"MDCK:犬腎復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)HAO與不HAO至關重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺HAO的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更HAO一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況把握）。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

FAT細胞類似產品：：Dunn LM8細胞、IPLB-SF 21AE細胞、H1650_CO細胞

SW1783細胞類似產品：：HCT-GEO細胞、HuH-1細胞、LNCaP-C4-2細胞

NCIH1703細胞類似產品：：NK-10A細胞、Hs 683細胞、A-172MG細胞

CHP 126細胞類似產品：：H-23細胞、OVCAR.3細胞、Cates-1B細胞

[細胞產品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

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細胞形態(tài)：上皮細胞樣

MDAMB330細胞類似產品：：Sarcoma OSteogenic-2細胞、OsA-CL細胞、MADISON LUNG TA-109細胞

PG-BE1細胞類似產品：：H-1792細胞、SUPT-1細胞、H510A細胞

RT 112細胞類似產品：：PLC/PRF5細胞、H-2291細胞、KYSE0520細胞

常見培養(yǎng)細胞預防污染的有效措施：體外培養(yǎng)的細胞受到嚴重污染時，有時即使想盡各種辦法也難以挽回。因此，防止污染，預防是關鍵。只有將預防措施貫穿于整個細胞培養(yǎng)的始終，才能將發(fā)生污染的可能性降到Zui小程度。一般預防可從以下幾方面著手：１)添加抗生素：各種抗生素性質不同，對各種微生物的作用也不同，聯(lián)合應用比單用效果HAO，預防性應用比污染后使用HAO(但迄今尚無對抗支原體抗生素)。但反復使用抗生素會使微生物產生耐藥性，且對細胞本身也有一定影響，因此為避免誘導抗藥細菌，應定期更換培養(yǎng)系統(tǒng)中的抗生素，或盡可能不用抗生素處理；２)從物品、用品消毒滅菌著手：細胞培養(yǎng)所用物品清洗、消毒要徹底，各種溶液滅菌除菌要仔細，并在取樣檢菌一周后確認無菌才能使用。同時，在無菌過濾操作中，隨著濾過體積的增大，濾膜破損的可能性增加，故應選擇Zui后過濾的液體進行檢測。定期對二氧化碳培養(yǎng)箱進行消毒。具體操作：７５%的酒精搽拭培養(yǎng)箱后，使用可移動的紫外燈至少消毒３０min，加入GAO壓滅菌過的超純水于培養(yǎng)箱水槽中保持濕度。也可配制３００ml的飽和酸銅加３L滅菌超純水混合成酸銅溶液加入水槽中。

細胞傳代方法：１：２傳代

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

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細胞生長特性：貼壁生長　

細胞培養(yǎng)中常用設施及設備：實驗室設計：細胞培養(yǎng)是一種無菌操作技術，要求工作環(huán)境和條件必須保證無微生物污染和不受其它有害因素的影響。細胞培養(yǎng)室和設計原則是防止微生物污染和有害因素影響，要求工作環(huán)境清潔、空氣清新，干燥和無煙塵。細胞培養(yǎng)室的設計原則一般是無菌操作區(qū)設在室內較少走動的內側，常規(guī)操作和封閉培養(yǎng)于一室，而洗刷消毒在另一室。常用設施及設備：1)超凈工作臺：也稱凈化工作臺，分為側流式、直流式和外流式三大類。2)無菌操作間：一般由更衣間、緩沖間和操作間三部分組成。操作間放置凈化工作臺及二氧化碳培養(yǎng)箱、離心機、倒置顯微鏡等。緩沖間可放置電冰箱、冷藏器及消毒HAO的無菌物品等。3)操作間：普通培養(yǎng)箱、離心機、水浴鍋、定時鐘、普通天平及日常分析處理物。4)洗刷消毒間：烤箱、消毒鍋、蒸餾水處理器及酸缸等。5)分析室：顯微鏡、計算機及打印機等。

HCMEC細胞類似產品：：C4-2B細胞、LAD-2細胞、Hs706T細胞

TE14細胞類似產品：：C3H/10T1/2 clone 8細胞、OVCAR10細胞、7404細胞

D283MED細胞類似產品：：Lu99A細胞、HEK293S細胞、DoTc2細胞

MILE SVEN1細胞類似產品：：3T3-A31細胞、HuH7細胞、IFRS1細胞

SK-Mel 1細胞類似產品：：Hs 683細胞、KYSE 140細胞、Murine Leydig Tumor Cell line-1細胞

SNU-387細胞類似產品：：H-1395細胞、NCIH1105細胞、UMNSAH/DF#1細胞

3T3-Swiss albino細胞類似產品：：RPTEC/TERT1細胞、SVG(P12)細胞、ANA-1細胞

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KE39細胞類似產品：：HFT8810細胞、ChaGo K-1細胞、HBE 135-E6/E7細胞

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RC13細胞類似產品：：JF305細胞、BE2-C細胞、HSC5細胞

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293E細胞類似產品：：INS-1E細胞、LS 174 T細胞、SHP77細胞

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Jurkat, Clone E6-1細胞類似產品：：H2452細胞、HEYA8細胞、MC3T3E1細胞

PANC1005細胞類似產品：：H-2198細胞、N-87細胞、MOLM-16細胞

MC116細胞類似產品：：Hs839.T細胞、SCaBER細胞、IHHA-1細胞

OV90細胞類似產品：：McG-1細胞、Hs 821.T細胞、PANC-03-27細胞

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293EBNA細胞類似產品：：GM-3573細胞、NCIH929細胞、MB49細胞

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Kasumi-1細胞類似產品：：NCIH1623細胞、HL-60 Clone 15細胞、NCI-H1155細胞

OV1/P細胞類似產品：：CA46細胞、MDAMB435細胞、CCD18細胞

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LA-N-6(OAN)細胞類似產品：：Mel RM細胞、MHCC97H細胞、NG 108-15細胞

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