"Capan-1:人胰腺癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)HAO與不HAO至關(guān)重要的考驗。很多同學(xué)都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺HAO的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更HAO一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況把握）。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

801-D細胞類似產(chǎn)品：：IPEC1細胞、Panc02細胞、PANC0813細胞

M20 [Human melanoma]細胞類似產(chǎn)品：：WM115細胞、MeT5A細胞、SUM 159細胞

HuCCT-1細胞類似產(chǎn)品：：T-98細胞、AR-42J細胞、RPMI1788細胞

SUDHL4細胞類似產(chǎn)品：：3T3-Swiss albino細胞、MPC-11細胞、GM0637細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

Capan-1:人胰腺癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

KG-1a細胞類似產(chǎn)品：：HVSMC細胞、ROS17/28細胞、QG-56細胞

NCI-H498細胞類似產(chǎn)品：：RPE1-hTERT細胞、B16 subline B78細胞、22Rv-1細胞

HT144細胞類似產(chǎn)品：：PCI-4.2細胞、COLO829細胞、HEK 293-H細胞

培養(yǎng)細胞的凍存及復(fù)蘇：細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細胞凍存在-１９６℃液氮中，儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融。【凍存細胞】１)選對數(shù)增生期細胞(證明無支原體污染)，在凍存前１d換液；２)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細胞制備成懸液，計數(shù)，使細胞密度達５×１０／ml左右密度，離心，去上清；３)加入配制HAO的凍存液(培養(yǎng)液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中，然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。凍存細胞時培養(yǎng)液中加入保護劑１０％二甲基亞砜(DMSO)或甘油，可使冰點降低，使細胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細胞外；４)分裝于無菌凍存管中，每管加１.５m懸液；５)旋HAO凍存管并仔細檢查，一定要蓋緊，做HAO標記；６)凍存：在殊的儀器或簡易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min時間內(nèi)，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要適當掌握下降冷凍速度，過快能影響細胞內(nèi)水分透出，太慢則促進冰晶形成。操作時應(yīng)戴防護眼鏡和手套，以免液氮凍傷?！緩?fù)蘇細胞】１)從罐中取出凍存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不時搖動，使其急速融化，３０～６０s內(nèi)完成；３)凍存管用７０％酒精擦拭消毒后，打開蓋子，用吸管將細胞懸液注入離心管中，再滴加１０ml培養(yǎng)液；４)低速離心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培養(yǎng)液洗一次；５)用培養(yǎng)液適當稀釋后，裝入培養(yǎng)瓶３７℃培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后，繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進行培養(yǎng)。凍存細胞數(shù)量要充分，密度應(yīng)達到１０／ml，在融后稀釋２０倍時，仍能保持５×１０／ml數(shù)量。

細胞傳代方法：１：２-１：４傳代，２-３天換液１次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

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細胞生長特性：貼壁生長

貼壁細胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，將細胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長，此時細胞生長狀態(tài)良HAO，當補液時，需避免反復(fù)吹打。

AgC11x3A細胞類似產(chǎn)品：：Cloudman M3細胞、SUM 102細胞、NTera 2/cl.D1細胞

HO-8910PM細胞類似產(chǎn)品：：3T6細胞、TYKnu細胞、T98G細胞

ES-2細胞類似產(chǎn)品：：OCI/AML-2細胞、GMK,BSC-1細胞、TOV-112細胞

H2227細胞類似產(chǎn)品：：ARPE19細胞、TW01細胞、COLO 741細胞

MDA-MB-231 #4175細胞類似產(chǎn)品：：REC 1細胞、EBNA293細胞、ROS17/28細胞

NCI-H187細胞類似產(chǎn)品：：RCK8細胞、Y 1細胞、HEK-293H細胞

PC-9/S1細胞類似產(chǎn)品：：SU86-86細胞、H-498細胞、D407細胞

IOSE80細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H69C細胞、Jurkat E6-1細胞、MGECs細胞

MHH-CALL-2細胞類似產(chǎn)品：：HIEC細胞、KYSE 270細胞、OCI/AML-3細胞

FD-LSC-1細胞類似產(chǎn)品：：DI-TNC1細胞、DK-MG細胞、C127細胞

Liver-02細胞類似產(chǎn)品：：MC-4細胞、GM00637F細胞、Ca-Ski細胞

University of Arizona Cell Culture-812細胞類似產(chǎn)品：：WEHI 231細胞、HCC-1143細胞、NCIH460細胞

