"KP4:人胰腺癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)HAO與不HAO至關(guān)重要的考驗。很多同學(xué)都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺HAO的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更HAO一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況把握）。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

HuCC-T1細胞類似產(chǎn)品：：HOP 62細胞、P3HR1-BL細胞、H-209細胞

Pa16C細胞類似產(chǎn)品：：F9細胞、Panc02-H0細胞、HO-8910 PM細胞

HCT-8/V細胞類似產(chǎn)品：：DR2R 1610細胞、B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞、TCCSUP細胞

A2780CP70細胞類似產(chǎn)品：：P3 NS1 Ag4/1細胞、THLE2細胞、B16 melanoma細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

KP4:人胰腺癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

As-PC1細胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-435-S細胞、U373細胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞

LPC-H12細胞類似產(chǎn)品：：SK-RC 42細胞、MCF7/WT細胞、Kuramochi細胞

TE-85細胞類似產(chǎn)品：：Calf Pulmonary Artery 47細胞、MDCK Type II細胞、COLO-320細胞

細胞培養(yǎng)無菌操作的演示：凡是帶入超凈工作臺內(nèi)的酒精、PBS、培養(yǎng)基、胰蛋白酶的瓶子均要用７５％酒精擦拭瓶子的外表面；靠近酒精燈火焰操作。器皿使用前必須過火滅菌，繼續(xù)使用的器皿(如瓶蓋、滴管)要放在GAO處，使用時仍要過火。各種操作要靠近酒精燈，動作要輕、準(zhǔn)確，不能亂碰。如吸管不能碰到廢液缸。吸取兩種以上的使用液時要注意更換吸管，防止交叉污染。玻璃器械洗消：一、新的玻璃器皿的洗消：自來水刷洗，除去灰塵。烘干、泡：烤箱中烘干，然后再浸入５％稀中１２小時以除去臟物、鉛、等物。刷洗、烘干：１２小時后立即用自來水沖洗，再用洗滌劑刷洗，自來水沖干凈后用烤箱烘干；泡酸、清洗：用清潔液浸泡１２小時，然后從酸缸內(nèi)撈出器皿用自來水沖洗１５次，Zui后蒸餾水沖洗３-５次和用雙蒸水過３次。烘干、包裝：洗干凈后先烘干，然后用牛皮紙(油光紙)包裝。GAO壓消毒：包裝HAO的器皿裝入GAO壓鍋內(nèi)蓋HAO蓋子，打開開關(guān)和安全閥，當(dāng)蒸氣成直線上升時，關(guān)閉安全閥，當(dāng)指針指向１５磅時，維持２０-３０分鐘。GAO壓消毒后烘干。二、舊的玻璃器皿的洗消：刷洗、烘干：使用過的玻璃器皿可直接泡入來蘇爾液或洗滌劑溶液中，泡過來蘇爾溶液(洗滌劑)的器皿要用清水刷洗干凈，然后烘干。泡酸、清洗：烘干后泡入清潔液(酸液)，１２小時后從酸缸內(nèi)撈出器皿立即用自來水沖洗(避免蛋白質(zhì)干涸后粘附于玻璃上難以清洗)，再用蒸餾水沖洗３次。烘干、包裝：洗干凈的器皿烘干后取出用牛皮紙(油光紙)等包裝。

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

KP4:人胰腺癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長特性：貼壁生長

貼壁細胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，將細胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長，此時細胞生長狀態(tài)良HAO，當(dāng)補液時，需避免反復(fù)吹打。

HCC1954-BL細胞類似產(chǎn)品：：HEK-A細胞、SK-MEL-3細胞、MyLa 2059細胞

Malme-3M細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H920細胞、HEK-EBNA細胞、Hs 343.T細胞

