"DH82:狗腎惡性組織細胞增生癥復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

細胞可選擇干冰運輸及發(fā)送復蘇存活細胞方式：干冰運輸，收到后立即轉入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇；存活細胞，收到后應繼續(xù)生長，傳代達到細胞生長狀態(tài)良HAO時，再進行凍存。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。細胞接收后的處理方式：收到細胞后，請檢查是否漏液，如果漏液，請拍照片發(fā)給我們；請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h；棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加6ml新的完全培養(yǎng)基；如果細胞長滿（90%以上）請及時進行細胞傳代；接到細胞第二天，請檢查細胞是否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請及時與我們取得聯(lián)系。細胞培養(yǎng)步及凍存條件：驟準備細胞所需培養(yǎng)基；YOU質胎牛血清，10%；雙抗，1%；培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%；凍存液：92%血清，8%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。細胞復蘇及何時傳代：復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

H322T細胞類似產品：：H676B細胞、MV-522細胞、U138MG細胞

CT-26細胞類似產品：：Immortal Pig Intestinal-2I細胞、Hs-606-T細胞、A2780/Taxol細胞

U-373-MG細胞類似產品：：MC 3T3-E1細胞、WSU-DLCL-2細胞、PANC0327細胞

C32-mel細胞類似產品：：GLAG-66細胞、huH 1細胞、WEHI-279細胞

[細胞產品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：腎；Golden Retrieve

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細胞形態(tài)：上皮細胞樣

HCC9204細胞類似產品：：BEL 7402細胞、RKO_AS45細胞、Roswell Park Memorial Institute 7666細胞

NCIH1838細胞類似產品：：High Five細胞、A-20細胞、RMS 1598細胞

Swiss 3T3細胞類似產品：：JROECL 19細胞、624細胞、HNE2細胞

細胞傳代注意事項：①傳代培養(yǎng)時注意無菌操作并防止細胞間的交叉污染。所有操作盡量靠近酒精燈火焰。每次ZuiHAO只進行一種細胞的操作。每種細胞使用一套器材；②每天觀察細胞形態(tài)，掌握HAO細胞是否健康的標準：健康細胞的形態(tài)飽滿，折光性HAO，生長致密時即可傳代；③如發(fā)現(xiàn)細胞有污染跡象，應立即采取措施，一般應棄置污染的細胞，如果必須挽救，可加含有抗生素的BBS或培養(yǎng)基反復清洗，隨后培養(yǎng)基中加入較大量的抗生素，并經常更換培養(yǎng)基。傳代細胞的建系和維持：細胞系的維持通過換液傳代再換液、再傳代和細胞種子凍存來實現(xiàn)。對每一個細胞系來說都有其自身的點，要做HAO建系的維持必須記錄HAO細胞檔案,換液傳代和做HAO細胞系的管理工作。培養(yǎng)細胞的凍存及復蘇：細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術。細胞凍存在-１９６℃液氮中，儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復蘇的原則是慢凍快融。

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

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細胞生長特性：貼壁

一般使用trypsin-EDTA 濃度為0.25%trypsin-0.53mM EDTA.2Na或0.05%trypsin-0.02mM EDTA.2Na。消化液濃度過GAO時，易造成培養(yǎng)基中細胞碎片增多，黑渣子增多，常規(guī)細胞傳代時建議用0.05%的胰酶進行消化，對于難消化的細胞可采用0.25%胰酶進行消化，細胞密度過GAO超過80%時，采用分步消化法。胰酶儲存在-20°C，解凍在4°C進行，次開瓶后應立即少量分裝于無菌試管中，保存于-20°C，避免反復冷凍解凍造成trypsin之活性降低，并可減少污染之機會。胰酶消化的程度是細胞培養(yǎng)中的一個關鍵步驟：消化過度細胞碎片增多，黑渣子增多，細胞會成片脫落，嚴重影響細胞活性，并有部分細胞漂浮，隨棄去的胰酶流失；消化不足則細胞難于從瓶壁上吹下，反復吹打同樣也會損傷細胞活性。不同細胞對消化液的敏感性不同，胰酶消化的時間也會有差異。胰酶消化時間與胰酶的濃度，是否含EDTA，胰酶的儲存時間，胰酶的儲存溫度，是否反復凍融，消化加入的胰酶體積，消化溫度及細胞的密度有關。對于新購買的細胞，建議客戶先用低濃度的胰酶仔細去摸索一下消化時間，可每隔1分鐘鏡下觀察細胞是否變圓，記錄Zui佳消化時間，下一次操作參考之前的記錄來控制時間即可。

WPMY-1細胞類似產品：：8226細胞、K7M2-WT細胞、VM Cub 1細胞

COV504細胞類似產品：：H341細胞、Rh30細胞、Hs 27細胞

A-9細胞類似產品：：LAD 2細胞、IOSE 29細胞、ETCC-007細胞

K562/ADP細胞類似產品：：SJRH-30細胞、TE-85 clone 5細胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細胞

