"KYSE-30:人食道癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

貼壁細胞凍存注意事項：細胞凍存液需提前配制，不可直接將DMSO加入細胞懸液中；不同細胞消化時間有差異，以實際鏡檢結(jié)果為準(zhǔn)，大部分細胞回縮變圓并有少量細胞脫落即可中止消化，消化時間不宜過長；應(yīng)選擇匯合度80%-90%左右，細胞處于對數(shù)生長期時進行凍存操作，確保細胞凍存時狀態(tài)Zui佳，凍存密度可根據(jù)細胞性進行調(diào)整；凍存細胞保存溫度應(yīng)低于-130℃，不可在-80℃長期保存。貼壁細胞凍存操作步驟：從培養(yǎng)箱中取出準(zhǔn)備凍存的細胞；顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)并拍照記錄；酒精消毒培養(yǎng)瓶后放入安全柜中；吸去多余的培養(yǎng)基，加人2~3ml(PBS緩沖液)潤洗一次；加入1ml胰酶，放入37℃消化；消化1min左右，在顯微鏡下觀察細胞消化情況；消化完全后，加3ml完全培養(yǎng)基終止；將細胞懸液移入15ml離心管中離心，1000rpm/min（約200g）離心3-5min；吸去多余的液體，向細胞沉淀中加入適量的凍存液，輕輕吸打混勻；按比例分裝至凍存管中；貼HAO標(biāo)簽后放入梯度凍存盒中；將凍存盒放入-80℃，降溫過夜后，移入液氮中保存。貼壁細胞凍存實驗準(zhǔn)備事項：將15mL離心管、凍存管、PBS緩沖液、移液管、電動移液器等物品提前放入生物安全柜中，紫外照射30min消毒滅菌；細胞完全培養(yǎng)基、0.25%胰酶-0.02%EDTA、細胞凍存液等從4℃冰箱中取出后，復(fù)溫至室溫，備用；程序降溫盒復(fù)溫至室溫備用。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

HCASMC細胞類似產(chǎn)品：：NR-8383細胞、J-774細胞、MA-104細胞

Caco-2BBe細胞類似產(chǎn)品：：SW 954細胞、SCC-9細胞、NCI-H2141細胞

LS-411細胞類似產(chǎn)品：：H1693細胞、MC3T3-E1 Subclone 14細胞、OVCA433_Bast細胞

B35細胞類似產(chǎn)品：：HT-3細胞、NCI-H1688細胞、MeT-5A細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：來源于一位６４歲，患有高分化的中段食管鱗癌的男性患者。

KYSE-30:人食道癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

BE(2)M-17細胞類似產(chǎn)品：：P3X63 AG8-653細胞、GM00637B細胞、50.B1細胞

OCI Ly19細胞類似產(chǎn)品：：H-3255細胞、M-20細胞、HCC70細胞

RIN-m5F細胞類似產(chǎn)品：：NCIN87細胞、CCC-HHM-2細胞、639V細胞

細胞培養(yǎng)無菌操作的演示：凡是帶入超凈工作臺內(nèi)的酒精、PBS、培養(yǎng)基、胰蛋白酶的瓶子均要用７５％酒精擦拭瓶子的外表面；靠近酒精燈火焰操作。器皿使用前必須過火滅菌，繼續(xù)使用的器皿(如瓶蓋、滴管)要放在GAO處，使用時仍要過火。各種操作要靠近酒精燈，動作要輕、準(zhǔn)確，不能亂碰。如吸管不能碰到廢液缸。吸取兩種以上的使用液時要注意更換吸管，防止交叉污染。玻璃器械洗消：一、新的玻璃器皿的洗消：自來水刷洗，除去灰塵。烘干、泡：烤箱中烘干，然后再浸入５％稀中１２小時以除去臟物、鉛、等物。刷洗、烘干：１２小時后立即用自來水沖洗，再用洗滌劑刷洗，自來水沖干凈后用烤箱烘干；泡酸、清洗：用清潔液浸泡１２小時，然后從酸缸內(nèi)撈出器皿用自來水沖洗１５次，Zui后蒸餾水沖洗３-５次和用雙蒸水過３次。烘干、包裝：洗干凈后先烘干，然后用牛皮紙(油光紙)包裝。GAO壓消毒：包裝HAO的器皿裝入GAO壓鍋內(nèi)蓋HAO蓋子，打開開關(guān)和安全閥，當(dāng)蒸氣成直線上升時，關(guān)閉安全閥，當(dāng)指針指向１５磅時，維持２０-３０分鐘。GAO壓消毒后烘干。二、舊的玻璃器皿的洗消：刷洗、烘干：使用過的玻璃器皿可直接泡入來蘇爾液或洗滌劑溶液中，泡過來蘇爾溶液(洗滌劑)的器皿要用清水刷洗干凈，然后烘干。泡酸、清洗：烘干后泡入清潔液(酸液)，１２小時后從酸缸內(nèi)撈出器皿立即用自來水沖洗(避免蛋白質(zhì)干涸后粘附于玻璃上難以清洗)，再用蒸餾水沖洗３次。烘干、包裝：洗干凈的器皿烘干后取出用牛皮紙(油光紙)等包裝。

