"WM239A:人黑色素瘤復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)HAO與不HAO至關(guān)重要的考驗。很多同學(xué)都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺HAO的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非常肯定地說，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更HAO一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況把握）。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

SUSM1細胞類似產(chǎn)品：：SW 527細胞、KNS-42細胞、Eca109細胞

Emory University-2細胞類似產(chǎn)品：：ME 180細胞、MDA-MB-157細胞、HIT clone T15細胞

H-2405細胞類似產(chǎn)品：：Lu-99A細胞、WiDr細胞、WM115F細胞

MCF-12A細胞類似產(chǎn)品：：LSC-1細胞、SKHEP-1細胞、EB-2細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：黑色素瘤；女性

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細胞形態(tài)：上皮細胞樣

L-M[TK-]細胞類似產(chǎn)品：：FRTL 5細胞、H2286細胞、C57 Mouse Tumor 93細胞

TSU-Pr1細胞類似產(chǎn)品：：H1568細胞、COLO-829細胞、R.K.13細胞

786O細胞類似產(chǎn)品：：OCI-Ly 1細胞、NCI/ADR-RES細胞、NCI-H441-4細胞

細胞傳代注意事項：①傳代培養(yǎng)時注意無菌操作并防止細胞間的交叉污染。所有操作盡量靠近酒精燈火焰。每次ZuiHAO只進行一種細胞的操作。每種細胞使用一套器材；②每天觀察細胞形態(tài)，掌握HAO細胞是否健康的標(biāo)準(zhǔn)：健康細胞的形態(tài)飽滿，折光性HAO，生長致密時即可傳代；③如發(fā)現(xiàn)細胞有污染跡象，應(yīng)立即采取措施，一般應(yīng)棄置污染的細胞，如果必須挽救，可加含有抗生素的BBS或培養(yǎng)基反復(fù)清洗，隨后培養(yǎng)基中加入較大量的抗生素，并經(jīng)常更換培養(yǎng)基。傳代細胞的建系和維持：細胞系的維持通過換液傳代再換液、再傳代和細胞種子凍存來實現(xiàn)。對每一個細胞系來說都有其自身的點，要做HAO建系的維持必須記錄HAO細胞檔案,換液傳代和做HAO細胞系的管理工作。培養(yǎng)細胞的凍存及復(fù)蘇：細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細胞凍存在-１９６℃液氮中，儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融。

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

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細胞生長特性：貼壁

貼壁細胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，將細胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長，此時細胞生長狀態(tài)良HAO，當(dāng)補液時，需避免反復(fù)吹打。

HK-2 [Human kidney]細胞類似產(chǎn)品：：University of Arizona Cell Culture-812細胞、KBM-7/Hap8細胞、H-522細胞

MLOY4細胞類似產(chǎn)品：：PC615.3細胞、GM346細胞、GM00346細胞

DF1細胞類似產(chǎn)品：：MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞、H838細胞、MC3T3-E1 Subclone 14細胞

RCC4細胞類似產(chǎn)品：：KM933細胞、NCI-SNU-423細胞、HEK 293-F細胞

SU86_86細胞類似產(chǎn)品：：HFL-I細胞、Melan-a細胞、L-Wnt3A細胞

HEL92.1.7細胞類似產(chǎn)品：：MLMEC細胞、MDA157細胞、GM05372細胞

143 B細胞類似產(chǎn)品：：NCI-SNU-407細胞、ARO-81細胞、SKM-1細胞

RS411細胞類似產(chǎn)品：：NT2-D1細胞、LAN-5細胞、HEK293-FT細胞

IPLB-SF 21AE細胞類似產(chǎn)品：：SKO3細胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞、HCC-2108細胞

NCI-H2081細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H102細胞、Mouse podocyte細胞、Evsa-T細胞