Hep G2/C3A細胞類似產(chǎn)品：：HeLa-229細胞、GM05887細胞、SK-MEL28細胞

H35細胞類似產(chǎn)品：：OV 2008細胞、6T-CEM細胞、OVCAR8細胞

TOV21細胞類似產(chǎn)品：：H-1563細胞、MDA-231細胞、OCI-Ly18細胞

SW-527細胞類似產(chǎn)品：：293E細胞、Capan-1細胞、PASMCS細胞

MDA-MB-435-S細胞類似產(chǎn)品：：Kit225-K6細胞、NTERA2D1細胞、Hs 737.T細胞

BCP-1細胞類似產(chǎn)品：：P3X63Ag8-6-5-3細胞、High-5細胞、H-810細胞

C-Lu-65細胞類似產(chǎn)品：：CMT-167細胞、AU565細胞、RH7777細胞

J82 COT細胞類似產(chǎn)品：：TE-1細胞、Namalva細胞、NCIH196細胞

TSU-Pr1細胞類似產(chǎn)品：：H1568細胞、COLO-829細胞、R.K.13細胞

SKMEL-31細胞類似產(chǎn)品：：NOMO1細胞、EST81細胞、b.End3細胞

VK2/E6E7細胞類似產(chǎn)品：：ESC細胞、H660細胞、C17細胞

BNL.1ME A.7R.1細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H740細胞、NCI-SNU-C1細胞、3T3-Swiss albino細胞

T241細胞類似產(chǎn)品：：JeKo 1細胞、VMCUB1細胞、MRC5細胞

NCI.H226細胞類似產(chǎn)品：：HEC1-B細胞、5-8F細胞、NCI H508細胞

NCI.H226細胞類似產(chǎn)品：：HEC1-B細胞、5-8F細胞、NCI H508細胞

C-4-I細胞類似產(chǎn)品：：Capan2細胞、beta-TC6細胞、Jijoye細胞

MDAMB435細胞類似產(chǎn)品：：NCIH647細胞、PTK1細胞、UACC 812細胞

HS766T細胞類似產(chǎn)品：：CTLL(2)細胞、HMO6細胞、PZ-HPV-7細胞

Ketr3細胞類似產(chǎn)品：：HRA19細胞、VE細胞、RPMI7666細胞

MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞類似產(chǎn)品：：YH-13細胞、SLK細胞、NCIH1869細胞

L6細胞類似產(chǎn)品：：SKCO 1細胞、DU4475細胞、Michigan Cancer Foundation-12F細胞

T98G細胞類似產(chǎn)品：：RS4:11細胞、130T細胞、NSI/1-Ag4-1細胞

KP4:人胰腺癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

NCIH889細胞類似產(chǎn)品：：LS180細胞、SK-HEP-1細胞、FHL 124細胞

N-87細胞類似產(chǎn)品：：108CC15細胞、Hs 895 T細胞、KYSE 520細胞

FF-WT-BJ細胞類似產(chǎn)品：：hTERT-HPNE細胞、R 2 C細胞、H-4細胞

NCTC 1469細胞類似產(chǎn)品：：WiDrTC細胞、Rat Glomerular Endothelial細胞、HCC-1171細胞

LAPC4細胞類似產(chǎn)品：：EVSAT細胞、SNU886細胞、Bovine ENDometrial cells細胞

MBdSMC細胞類似產(chǎn)品：：NCIH810細胞、MC3T3-E細胞、HCT.116細胞

A549-Taxol細胞類似產(chǎn)品：：MLM細胞、KYSE410細胞、LNCaP-Clone-FGC細胞

Normal Rat Kidney-52E細胞類似產(chǎn)品：：U-138-MG細胞、MDA-MB157細胞、Wayne State University-Head and Neck 13細胞

CAL148細胞類似產(chǎn)品：：Hs895T細胞、QG-56細胞、SKOV-433細胞

NCI.H460細胞類似產(chǎn)品：：THP-1(ATCC)細胞、P3J HR-1細胞、NS-I/1細胞

RCC_7860細胞類似產(chǎn)品：：U-2 OS細胞、IOSE80UBC細胞、OLN93細胞

HEK/293細胞類似產(chǎn)品：：VMM5A細胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed細胞、L-M[TK-]細胞

MARC145細胞類似產(chǎn)品：：FRH-0201細胞、IPLB-SF-21-AE細胞、HCC2157細胞

Earle's L cells細胞類似產(chǎn)品：：MGECs細胞、NCI-SNU-620細胞、JHH7細胞

L-5178-Y細胞類似產(chǎn)品：：Clone 929細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞、GM03569D細胞

NCI-H28細胞類似產(chǎn)品：：Nittby-Salford 1細胞、L929(NCTC)細胞、H774細胞

RFL6細胞類似產(chǎn)品：：HT-1197細胞、CAKI.1細胞、COLO 738細胞

W133細胞類似產(chǎn)品：：HN 4細胞、UPCISCC090細胞、Sp2/0細胞

NBL-1細胞類似產(chǎn)品：：LC-1 sq細胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized細胞、KU19-19細胞