A101D細胞類似產(chǎn)品：：SNU-C2B細胞、NCI-A549細胞、B6Tert-1細胞

A-172 MG細胞類似產(chǎn)品：：HCC-827細胞、COLO-824細胞、MEC1細胞

DF-1細胞類似產(chǎn)品：：H1184細胞、UPCI:SCC090細胞、NCIH727細胞

C26細胞類似產(chǎn)品：：LS123細胞、TNC-1B12B4細胞、H9c2細胞

SBC-5細胞類似產(chǎn)品：：SACC-LM細胞、Soleus clone 8細胞、253J-Bladder-V細胞

HEK 293T/17細胞類似產(chǎn)品：：SKML-28細胞、FHs 74 Int細胞、BHT-101細胞

IPI-2I細胞類似產(chǎn)品：：KP-N-RT-BM-1細胞、Hs870T細胞、TE-14細胞

BL2141細胞類似產(chǎn)品：：CAL148細胞、MOVAS-1細胞、PL 45細胞

RPMI 6666細胞類似產(chǎn)品：：TOV-112細胞、Fetal Human Colon細胞、NCI-H1437細胞

NCI-H520細胞類似產(chǎn)品：：Hs888T細胞、DC2.4細胞、HIEC-6細胞

LTPA細胞類似產(chǎn)品：：NCIH244細胞、HT-55細胞、NCIH1299細胞

MDCK細胞類似產(chǎn)品：：SK-BR-3細胞、PNEC30細胞、293/EBNA-1細胞

Capan-1:人胰腺癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

TE12細胞類似產(chǎn)品：：UMNSAH/DF#1細胞、Rat podocyte細胞、OCI-Ly 1細胞

2780CP細胞類似產(chǎn)品：：KOPN8細胞、TFH細胞、CHP-100細胞

HUT-125細胞類似產(chǎn)品：：HEL-92_1_7細胞、hTERT-RPE-1細胞、VeroE6細胞

SUM 102細胞類似產(chǎn)品：：Swiss-3T3細胞、ID8/MOSEC細胞、NFS60細胞

kms 11細胞類似產(chǎn)品：：Hopkins-92細胞、293-EBNA1細胞、H-1155細胞

251 MG細胞類似產(chǎn)品：：2BS細胞、NCIH1618細胞、Hep G2/C3A細胞

Hs 606.T細胞類似產(chǎn)品：：NCI-SNU-16細胞、TM3細胞、HDSMC細胞

Hs742T細胞類似產(chǎn)品：：Colo741細胞、CEM-C7細胞、SUM190PT細胞

IHC-ST1細胞類似產(chǎn)品：：Be-Wo細胞、H-3255細胞、HPC-Y5細胞

SW-1783細胞類似產(chǎn)品：：FRhK4細胞、CHOK1細胞、U14細胞

PL11細胞類似產(chǎn)品：：BHK細胞、Madin Darby Canine Kidney細胞、PF-382細胞

L6565細胞類似產(chǎn)品：：GM00637F細胞、MB157細胞、DU145細胞

3T3J2細胞類似產(chǎn)品：：UMRC2細胞、CAL-39細胞、HEK-293-FT細胞

MT2細胞類似產(chǎn)品：：HS-294-T細胞、BIU87細胞、DMS273細胞

BRL3A細胞類似產(chǎn)品：：WEHI-164細胞、NTera-2D1細胞、COLO-205細胞

H1373細胞類似產(chǎn)品：：Opossum Kidney細胞、SUP-T1細胞、JEKO細胞

MDA231-LM2細胞類似產(chǎn)品：：NCI H716細胞、MA-782細胞、Reuber H-35細胞

CAL85-1細胞類似產(chǎn)品：：COLO-684細胞、GM03569D細胞、SGC-7901/DDP細胞

TK-1細胞類似產(chǎn)品：：TM3細胞、PC-3M細胞、GLC-15細胞

Kupffer細胞類似產(chǎn)品：：Hs-729-T細胞、HN 4細胞、SUM 190PT細胞

H-2085細胞類似產(chǎn)品：：BC-PAP細胞、GTL16細胞、NCTC 3960細胞

HCT116/L細胞類似產(chǎn)品：：PANC 1005細胞、LAC細胞、U-2-OS細胞

OC316細胞類似產(chǎn)品：：COLO320HSR細胞、WEHI-279細胞、Human Embryo Kidney-2細胞

Kasumi-1細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1623細胞、HL-60 Clone 15細胞、NCI-H1155細胞