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

KYSE-30:人食道癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長特性：貼壁

細胞傳代后放入培養(yǎng)箱沒有搖勻，或者放入時搖勻，但在細胞貼壁前，又移動了培養(yǎng)瓶，頻繁開關(guān)培養(yǎng)箱引起的振動或者培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液過少，培養(yǎng)箱擱板表面不平整，這些因素會導(dǎo)致細胞生長不均勻。研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。運輸過程對細胞有嚴(yán)重影響。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認(rèn)為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C 太久。一些懸浮細胞抱團生長是正?，F(xiàn)象，大部分懸浮細胞在細胞密度很GAO的情況下，很可能會出現(xiàn)部分細胞抱團生長的現(xiàn)象，聚團細胞很容易死亡并演化成絮狀物，殃及周圍的懸浮細胞，因此在培養(yǎng)懸浮細胞時需控制HAO細胞密度。如果出現(xiàn)了細胞團，可以通過細胞篩去掉部分較大的細胞團，也可以嘗試一下方法：將細胞懸液收集到15ml離心管中，靜置20min左右，小心取上層細胞上清培養(yǎng)（該方法只能去除部分較大的細胞團）。部分細胞本身存在一定的空泡（如HepG2，Ishikawa及一些耐藥株等），這個是正?，F(xiàn)象。如果只有少數(shù)細胞有內(nèi)出現(xiàn)極少空泡，則很可能是細胞狀態(tài)不佳，可以通過調(diào)整血清濃度，控制消化，控制傳代比例及時間等方法來調(diào)整細胞狀態(tài)；如果大部分細胞出現(xiàn)空泡，且單個細胞內(nèi)空泡數(shù)目偏多，則可能細胞代次較GAO，細胞老化所致，需更換代次較早的細胞。

TOV21G細胞類似產(chǎn)品：：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細胞、PANC-1細胞、SNU398細胞

TR146細胞類似產(chǎn)品：：NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞、T98 G細胞、TF-1細胞

GEO細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1373細胞、BSC-40細胞、OCI-LY-7細胞