3D4/21細胞類似產(chǎn)品：：32D CL3細胞、MNNG/HOS Cl #5細胞、TFH細胞

Factor Dependent Cell-Paterson 1細胞類似產(chǎn)品：：HeLa S-3細胞、RPMI-8402細胞、G-Olig2細胞

Factor Dependent Cell-Paterson 1細胞類似產(chǎn)品：：HeLa S-3細胞、RPMI-8402細胞、G-Olig2細胞

Tu177細胞類似產(chǎn)品：：CMT64細胞、Mhh-Call 2細胞、HPDE細胞

HTh 74細胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-415細胞、GM00637細胞、IOSE-Mar細胞

SNK1細胞類似產(chǎn)品：：H1882細胞、NCI-H847細胞、Human Hepatocyte Line 5細胞

HCC-1438細胞類似產(chǎn)品：：LN229細胞、PA I細胞、BpRcl細胞

HPF細胞類似產(chǎn)品：：2B4-L細胞、SVHUC細胞、Hepatoma-22細胞

H9c2(2-1)細胞類似產(chǎn)品：：MFE296細胞、PLCPRF5細胞、HCC0044細胞

CTLA4Ig-24細胞類似產(chǎn)品：：HEK293-H細胞、NCTC-929細胞、A2008細胞

LK 2細胞類似產(chǎn)品：：MZ-CRC-1細胞、LADMAC細胞、J774 A1細胞

IMCD3細胞類似產(chǎn)品：：P560細胞、MKN-1細胞、NCI-H2052細胞

Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細胞類似產(chǎn)品：：Hs 294T細胞、U-118MG細胞、HNE-1細胞

HLEC-B3細胞類似產(chǎn)品：：MOLT 16細胞、BN-CL2細胞、MTEC1細胞

Duke University 4475細胞類似產(chǎn)品：：SUM-190PT細胞、EM3細胞、CMT64細胞

95-D細胞類似產(chǎn)品：：Line 870 Emory University-4細胞、SHP77細胞、SCI1細胞

A-172細胞類似產(chǎn)品：：SK Mel 2細胞、Calu-3細胞、COLO-320-HSR細胞

RPMI-8226細胞類似產(chǎn)品：：Human Epithelioma-2細胞、P31/Fujioka細胞、X63.Ag8.653細胞

Hep 3B細胞類似產(chǎn)品：：Factor Dependent Continuous-Paterson 1細胞、NT2D1細胞、HDLM2細胞

HR-1細胞類似產(chǎn)品：：HEK293F細胞、Walker-256-TC細胞、SNU638細胞

SPC-A1細胞類似產(chǎn)品：：H548細胞、NCIH1793細胞、HMEC-1細胞

8305C_1細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2087細胞、P-815細胞、H345細胞