PNT-1A細胞類似產(chǎn)品：：SV40 MES 13細胞、A9 (Hamprecht)細胞、GMK,BSC-1細胞

WERI-Rb 1細胞類似產(chǎn)品：：C4-2細胞、RK13細胞、Y3-Ag1,2,3細胞

MC-3T3細胞類似產(chǎn)品：：CESS細胞、A-172MG細胞、RFL 6細胞

OSC19細胞類似產(chǎn)品：：BL-6細胞、SEG-1細胞、SU86_86細胞

HEYA8細胞類似產(chǎn)品：：Hs675T細胞、SJRH30細胞、FET細胞

Hs 819.T細胞類似產(chǎn)品：：MPVECs細胞、NU-GC-3細胞、M3 Clone M-3細胞

SV40-HCEC細胞類似產(chǎn)品：：IOSE-Mar細胞、Capan 2細胞、Nthy ori 3.1細胞

EC-109細胞類似產(chǎn)品：：HRIF細胞、P3-X63Ag8.653細胞、SUDHL-1細胞

NCIH1693細胞類似產(chǎn)品：：C4-2 B細胞、Metastatic Variant-522細胞、COLO-320DM細胞

SKLMS-1細胞類似產(chǎn)品：：NTERA2D1細胞、ASPC1細胞、16-HBE14o細胞

Caco-2/BBe細胞類似產(chǎn)品：：TB-1 Lu細胞、NB4細胞、TE 671細胞

H295R-S1細胞類似產(chǎn)品：：AU565細胞、SF-126細胞、NHA細胞

MFD-1細胞類似產(chǎn)品：：LAPC-4細胞、H-128細胞、HCC0038細胞

ES-2細胞類似產(chǎn)品：：OCI/AML-2細胞、H-2135細胞、GM 2132細胞

rUCMSCs細胞類似產(chǎn)品：：HEK.EBNA細胞、SB細胞、ME16C細胞

MZCRC1細胞類似產(chǎn)品：：PNT-1A細胞、YD15細胞、HLF-a細胞

HEK293F細胞類似產(chǎn)品：：SUDHL-2細胞、P3 NS1 Ag4/1細胞、SupT1細胞

SUM 149PT細胞類似產(chǎn)品：：3-LL細胞、SHEE細胞、PE CA PJ34細胞

HS-940-T細胞類似產(chǎn)品：：Hs940-T細胞、WILL-2細胞、HSF2細胞

Hs852T細胞類似產(chǎn)品：：UCLA NPA871細胞、NCI-H1573細胞、KTA-7細胞

HM06.A1細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H847細胞、H2029細胞、Calf Pulmonary Artery Endothelial細胞

DHL-8細胞類似產(chǎn)品：：NS-1細胞、CAL-51細胞、PTK 2細胞

SU.86細胞類似產(chǎn)品：：TCam-2細胞、IGROV1細胞、HPAF-I細胞

HO8910細胞類似產(chǎn)品：：HEC-1B細胞、HBZY 1細胞、H-2330細胞

DoHH2細胞類似產(chǎn)品：：VMRCRCZ細胞、KYSE 180細胞、H-2291細胞

H-929細胞類似產(chǎn)品：：C3H/10T1/2 CL8細胞、ZR751細胞、NCI-H661細胞

MDCKII細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H774細胞、EoL-1-cell細胞、HCE細胞

