"SK-MEL-5:人惡性黑色素瘤復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

凍存和復蘇的原則：慢凍快融》當細胞冷到零度以下，可以產生以下變化：細胞器脫水，細胞中可溶性物質濃度升GAO，并在細胞內形成冰晶。如果緩慢冷凍，可使細胞逐步脫水，細胞內不致產生大的冰晶；相反，結晶就大，大結晶會造成細胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復蘇過程應快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重結晶。慢凍程序》1.標準程序：采用細胞凍存器》當溫度在-25℃以上時，1~2℃/min；當溫度達-25℃以下時，5~10℃/min；當溫度達-100℃時，可迅速放入液氮中。2.簡易程序：將冷凍管（管口要朝上）放入紗布袋內，紗布袋系以線繩，通過線繩將紗布袋固定于液氮罐罐口，按每分鐘溫度下降1~2℃的速度，在40min內降至液氮表面過夜，次晨投人液氮中。3.傳統(tǒng)程序：冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時（或隔夜）→液氮槽長期儲存。細胞凍存方法：1.預先配制凍存液》（1）8%DMSO+細胞生長液（92%血清）2.取對數(shù)生長期細胞，經胰酶消化后，加入適量凍存液，用吸管吹打制成細胞懸液（1×10(6)~5×10(6)細胞/ml）。3.加入1ml細胞于凍存管中，密封后標記冷凍細胞名稱和冷凍日期。液氮長期保存。保存細胞的復蘇方法：1.快速解凍》凍存細胞從液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，輕輕搖動冷凍管，使其在1分鐘內全部融化（不要超過3分鐘）。2.解凍后的細胞可直接接種到含完全生長培養(yǎng)液的細胞培養(yǎng)瓶中直接進行培養(yǎng)，24小時后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液，以去除DMSO。3.如果細胞對冷凍保護劑別敏感解凍后的細胞應先通過離心去除冷凍保護劑，然后再接種到含完全生長培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

KP-N-NS細胞類似產品：：CV 1細胞、NTERA-2cl.D1細胞、OVCAR420細胞

Walker256-TC細胞類似產品：：WM239細胞、SW-954細胞、HN4細胞

LM(TK-)細胞類似產品：：HCC0015細胞、373 MG細胞、B/C3T3細胞

SUP T1細胞類似產品：：BT-325細胞、MT-2細胞、SKNF1細胞

[細胞產品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

SK-MEL-5:人惡性黑色素瘤復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

BALB/3T3 (clone A31)細胞類似產品：：OVCAR5細胞、MUTZ3細胞、BNL CL2細胞

mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞類似產品：：MC/CAR細胞、HEM-L細胞、HuH6細胞

PANC 1005細胞類似產品：：BEP2D細胞、Psi-2-DAP細胞、JVM-3細胞

細胞傳代注意事項：①傳代培養(yǎng)時注意無菌操作并防止細胞間的交叉污染。所有操作盡量靠近酒精燈火焰。每次ZuiHAO只進行一種細胞的操作。每種細胞使用一套器材；②每天觀察細胞形態(tài)，掌握HAO細胞是否健康的標準：健康細胞的形態(tài)飽滿，折光性HAO，生長致密時即可傳代；③如發(fā)現(xiàn)細胞有污染跡象，應立即采取措施，一般應棄置污染的細胞，如果必須挽救，可加含有抗生素的BBS或培養(yǎng)基反復清洗，隨后培養(yǎng)基中加入較大量的抗生素，并經常更換培養(yǎng)基。傳代細胞的建系和維持：細胞系的維持通過換液傳代再換液、再傳代和細胞種子凍存來實現(xiàn)。對每一個細胞系來說都有其自身的點，要做HAO建系的維持必須記錄HAO細胞檔案,換液傳代和做HAO細胞系的管理工作。培養(yǎng)細胞的凍存及復蘇：細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術。細胞凍存在-１９６℃液氮中，儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復蘇的原則是慢凍快融。

細胞傳代方法：１：３-１：６傳代，２-３天換液１次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

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細胞生長特性：貼壁生長

貼壁細胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，將細胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長，此時細胞生長狀態(tài)良HAO，當補液時，需避免反復吹打。

UPCI-SCC-90細胞類似產品：：OCI AML4細胞、SU-DHL-10細胞、HCCC-9810細胞

L-WRN細胞類似產品：：LC-1細胞、NCIH1836細胞、CW-2細胞

PK(15)細胞類似產品：：SW403細胞、T/G HA-VSMC細胞、BGC823細胞

QGY7701細胞類似產品：：U343細胞、CX1細胞、AM細胞

P3-X63-Ag8細胞類似產品：：Colo-678細胞、Sp2/mIL-6細胞、HEY A8細胞

SNU-668細胞類似產品：：Mac-1細胞、EU-4細胞、NCI-H660細胞

HCC1008細胞類似產品：：HCC1588細胞、REC細胞、SNU-16細胞

Panc 4.03細胞類似產品：：WEHI-3細胞、RTE細胞、NCI-H2452細胞

Colon 38細胞類似產品：：SKMEL-31細胞、Ls-174-T細胞、SkMel31細胞

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Hs 445細胞類似產品：：OP9細胞、TK.10細胞、H-1963細胞

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BL-6細胞類似產品：：CAL62細胞、Hs729細胞、HemECs細胞

H1944細胞類似產品：：Giant Cell Tumor細胞、HFF1細胞、8505C細胞

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SK-MEL-5:人惡性黑色素瘤復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