LC1細胞類似產(chǎn)品：：PAa細胞、EA. hy 926細胞、AN3 CA細胞

HT clone H9細胞類似產(chǎn)品：：AsPC-1細胞、KU-19-19細胞、NCI-H2081細胞

H-1048細胞類似產(chǎn)品：：3T3-442A細胞、C 6細胞、OC316細胞

DHL-2細胞類似產(chǎn)品：：Normal Rat Kidney細胞、PL11細胞、Fu97細胞

UWB1289細胞類似產(chǎn)品：：A 2780 CP細胞、Panc_05_04細胞、NCIH2081細胞

LAN6細胞類似產(chǎn)品：：TE-8細胞、AD-293細胞、U373細胞

LAN6細胞類似產(chǎn)品：：TE-8細胞、AD-293細胞、U373細胞

WEHI-3B細胞類似產(chǎn)品：：Okayama University Medical School-23細胞、H1385細胞、GA-10-Clone-4細胞

H-226細胞類似產(chǎn)品：：RSC96細胞、CAL 62細胞、NCI-H28細胞

COC1/CDDP細胞類似產(chǎn)品：：UCLA RO-81A-1細胞、IFRS1細胞、DHL-6細胞

NCI-H660細胞類似產(chǎn)品：：SK-MEL5細胞、GM03573細胞、LS 1034細胞

N-2a細胞類似產(chǎn)品：：SUDHL16細胞、B16-BL6細胞、NCI.H226細胞

MDA-MB-175細胞類似產(chǎn)品：：293T/17細胞、MDA-MB-453細胞、UCH-1細胞

CRFK細胞類似產(chǎn)品：：TCC-PAN2細胞、JVM3細胞、NCI.H522細胞

WM239A:人黑色素瘤復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

TOV-112細胞類似產(chǎn)品：：SW-626細胞、RWPE2細胞、RCSMC細胞

Human Corneal Epithelial cells-Transformed細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1755細胞、NCI H69細胞、WEHI-3B細胞

NCIH295R細胞類似產(chǎn)品：：TI-73細胞、NCIH1755細胞、NCI-H2591細胞

HEK.EBNA細胞類似產(chǎn)品：：NCIH2196細胞、WM115F細胞、NCIH226細胞

CL1細胞類似產(chǎn)品：：BEL 7404細胞、HEL-92細胞、MiaPaCa-2細胞

HSC-4細胞類似產(chǎn)品：：RPMC細胞、COLO 679細胞、SK-N-BE細胞

KM933細胞類似產(chǎn)品：：Psi-2 DAP細胞、SK-Mel1細胞、BT549細胞

118 MG細胞類似產(chǎn)品：：HNE3細胞、LK-2細胞、B16/F10細胞

P3-NS1/1-Ag4-1細胞類似產(chǎn)品：：NHLF細胞、NCI-H524細胞、Caco 2細胞

B95.8細胞類似產(chǎn)品：：BC-3-H-I細胞、HT29細胞、Kit-225-K6細胞

J774.A1細胞類似產(chǎn)品：：DMS114細胞、UMR 106細胞、RGC-6細胞

RPMI1788細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1436細胞、UM-UC14細胞、NCI-H1436細胞

High-5細胞類似產(chǎn)品：：NCIH446細胞、CL-40細胞、HCC-1359細胞

V79-4細胞類似產(chǎn)品：：LAN5細胞、Tissue Culture-1細胞、HPAFII細胞

HRA-19細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H441細胞、aTC1-6細胞、HL 60細胞

RPMI7951細胞類似產(chǎn)品：：SK-N-BE(2)-C細胞、HT144細胞、TGW-nu細胞

H220細胞類似產(chǎn)品：：H-676細胞、L cells細胞、EL 4細胞

THLE2細胞類似產(chǎn)品：：7860細胞、SCC90細胞、SNK-6細胞

J111細胞類似產(chǎn)品：：NCIH650細胞、Hs819T細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞

COV 434細胞類似產(chǎn)品：：HEK/EBNA細胞、SKNBE2C細胞、HT1197細胞

BeWo細胞類似產(chǎn)品：：SU-DHL-5細胞、TE-3A細胞、UM-UC-3細胞

GTL16細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1184細胞、H-1341細胞、MBVP細胞