H-2081細胞類似產(chǎn)品：：PK 15細胞、NuTu-19細胞、HCC-1569細胞

WM-2664細胞類似產(chǎn)品：：Mahlavu細胞、SNUC2B細胞、MDCK supertube細胞

WM266-4細胞類似產(chǎn)品：：MeT 5A細胞、OUMS23細胞、SGC7901細胞

COLO 320DM細胞類似產(chǎn)品：：4T1.2細胞、R2C細胞、C3H/10T1/2 CL8細胞

IMR32細胞類似產(chǎn)品：：Tu686細胞、TE8細胞、266 Bl細胞

COV-434細胞類似產(chǎn)品：：HT-1376細胞、PNT-1A細胞、B16BL6細胞

FOX-NY細胞類似產(chǎn)品：：A-875細胞、C8161細胞、MLO-Y4細胞

FOX-NY細胞類似產(chǎn)品：：A-875細胞、C8161細胞、MLO-Y4細胞

IM-9細胞類似產(chǎn)品：：SW948細胞、CPA47細胞、NCL-H548細胞

RINm5F細胞類似產(chǎn)品：：AMO1細胞、U138MG細胞、SKHEP-1細胞

KOPN-8細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1954細胞、FRO 81-2細胞、SW 1088細胞

LOU-NH91細胞類似產(chǎn)品：：CAL-33細胞、MDA-MB-468細胞、RINm-5F細胞

KCL22細胞類似產(chǎn)品：：GC9811-P細胞、EC-GI細胞、Hs27F細胞

PANC 203細胞類似產(chǎn)品：：TE4細胞、WEHI-3細胞、L-WRN細胞

GFP-Olig2細胞類似產(chǎn)品：：hTERT-RPE細胞、AML 12細胞、NCIH1618細胞

Tn 5B1-4細胞類似產(chǎn)品：：H2029細胞、OV1/P細胞、Centre Antoine Lacassagne-78細胞

MGH-U1 (EJ)細胞類似產(chǎn)品：：Lewis lung carcinoma line 1細胞、HBL-100細胞、H1436細胞

LTEP-sm細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H146細胞、293/EBNA細胞、HFL-I細胞

32D clone 3細胞類似產(chǎn)品：：A875細胞、MDA231-LM2細胞、N-9細胞

COLO-741細胞類似產(chǎn)品：：HPAF2細胞、Swiss/3T3細胞、MDA-435細胞

Panc-08.13細胞類似產(chǎn)品：：C4-I細胞、Normal Rat, August 3, 1983細胞、MCF 7細胞

GFP-Olig2細胞類似產(chǎn)品：：hTERT-RPE細胞、AML 12細胞、NCIH1618細胞

7860細胞類似產(chǎn)品：：HPAF II細胞、IMR90細胞、RS411細胞

Hs 840.T細胞類似產(chǎn)品：：SUIT-2細胞、HCC-2279細胞、Human Liver-7702細胞

H-1703細胞類似產(chǎn)品：：Porcine Kidney-13細胞、IOSE 80細胞、U343MG細胞

GM00346細胞類似產(chǎn)品：：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細胞、BT474細胞、HFL-1細胞

MC-3T3細胞類似產(chǎn)品：：CESS細胞、A-172MG細胞、RFL 6細胞

MCF7ADR細胞類似產(chǎn)品：：SNU-5細胞、A549ATCC細胞、BrCL12細胞

Balb/c 3T3細胞類似產(chǎn)品：：ACCM細胞、NRK細胞、TOV-21G細胞

MD Anderson-Metastatic Breast-435細胞類似產(chǎn)品：：LNCaP-FGC細胞、HOC-1細胞、CMT-64細胞

PLMVEC細胞類似產(chǎn)品：：JB6 clone 30, subclone 7b細胞、HTh-74細胞、L(TK-)細胞

Capan-1:人胰腺癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

BTI-TN5B1-4細胞類似產(chǎn)品：：HASMC細胞、NTera 2/cl.D1細胞、Human Pancreatic Duct Epithelial細胞

UK Pan-1細胞類似產(chǎn)品：：HPMEC細胞、DAN-G細胞、RBE4細胞

MonoMac 6細胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-231-luc細胞、LA795細胞、AMC-HN-8細胞

UPCISCC090細胞類似產(chǎn)品：：LA-4 [Mouse lung adenoma]細胞、2PK-3細胞、3T3F442A細胞

MCF10A細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H647細胞、GP5d細胞、CV-1.K細胞

Hs 578.Bst細胞類似產(chǎn)品：：H-2107細胞、MPC-5細胞、HL-60細胞

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