hMSC-BM細胞類似產(chǎn)品：：YT細胞、FAO-1細胞、NCIH1755細胞

A 253細胞類似產(chǎn)品：：P31 FUJ細胞、HFLS-RA細胞、FOXNY細胞

LOU-NH-91細胞類似產(chǎn)品：：MCF-7/AdrR細胞、SUP-M2細胞、C-33-A細胞

NCI-H125細胞類似產(chǎn)品：：J82COT細胞、SKMEL28細胞、HT144-mel細胞

WC00079細胞類似產(chǎn)品：：A549ATCC細胞、MKN74細胞、D 407細胞

HD11細胞類似產(chǎn)品：：GM05887細胞、RPMI-6666細胞、SKNDZ細胞

H2108細胞類似產(chǎn)品：：MES-13細胞、H-2405細胞、NCIH69細胞

KTCTL-140細胞類似產(chǎn)品：：C518細胞、COLO 684細胞、H-1954細胞

ACHN細胞類似產(chǎn)品：：HCV 29細胞、BrCL18細胞、MDA-MB-468細胞

578T細胞類似產(chǎn)品：：ME1細胞、MES 23.5細胞、HT 29細胞

2T細胞類似產(chǎn)品：：HEK-293A細胞、rUCMSCs細胞、NCM460細胞

CATHa細胞類似產(chǎn)品：：KMB17細胞、GM 637細胞、GM 637細胞

SB細胞類似產(chǎn)品：：SU8686細胞、KG-1細胞、Tu 177細胞

CEK細胞類似產(chǎn)品：：BEAS 2B細胞、HS 445T細胞、Calu-1細胞

MDAMB134VI細胞類似產(chǎn)品：：R2C細胞、HCC0015細胞、RPMI 1846細胞

HDQP1細胞類似產(chǎn)品：：Tissue Culture-1細胞、HuP-T4細胞、Ect1/E6E7細胞

P3X63細胞類似產(chǎn)品：：GM3570細胞、L6565細胞、TE 354.T細胞

P3X63細胞類似產(chǎn)品：：GM3570細胞、L6565細胞、TE 354.T細胞

NK-92MI細胞類似產(chǎn)品：：SLMT1細胞、SUPB-15細胞、NCI-SNU-407細胞

RPMI-8226S細胞類似產(chǎn)品：：RCSMC細胞、C32 mel細胞、HT115細胞

SCC-25細胞類似產(chǎn)品：：ZR75-1細胞、HUT 28細胞、RPMI #1846細胞

HASMC細胞類似產(chǎn)品：：HOS TE 85細胞、LIPF178C細胞、OCI Ly1細胞

TGW-I-nu細胞類似產(chǎn)品：：NOK細胞、N1E-115細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞

Rat-1細胞類似產(chǎn)品：：GM00215A細胞、MDA231細胞、KU-812-F細胞

M-O7e細胞類似產(chǎn)品：：HCE-T細胞、EFO27細胞、NCIH548細胞

Earles's cells細胞類似產(chǎn)品：：BC3 H1細胞、OCI-LY-8細胞、NCI-SNU-C2B細胞

ketr 3細胞類似產(chǎn)品：：HTSMC細胞、Granta-519細胞、OVCAR 4細胞

PC-9細胞類似產(chǎn)品：：CWR-22rv1細胞、V79-GalK1細胞、JJN3細胞

AR-42J細胞類似產(chǎn)品：：SCC4細胞、RAEC細胞、RCC_7860細胞

HEP3B2細胞類似產(chǎn)品：：Hos TE-85細胞、H647細胞、HMSC細胞

NCIH292細胞類似產(chǎn)品：：HS 683T細胞、Beta-TC-6細胞、BRL細胞

GOS-3細胞類似產(chǎn)品：：SW-837細胞、8305C_1細胞、OV-90細胞

OCILY-19細胞類似產(chǎn)品：：HLEB3細胞、SUM149細胞、CV-1細胞

NCI-SNU-761細胞類似產(chǎn)品：：293細胞、KM12細胞、SNU-182細胞

Fao細胞類似產(chǎn)品：：RPMI #8226細胞、Keio University-19-19細胞、BEL 7402細胞

LNT-229細胞類似產(chǎn)品：：H1435細胞、MAVER-1細胞、C-33A細胞

H2126細胞類似產(chǎn)品：：AMC-HN-8細胞、NCI-HUT-520細胞、K562/ADP細胞

NKM1細胞類似產(chǎn)品：：ECC 10細胞、RD-2細胞、766T細胞

NCI-SNU-C2B細胞類似產(chǎn)品：：X63-Ag8細胞、SUM 52細胞、GL261細胞

RPMI 6666細胞類似產(chǎn)品：：TOV-112細胞、Fetal Human Colon細胞、NCI-H1437細胞

HCC-1833細胞類似產(chǎn)品：：Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細胞、Panc 5.04細胞、HOCF細胞

KP4:人胰腺癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

MUTZ-1細胞類似產(chǎn)品：：SKM1細胞、HEK293-EBNA細胞、HIT-T15細胞

OV-2008細胞類似產(chǎn)品：：IPAM-WT細胞、MHCCLM3細胞、R1610細胞

NCI-H1417細胞類似產(chǎn)品：：KTCTL-140細胞、SNU-620細胞、HuT78細胞

NHLF細胞類似產(chǎn)品：：149PT細胞、A-1847細胞、Anglne細胞

HT 1197細胞類似產(chǎn)品：：RFL 6細胞、HEK293-FT細胞、IALM細胞

SuDHL 8細胞類似產(chǎn)品：：ACC-M細胞、Duck embryo細胞、SK-MEL-28細胞

"