RMS 13細胞類似產品：：NCI-H1793細胞、EBC1細胞、LC-1Sq細胞

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Human Fetal Thymocyte-8810細胞類似產品：：HCC-1569細胞、H-69細胞、KATO III細胞

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QGP1細胞類似產品：：NCI-H220細胞、MT-2J細胞、LS-180細胞

MDA-MB436細胞類似產品：：LA-795細胞、X63Ag8.653細胞、Colon 38細胞

Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞類似產品：：L 540細胞、RMC細胞、P3-X63-Ag8-653細胞

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Hs1.Tes細胞類似產品：：hCMEC/D3細胞、UT7細胞、RPTEC/TERT 1細胞

SV40-MES13細胞類似產品：：KRC Y細胞、G519細胞、149 PT細胞

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QGP-1細胞類似產品：：BALB 3T3 clone A31細胞、HSC-1細胞、JB6 Cl 30細胞

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HS-940-T細胞類似產品：：Hs940-T細胞、WILL-2細胞、HSF2細胞

Hs 746.T細胞類似產品：：SK_N_BE2C細胞、U87 MG細胞、Pt K2 (NBL-5)細胞

870細胞類似產品：：H1650細胞、BTI-Tn5B14細胞、EFO 27細胞

IM9細胞類似產品：：Chang Cells細胞、W256細胞、FTC133細胞

Rh30細胞類似產品：：HT 115細胞、NOK細胞、H2228細胞

RC-2細胞類似產品：：HR-1細胞、Lu-65細胞、C-32細胞

PK(15)細胞類似產品：：SW403細胞、TPC1細胞、Colo699細胞

A2780/Taxol細胞類似產品：：RT112細胞、OVMANA細胞、HSC/mHSC細胞

LAN5細胞類似產品：：SW 1463細胞、293GP細胞、H295細胞

Detroit-562細胞類似產品：：T98細胞、H-35 Reuber細胞、QGP-1細胞

RGC-5細胞類似產品：：B16F0細胞、Human Epidermoid carcinoma #2細胞、A 72細胞

M4e細胞類似產品：：GBCSD細胞、JeKo 1細胞、H676B細胞

PF-382細胞類似產品：：HuT-102細胞、Hs888 Lu細胞、SNU-398細胞

WIL2 Secreting細胞類似產品：：H-441細胞、SNU-1細胞、Human fetal lung fibroblast 1細胞

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P3-Jiyoye細胞類似產品：：M-NFS-60細胞、SHZ-88細胞、SK-RC-39細胞

HuT 102細胞類似產品：：CAKI 1細胞、GM15452細胞、SW954細胞

SCC-1395細胞類似產品：：mREC細胞、HCC-1500細胞、Buffalo Rat Liver-3A細胞

Jurkat (clone E6-1)細胞類似產品：：SW756細胞、CEM-CCRF (CAMR)細胞、MOLT-16細胞

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Huh7.5細胞類似產品：：Hs819.T細胞、L-WRN細胞、Mono Mac6細胞

INS1細胞類似產品：：OVCAR-8細胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、MRCV細胞

OCI-AML3細胞類似產品：：HCC0078細胞、UPCI:SCC90細胞、P3X63Ag8.653細胞

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Hs 445細胞類似產品：：OP9細胞、TK.10細胞、H-1963細胞

HCT-116細胞類似產品：：TGW-I-nu細胞、HS 1.Tes細胞、HCET細胞

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LIM-1215細胞類似產品：：PANC0327細胞、CEMx721.174.T2細胞、GM00637F細胞

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NCI-H-295細胞類似產品：：KM932細胞、LN-229細胞、NCCIT細胞

MDA-MB-157細胞類似產品：：A 172細胞、KGN細胞、LOUNH91細胞

J111細胞類似產品：：NCIH650細胞、Hs819T細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞

Human Embryo Kidney-2細胞類似產品：：U-251-MG細胞、JROECL 21細胞、C-26細胞

KY-50細胞類似產品：：CL MC/9細胞、NCI-SNU-407細胞、Hs 606細胞

SW-839細胞類似產品：：OCILY19細胞、H-87細胞、Hi5細胞

JB6 Cl 30細胞類似產品：：MD Anderson-Metastatic Breast-435細胞、HEY-A8細胞、NCIH1184細胞

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MDA-MB 453細胞類似產品：：LoVo細胞、NCI-H727細胞、2780CP細胞

Rainbow Trout Embryo細胞類似產品：：SupB15W細胞、BOWES細胞、TOG細胞

MCF-7/AdrR細胞類似產品：：RPMI no 8226細胞、NCIH28細胞、HBE135-E6E7細胞

KYSE270細胞類似產品：：2780CP細胞、P3JHR1細胞、BALB/3T3細胞

SK-MEL-5:人惡性黑色素瘤復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

HuPT3細胞類似產品：：LU165細胞、624-mel細胞、COLO-738細胞

U118細胞類似產品：：HNE-2細胞、GM17346細胞、MRAEC細胞

RKN細胞類似產品：：Tu177細胞、OE33細胞、ECV304細胞

HCC1954BL細胞類似產品：：HA1800細胞、S-16細胞、LOU-NH-91細胞

P30OHK細胞類似產品：：Rat-2細胞、H-4-II-E細胞、SK-MEL-5細胞

NCIH740細胞類似產品：：95C細胞、NCI-H3255細胞、CCC-HHM-2細胞

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