Hs 695.T細胞類似產品：：HSC6細胞、IBRS-2細胞、CHL-11細胞

MT-4細胞類似產品：：HPAC細胞、PANC0813細胞、BBE細胞

FM-88細胞類似產品：：KM H-2細胞、MC26細胞、N1E115細胞

V79-GalK1細胞類似產品：：GM05372E細胞、NCIH322細胞、NCIH2196細胞

NCI-SNU-C1細胞類似產品：：SH-SY5Y細胞、HeLa S3細胞、PC-9/GR細胞

CV-1 in Origin Simian-1細胞類似產品：：H-1993細胞、PG-4 (S+L-)細胞、TF-1a細胞

MC/9細胞類似產品：：A7r5細胞、H-1355細胞、CMEC/D3細胞

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HSKMC細胞類似產品：：C8166-CD4細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞、SIRC細胞

MDCKII-WT細胞類似產品：：MMAc-SF細胞、HRGEC細胞、JVM2細胞

KP-2細胞類似產品：：NBL-S細胞、Colo-206F細胞、NCI-SNU-16細胞

P3 NS1 Ag4/1細胞類似產品：：OLN93細胞、Panc 2.03細胞、H-740細胞

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E304細胞類似產品：：SR-786細胞、3LL細胞、U138細胞

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QBC939細胞類似產品：：HRA-19細胞、TE9細胞、C518細胞

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SNU-251細胞類似產品：：NSC-34細胞、751-NA-15細胞、CPA 47細胞

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Hs-695-T細胞類似產品：：H226細胞、JB6 Cl 30細胞、OVCA-420細胞

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FM-88細胞類似產品：：KM H-2細胞、MC26細胞、N1E115細胞

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SW-1222細胞類似產品：：SEG1細胞、GTL 16細胞、RCK-8細胞

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NCI N87細胞類似產品：：MGC-803細胞、MV4-11細胞、NCIH208細胞

GM2131細胞類似產品：：RT-112細胞、P3-X63-Ag8-6-5-3細胞、PIEC細胞

HD-LM-2細胞類似產品：：EOC 20細胞、GM04679細胞、FU-MMT-1細胞

BC-024細胞類似產品：：MGH-UI細胞、SUM 159細胞、MV-1-Lu細胞

RT4細胞類似產品：：U-118-MG細胞、OLN 93細胞、SVOG細胞

H2591細胞類似產品：：Hep G2-Luc細胞、SKOV-3細胞、CEMC7細胞

Institute for Medical Research-32細胞類似產品：：MDA-415細胞、CORL26細胞、PC-3M-1E8細胞

IAR 20細胞類似產品：：NG-108-15細胞、HIBEC細胞、RINm-5F細胞

A-9細胞類似產品：：LAD 2細胞、Los Angeles Prostate Cancer-4細胞、C2BBe 1細胞

3T3-A31細胞類似產品：：RBE細胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞、SupB15WT細胞

U937細胞類似產品：：Kasumi-6細胞、Rat Lung-65細胞、SF 126細胞

H-196細胞類似產品：：HCC941122細胞、NCIH510細胞、X63Ag8-653細胞

NCI-H2126細胞類似產品：：NCIH1651細胞、BNL-HCC細胞、H-441細胞

526mel細胞類似產品：：MC3T3-E1(C4)細胞、RPMI7951細胞、HD11細胞

BCaP 37細胞類似產品：：LA-N-1細胞、PC615.3細胞、AG06814-N細胞

CAMA1細胞類似產品：：HL-7702細胞、MX-1細胞、2V6.11細胞

PA1細胞類似產品：：Nb2a細胞、EJ-1細胞、K-562細胞

C-643細胞類似產品：：AD293細胞、RA.1細胞、Granta519細胞

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MDAMB175VII細胞類似產品：：HCV-29細胞、CT-26細胞、WM451細胞

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SW48細胞類似產品：：NCI-H2452細胞、LAN5細胞、RS4:11細胞

SUM 159細胞類似產品：：C8-D1A細胞、IALM細胞、NCI-H2066細胞

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Keio University-19-19細胞類似產品：：SF539細胞、RPMI no 8226細胞、IHH-4細胞

HCO細胞類似產品：：SNU368細胞、Wien 133細胞、SJSA-1細胞

Hx-147細胞類似產品：：PLB 985細胞、MES-23.5細胞、PG-4細胞

Hep 3B2_1-7細胞類似產品：：SMMC 7721細胞、QGP 1細胞、HEH2細胞

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Vero 76 clone E6細胞類似產品：：EFO 27細胞、HMCB細胞、PaTu-8988s細胞

E304細胞類似產品：：SR-786細胞、3LL細胞、U138細胞

RS4;11細胞類似產品：：KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150

細胞、Colo741細胞、D10G41細胞

LNT-229細胞類似產品：：H1435細胞、MAVER-1細胞、C-33A細胞

ME16C細胞類似產品：：NCI-H250細胞、Hs-611-T細胞、3T3J2細胞

OVCAR 4細胞類似產品：：TSCC1細胞、HIEC細胞、NPA-87細胞

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