MDA PCa 2b細胞類似產(chǎn)品：：COLO357細胞、NCI-H78細胞、HCT/FU細胞

HDMEC細胞類似產(chǎn)品：：Hs895.T細胞、GLC-82細胞、Karpas 422細胞

MIMVEC細胞類似產(chǎn)品：：A2780細胞、CCLP1細胞、SW-780細胞

NCI H929細胞類似產(chǎn)品：：SUM 159細胞、J82COT細胞、CCRF-CEM細胞

NCIH1373細胞類似產(chǎn)品：：H774細胞、BAR-T細胞、OVTOKO細胞

G-Olig2細胞類似產(chǎn)品：：C3H10T1-2細胞、SNUC1細胞、Calu 6細胞

P30 OHK細胞類似產(chǎn)品：：Ly1細胞、M-1細胞、SK-MEL-31細胞

H1930細胞類似產(chǎn)品：：NB.4細胞、HPBALL細胞、HuTu 80細胞

HOCF細胞類似產(chǎn)品：：Psi2-DAP細胞、RPMI1788細胞、Clone Y1細胞

OCI-Ly 7細胞類似產(chǎn)品：：H220細胞、253J-BV細胞、Tsup-1細胞

SU-DH-L5細胞類似產(chǎn)品：：PC 61細胞、RetroPack PT67細胞、EBTr細胞

OVCAR10細胞類似產(chǎn)品：：U 937細胞、LS-180細胞、SAOS 2細胞

hTERT-RPE細胞類似產(chǎn)品：：NPA'87細胞、MEG-01細胞、Adeno-293細胞

hTERT-RPE細胞類似產(chǎn)品：：NPA'87細胞、MEG-01細胞、Adeno-293細胞

L929細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1792細胞、HuCC-T1細胞、293 EBNA細胞

Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細胞類似產(chǎn)品：：GM04671細胞、RKOE6細胞、CW2細胞

hCMEC/D3細胞類似產(chǎn)品：：SACC-83細胞、EBTr細胞、MN9D細胞

MLMA細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H727細胞、COLO-16細胞、SW1417細胞

MIN6細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1568細胞、10RGB細胞、LS 123細胞

SU-DH-L5細胞類似產(chǎn)品：：PC 61細胞、RetroPack PT67細胞、EBTr細胞

Swiss-3T3細胞類似產(chǎn)品：：H-1688細胞、Capan2細胞、HCC1395細胞

KYSE-30:人食道癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

MM1S細胞類似產(chǎn)品：：L-1210細胞、FAT細胞、B5537SKIN細胞

SBC3細胞類似產(chǎn)品：：L-M[TK-]細胞、RPE1細胞、WERI Rb-1細胞

BTI-TN5B1-4細胞類似產(chǎn)品：：HASMC細胞、NTera 2/cl.D1細胞、Human Pancreatic Duct Epithelial細胞

C2BBe1細胞類似產(chǎn)品：：PC3-M細胞、GT39細胞、HPAF2細胞

PA1細胞類似產(chǎn)品：：Nb2a細胞、EJ-1細胞、K-562細胞

RPMI 1846細胞類似產(chǎn)品：：AMC-HN8細胞、CMT64細胞、TE85細胞

Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞類似產(chǎn)品：：PC 12細胞、NCI-H810細胞、Hs 578.T細胞

CT-26 WT細胞類似產(chǎn)品：：Line 697細胞、CAL33細胞、Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細胞

MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞類似產(chǎn)品：：RINm-5F細胞、3T3-Swiss albino細胞、EBC1細胞

V 79-4細胞類似產(chǎn)品：：FHs 74 Int細胞、K 562細胞、AU-565細胞

X63細胞類似產(chǎn)品：：MPASMC細胞、C8-D1A細胞、SU4細胞

Adeno-293細胞類似產(chǎn)品：：VMRC-LCD細胞、TSCC1細胞、8402細胞

HEP-3B2細胞類似產(chǎn)品：：CNE-2Z細胞、OCLY8細胞、KMM-1細胞

hTERTHME1細胞類似產(chǎn)品：：SK-MEL-3細胞、PaCa2細胞、LY-R細胞

GT1-1細胞類似產(chǎn)品：：LY-R細胞、BCaP 37細胞、2B4細胞

SW 900細胞類似產(chǎn)品：：H295R-S1細胞、H1563細胞、Tb1.Lu細胞

H1734細胞類似產(chǎn)品：：H-250細胞、211H細胞、BE2C細胞

MGHU3細胞類似產(chǎn)品：：MOLT.4細胞、WM-115細胞、NCIH1963細胞

NIE 115細胞類似產(chǎn)品：：B16-F10-BL6細胞、Bac1 2F5細胞、NCIH1395細胞

HCC1954-BL細胞類似產(chǎn)品：：HEK-A細胞、SK-MEL-3細胞、MyLa 2059細胞

NCIH2170細胞類似產(chǎn)品：：Karpas-422細胞、Roswell Park Memorial Institute 8226細胞、OCILY7細胞

