似產品：：HS0578T細胞、P3X63-Ag8.653細胞、F442-A細胞

NBL-7細胞類似產品：：KU 812F細胞、M14細胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized細胞

CAL12T細胞類似產品：：L6細胞、SEG1細胞、NCI H747細胞

TE-4細胞類似產品：：GOS-3細胞、Hs 675.T細胞、SNT-8細胞

SKMEL-2細胞類似產品：：M-20細胞、GC-2spd(ts)細胞、BAC1.2F5細胞

Leukemia L1210細胞類似產品：：Normal Rat, August 3, 1983細胞、NCI.H226細胞、HCGC細胞

CaEs17細胞類似產品：：X63Ag8-653細胞、SU-DHL-4細胞、B16/BL6細胞

H-2347細胞類似產品：：Anglne細胞、WM-239細胞、TCC Sup細胞

C4-1細胞類似產品：：IOSE80UBC細胞、HeLa S 3細胞、COR-L88細胞

WiDrTC細胞類似產品：：SNU-251細胞、H-1954細胞、CHO-K1細胞

HRA 19細胞類似產品：：Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞、NCI-H2444細胞、L02細胞

COLO 824細胞類似產品：：KY-270細胞、NP-69細胞、HEK293-EBNA細胞

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CL 1-0細胞類似產品：：HFT-8810細胞、U373-MG細胞、NCI-H292細胞

TE354T細胞類似產品：：A2008細胞、RPMI6666細胞、PANC 813細胞

HEK-293-EBNA細胞類似產品：：32Dcl3細胞、Bac 1.2F5細胞、BALB/3T3 clone A31細胞

SW-1990細胞類似產品：：H-2342細胞、NB19-RIKEN細胞、SKNEP細胞

Hs888 Lu細胞類似產品：：NE-4C細胞、NTERA-2 cl.D1細胞、Ca9-22細胞

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Jurkat-E6細胞類似產品：：Baby Hamster Kidney-21細胞、WM-451Lu細胞、NIH 3T6細胞

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BNCL-2細胞類似產品：：CAKI 2細胞、QGY-7701細胞、A72細胞

Z-138細胞類似產品：：H838細胞、LNCaP-FGC細胞、D283 Med細胞

BEAS-2B細胞類似產品：：PA-1細胞、143TK-細胞、HCC0078細胞

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HCC-1599細胞類似產品：：B/C3T3細胞、HBEpiC細胞、Human ErythroLeukemia細胞

OCI/AML-5細胞類似產品：：EC-GI-10細胞、253J-Bladder-V細胞、MHCC97-H細胞

NCIH2085細胞類似產品：：Hs840T細胞、Mino細胞、IEC6細胞

PE/CA-PJ-34細胞類似產品：：SK-OV-433細胞、SUM52細胞、S-16細胞

MDA231細胞類似產品：：JURKAT E-61細胞、Panc813細胞、KU-812細胞

McG-1細胞類似產品：：Y3.AG.1.2.3細胞、HPDEC細胞、ECV-304細胞

HCMEC(BL12-H)細胞類似產品：：OVCAR10細胞、NCI-H1404細胞、AMO-1細胞

U-118MG細胞類似產品：：PK-15細胞、293EBNA細胞、HPDEC細胞

Vertebral Cancer of the Prostate細胞類似產品：：CT26.WT細胞、JTC-39細胞、MMVECs細胞

mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞類似產品：：MC/CAR細胞、HEM-L細胞、HuH6細胞

SKMEL-31細胞類似產品：：NOMO1細胞、EST81細胞、b.End3細胞

LAD 2:人肥大復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

MD Anderson-Metastatic Breast-435細胞類似產品：：LNCaP-FGC細胞、HOC-1細胞、CMT-64細胞

MC-3T3-E1細胞類似產品：：NUGC-4細胞、Mo 59J細胞、NCI-SNU-182細胞

AKR細胞類似產品：：PA-TU S細胞、RS 4;11細胞、184A1細胞

HMrSV5細胞類似產品：：CL11細胞、NCIH1437細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞

BLO11細胞類似產品：：H508細胞、H522細胞、C918細胞

M-14細胞類似產品：：SW626細胞、NIH 3T6細胞、BNL-CL.2細胞

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