HO1N1細胞類似產(chǎn)品：：Case 3細胞、Clone M-3細胞、VMM5A細胞

SUSM-1細胞類似產(chǎn)品：：NCIH2073細胞、Hs604T細胞、MKN45細胞

RPMI-1788細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1693細胞、LK2細胞、SCC-1395細胞

EFM192C細胞類似產(chǎn)品：：C3H/10T1/2-clone8細胞、LS411N細胞、H3255_DA細胞

Human Hepatocyte Line 5細胞類似產(chǎn)品：：COLO206F細胞、NB.4細胞、Huh7.5細胞

MKN1細胞類似產(chǎn)品：：MDCK2細胞、KLN-205細胞、Ly3細胞

MCF/Adr細胞類似產(chǎn)品：：BE(2)M-17細胞、BEL-7404細胞、CCC-ESF-1細胞

SKG3A細胞類似產(chǎn)品：：IOSE29細胞、B-3細胞、SW-48細胞

NPC-TW-039細胞類似產(chǎn)品：：MDAMB231細胞、OV433細胞、LWnt3A細胞

HOC1細胞類似產(chǎn)品：：LIXC-002細胞、H1092細胞、OVCA420細胞

SW-1990細胞類似產(chǎn)品：：H-2342細胞、NB19-RIKEN細胞、SKNEP細胞

Super Tube細胞類似產(chǎn)品：：SCCVII/St細胞、COR-L23/P細胞、TE5細胞

COLO678細胞類似產(chǎn)品：：P30 OHK細胞、PANC403細胞、H9細胞

3T6細胞類似產(chǎn)品：：L cells細胞、P560細胞、MonoMac1細胞

EU-2細胞類似產(chǎn)品：：TE-11細胞、BHT-101細胞、B6Tert-1細胞

DF1細胞類似產(chǎn)品：：MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞、H-748細胞、AAV-293細胞

ARIP細胞類似產(chǎn)品：：AR4-2J細胞、H1666細胞、CFSC-2G細胞

WM 451-Lu細胞類似產(chǎn)品：：HCC2185細胞、H-716細胞、MKN 45細胞

293 H細胞類似產(chǎn)品：：RGC5細胞、NCI-H2291細胞、H-125細胞

A2780CP70細胞類似產(chǎn)品：：P3 NS1 Ag4/1細胞、THLE2細胞、B16 melanoma細胞

BCAP37細胞類似產(chǎn)品：：HSCT6細胞、HSC-3細胞、GM00637細胞

MC3T3-E1 Subclone 14細胞類似產(chǎn)品：：P3/X63/Ag8.653細胞、FLS細胞、DMS 53細胞

Sp2/0-Ag-14細胞類似產(chǎn)品：：H1404細胞、SW 1463細胞、MCAEC細胞

OB2細胞類似產(chǎn)品：：Lieming Xu-2細胞、OCI/AML4細胞、A2780細胞

PC-9/S1細胞類似產(chǎn)品：：SU86-86細胞、H-498細胞、D407細胞

NB4細胞類似產(chǎn)品：：Hep G2細胞、H524細胞、COR-L105細胞

H-128細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H125細胞、UO-31細胞、H-9細胞

SiHa細胞類似產(chǎn)品：：SW 620細胞、HCT8細胞、A.704細胞

MADB-106細胞類似產(chǎn)品：：MNNG/HOS Clone F-5細胞、MUTZ-1細胞、Caov-3細胞

TALL-104細胞類似產(chǎn)品：：Mino細胞、LTEP-sm 1細胞、HEK-293-EBNA細胞

C-33 A細胞類似產(chǎn)品：：ST2細胞、KRC-Y細胞、VP 229細胞

H2141細胞類似產(chǎn)品：：Reuber H-35細胞、LP-1細胞、NCI-Hut 125細胞

CMT-167細胞類似產(chǎn)品：：SCLC21H細胞、Hs-578-T細胞、SU8686細胞

OE-19細胞類似產(chǎn)品：：Nthy-ori 3.1細胞、CTLA4Ig-24細胞、JM-1細胞

GM04154B細胞類似產(chǎn)品：：CG-4細胞、HCV-29細胞、SNU-354細胞

M-G63細胞類似產(chǎn)品：：SKMel-5細胞、SUIT-2細胞、HLE-B3細胞

M-G63細胞類似產(chǎn)品：：SKMel-5細胞、SUIT-2細胞、HLE-B3細胞

MLM細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1581細胞、NPA-87細胞、GM03320D細胞