NCIH2170細胞類似產(chǎn)品：：Karpas-422細胞、Roswell Park Memorial Institute 8226細胞、OCILY7細胞

SHSY5Y細胞類似產(chǎn)品：：H1666細胞、MEF細胞、FL-83B細胞

Plaepi 34細胞類似產(chǎn)品：：MDA PCa 2b細胞、NBL_S細胞、CA922細胞

SK MEL-28細胞類似產(chǎn)品：：Mv 1 Lu細胞、SK-ChA1細胞、RGCs細胞

LN 382細胞類似產(chǎn)品：：SK-N-FI細胞、T98G細胞、HuNS1細胞

A 375細胞類似產(chǎn)品：：Hs 746T細胞、MCF-7/ADR細胞、451Lu細胞

EPC細胞類似產(chǎn)品：：M059J細胞、SPCA1細胞、HCC1419細胞

B6Tert-1細胞類似產(chǎn)品：：CEM-0細胞、EL4細胞、SNT8細胞

BIU-87/Adr細胞類似產(chǎn)品：：OVCA 432細胞、PF-382細胞、KYSE50細胞

NFHIOSE-29細胞類似產(chǎn)品：：NCM356細胞、NCI-H2029細胞、NCIH1341細胞

HepG2-luc細胞類似產(chǎn)品：：SKNO1細胞、TE 671細胞、NRK clone 49F細胞

SK-NMC細胞類似產(chǎn)品：：Swiss 3T6細胞、PAI細胞、MAEC細胞

H2195細胞類似產(chǎn)品：：NCI-SNU-449細胞、COLO679細胞、NCI H716細胞

SUM-149PT細胞類似產(chǎn)品：：AU 565細胞、LIM 1215細胞、HEYA8細胞

OVCAR8細胞類似產(chǎn)品：：RCC4細胞、SK-SH-SY5Y細胞、PANC 813細胞

MDA.MB.435細胞類似產(chǎn)品：：B-cell with DC Morphology細胞、NCI-HUT-292細胞、Melanoma 14細胞

GEO細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1373細胞、DHL4細胞、Walker-Ca.256細胞

KRC Y細胞類似產(chǎn)品：：L540細胞、B-95-8細胞、McG-1細胞

HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞類似產(chǎn)品：：QSG7701細胞、HOP62細胞、THPI細胞

H-1184細胞類似產(chǎn)品：：MES23.5細胞、Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細胞、MH-22a細胞

130T細胞類似產(chǎn)品：：L 132細胞、HuPT4細胞、F81細胞

Panc-327細胞類似產(chǎn)品：：HCEC-12細胞、SN12C細胞、SNU-C2B細胞

Panc05.04細胞類似產(chǎn)品：：HCPEpiC細胞、SW.620細胞、AtT20細胞

NCIH2342細胞類似產(chǎn)品：：RTMC細胞、ssMCF-7細胞、CAL148細胞

EFM-192B細胞類似產(chǎn)品：：NCIH548細胞、CEK細胞、Hs 578T細胞

WSUDLCL2細胞類似產(chǎn)品：：CCC-HPF-1細胞、TE 32細胞、LAN5細胞

HO1N1細胞類似產(chǎn)品：：Case 3細胞、Clone M-3細胞、VMM5A細胞

NE1細胞類似產(chǎn)品：：LS 180細胞、OV-2008細胞、MEC-1細胞

MADISON LUNG TA-109細胞類似產(chǎn)品：：PK136細胞、MIA PaCa-2細胞、C666-1細胞

Mono-Mac-1細胞類似產(chǎn)品：：ssMCF7細胞、ATC241細胞、Normal Rat Kidney細胞

HeLa-S3細胞類似產(chǎn)品：：Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細胞、P3-X63-Ag8細胞、SW 579細胞