GC-1 spg細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H3255細胞、CHL-CL-11細胞、NMC-G1細胞

Hs895T細胞類似產(chǎn)品：：Roswell Park Memorial Institute 7951細胞、SK-N-AS細胞、MOLP2細胞

OVCA-420細胞類似產(chǎn)品：：RIN-m5F細胞、Fetal Rhesus Kidney-4細胞、Pa14C細胞

T/G HA VSMC細胞類似產(chǎn)品：：10T1/2細胞、AsPC-1細胞、HARAB細胞

MV-3細胞類似產(chǎn)品：：H1672細胞、Caco-2/BBe細胞、TGBC-11-TKB細胞

HT29細胞類似產(chǎn)品：：SW 962細胞、OVCA-432細胞、HCT_116細胞

Colon 26細胞類似產(chǎn)品：：Jiyoye (P-2003)細胞、Ramos細胞、MHCC97細胞

F98細胞類似產(chǎn)品：：MC-CAR細胞、YES 2細胞、YAC-1細胞

SNU-449細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2347細胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)細胞、TPC1細胞

C 643細胞類似產(chǎn)品：：NPC-TW 01細胞、HTh74細胞、MDA-453細胞

A2780/Taxol細胞類似產(chǎn)品：：RT112細胞、OVMANA細胞、HSC/mHSC細胞

SW-780細胞類似產(chǎn)品：：U-251 MG細胞、Kasumi 1細胞、ID8細胞

HEK.EBNA細胞類似產(chǎn)品：：NCIH2196細胞、WM115F細胞、NCIH226細胞

H-2291細胞類似產(chǎn)品：：SuDHL 4細胞、BCaP-37細胞、HeLa/DDP細胞

Balb/3T3-4-Cl31細胞類似產(chǎn)品：：PL-5細胞、Tb1.Lu細胞、CHG5細胞

NCI-H1688細胞類似產(chǎn)品：：MOLT3細胞、P 3 HR 1細胞、CCD 1112SK細胞

PLCPRF5細胞類似產(chǎn)品：：SCL-II細胞、QBC939細胞、L929(NCTC)細胞

MV4-11細胞類似產(chǎn)品：：EBTr (NBL-4)細胞、AC16 [Human hybrid]細胞、SKLU01細胞

D-341Med細胞類似產(chǎn)品：：MT2細胞、hTERT-HPNE細胞、RPMI #8226細胞

GL-261細胞類似產(chǎn)品：：Hs-746T細胞、NCI-H1623細胞、CCLP-1細胞

Mouse Colon 38細胞類似產(chǎn)品：：KTC1細胞、SNU-484細胞、MDA-231細胞

HMEL細胞類似產(chǎn)品：：Strain V細胞、HEK 293A細胞、H1184細胞

WM239A:人黑色素瘤復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

Lu-165細胞類似產(chǎn)品：：HEY A8細胞、HuO9細胞、HCC 70細胞

OVTOKO細胞類似產(chǎn)品：：RL-65細胞、Tn 5B1-4細胞、ketr 3細胞

HPBALL細胞類似產(chǎn)品：：HBL100細胞、FDCP1細胞、3T3-F442A細胞

Human Microglia Clone 3細胞類似產(chǎn)品：：HCC2108細胞、SCL2細胞、32Dcl3細胞

GM12878細胞類似產(chǎn)品：：KM-12細胞、COR-L26細胞、HDLM2細胞

ChaGo-K-1細胞類似產(chǎn)品：：Michigan Cancer Foundation-7細胞、LS123細胞、CAKI1細胞

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