A 2058細胞類似產(chǎn)品：：SK-N-BE2C細胞、G-292, clone A141B1細胞、LS 174 T細胞

G-Olig2細胞類似產(chǎn)品：：C3H10T1-2細胞、SNUC1細胞、Calu 6細胞

NCI-SNU-398細胞類似產(chǎn)品：：SCC-9細胞、MDA 231-LM2-4175細胞、SNU423細胞

Ball 1細胞類似產(chǎn)品：：KM-H2細胞、HMEC1細胞、GM03569B細胞

IHHA-1細胞類似產(chǎn)品：：G402細胞、BEL 7405細胞、TE-32細胞

HT-144細胞類似產(chǎn)品：：RMC-1細胞、SU-DH-L5細胞、Line 522細胞

HT-144細胞類似產(chǎn)品：：RMC-1細胞、SU-DH-L5細胞、Line 522細胞

PLA801C細胞類似產(chǎn)品：：MBT-2細胞、CCD-19Lu細胞、Experimental Mammary Tumour-6細胞

Human Embryonic Skin細胞類似產(chǎn)品：：BeWo細胞、UMUC3細胞、SUDHL1細胞

GM-637細胞類似產(chǎn)品：：BL1339細胞、CHAGOK1細胞、AsPC-1細胞

PL-5細胞類似產(chǎn)品：：CCRF-CEM細胞、UACC-893細胞、NTera2 cl.D1細胞

SW 1116細胞類似產(chǎn)品：：WM239A細胞、PF382細胞、MCF-12A細胞

5637細胞類似產(chǎn)品：：2T細胞、H292細胞、SUP T1細胞

MIA-Pa-Ca-2細胞類似產(chǎn)品：：451-LU細胞、JEG-3細胞、Panc 08.13細胞

Hs-343-T細胞類似產(chǎn)品：：FL83B細胞、RCK-8細胞、HCT FET細胞

A 2058細胞類似產(chǎn)品：：SK-N-BE2C細胞、G-292, clone A141B1細胞、LS 174 T細胞

CAL12T細胞類似產(chǎn)品：：L6細胞、SEG1細胞、NCI H747細胞

H-7721細胞類似產(chǎn)品：：TSU-Pr1細胞、TGBC-11-TKB細胞、HEp-2細胞

P3-X63-Ag8細胞類似產(chǎn)品：：Colo-678細胞、Sp2/mIL-6細胞、HEY A8細胞

U-251細胞類似產(chǎn)品：：Hs 606細胞、293E細胞、CT26-clone 25細胞

Leghorn Male Hepatoma cell line細胞類似產(chǎn)品：：2V6.11細胞、P-19細胞、COR-L 105細胞

PC-3M-IE8細胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-231-GFP細胞、M059J細胞、CCK-81細胞

SP2/0 Ag-14細胞類似產(chǎn)品：：Cloudman S91 melanoma細胞、KTA7細胞、Psi-2-DAP細胞

LM TK negative細胞類似產(chǎn)品：：SW1088細胞、P3J細胞、HR1K細胞

SuDHL 8細胞類似產(chǎn)品：：ACC-M細胞、Duck embryo細胞、SK-MEL-28細胞

COLO 678細胞類似產(chǎn)品：：OVCA-432細胞、NCIH295R細胞、Panc-1-P細胞

MESSA細胞類似產(chǎn)品：：M109細胞、KYSE-70細胞、L1210細胞

SG231細胞類似產(chǎn)品：：K7M2細胞、32Dc3細胞、MRMT-1細胞

BJAB-1細胞類似產(chǎn)品：：SF767細胞、SkMel31細胞、Hs739T細胞

WEHI-164細胞類似產(chǎn)品：：HSC 3細胞、3T3(A31)細胞、PC-3M-1E8細胞

KYSE-30:人食道癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

SK-N-SH細胞類似產(chǎn)品：：Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞、DMS-79細胞、STC-1細胞

MDA-MB-453細胞類似產(chǎn)品：：H-2444細胞、C57 Mouse Tumor 64細胞、HS-729細胞

GM02132C細胞類似產(chǎn)品：：HR-8348細胞、GLC82細胞、MC57G細胞

H441細胞類似產(chǎn)品：：HHL5細胞、H748細胞、MNNG/HOS Clone F-5細胞

NCIH1651細胞類似產(chǎn)品：：KG-1細胞、HuT 78細胞、NCIH1792細胞

TE3細胞類似產(chǎn)品：：HT 1376細胞、NCI-H1650細胞、GL-261細胞

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