"COV434:人卵巢顆粒腫瘤復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

有一些細胞是數(shù)量多一點比較HAO生長，生長狀態(tài)也比較HAO。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內(nèi)皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較HAO，譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞，生長速度非常得快，貼壁速度很快，所以傳代時就應(yīng)該留很少量的細胞，這樣細胞狀態(tài)會比較HAO。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長，而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候，細胞形態(tài)基本上就會差了，老化的會比較多，對后期實驗結(jié)果是不HAO的。所以在養(yǎng)細胞的時候應(yīng)該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞，如果細胞形態(tài)不HAO，（或者細胞形態(tài)不清晰，表面似有異物等）可以在傳代的時候進行如下操作：首先，倒掉舊的培養(yǎng)基，加入3ml新的培養(yǎng)基（有無血清的都可）洗滌一次，用滴管吸走，然后再加入3ml的培養(yǎng)基，進行預(yù)吹打，控制吹打力度，輕輕地大概沿著瓶底過一遍，然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。（巨噬細胞建議只吹打，不消化）其次，把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi)，培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基，放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次，20分鐘，30分鐘觀察一次。選擇一個時間點，已經(jīng)有部分細胞貼壁的情況下，重新置于潔凈臺，底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基，加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。通常稱之為“二傳”。如果一次效果還不理想，可重復(fù)多次。直到找到細胞上乘形態(tài)。其中要注意，結(jié)合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得HAO的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

A-2058細胞類似產(chǎn)品：：U-2-OS細胞、MC-3T3細胞、PK15細胞

HET1A細胞類似產(chǎn)品：：COR-L279細胞、Mv 1 Lu細胞、HAVSMC細胞

CNE1-LUC細胞類似產(chǎn)品：：TE3A細胞、C643細胞、H-889細胞

H-747細胞類似產(chǎn)品：：HPC-Y5細胞、H727細胞、VMRC-LCD細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

COV434:人卵巢顆粒腫瘤復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

UCLA-SO-M14細胞類似產(chǎn)品：：C22細胞、NCIH1563細胞、MLE 12細胞

SNU-398細胞類似產(chǎn)品：：NOZ細胞、LICR-HN-6細胞、NF639細胞

H2196細胞類似產(chǎn)品：：LA-N-6(OAN)細胞、MC/CAR細胞、IGR-OV1細胞

細胞培養(yǎng)實驗基本操作：①進無菌室前要徹底洗手，按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用７５%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。②操作者動作要輕，安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應(yīng)在火焰近處并經(jīng)過燒灼進行。但要注意，金屬器械不能在火焰中長時間燒灼，以防退火；燒過的器械要冷卻后才能使用；已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼，因殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)液成分如蛋白質(zhì)等燒焦后會產(chǎn)生有害物質(zhì)，吸管再用時會將其帶到培養(yǎng)液中；膠塞、橡皮乳頭及塑料的細胞培養(yǎng)用品過火焰是也不能時間太長，以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體，危害培養(yǎng)細胞，同時塑料細胞培養(yǎng)用品也會產(chǎn)生變形影響使用。③使用培養(yǎng)液前不宜過早開瓶，開瓶后的培養(yǎng)液應(yīng)保持斜位，避免直立，以防止下落細菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應(yīng)立即封閉瓶口，培養(yǎng)的細胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。④操作時盡量不要談話，咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。⑤吸取培養(yǎng)液、細胞懸液時，應(yīng)專管專用，一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應(yīng)棄去，以防止污染擴大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。⑥操作完畢后應(yīng)整理HAO工作臺面，用消毒水浸泡的紗布擦拭臺面；防止細胞交叉污染：所有從別處轉(zhuǎn)來的或是自己所建的細胞系都要早期留有的充足的凍存儲備，一旦懷疑發(fā)生交叉污染，可做細胞遺傳學(xué)方面的鑒定，如發(fā)現(xiàn)原有的細胞遺傳物發(fā)生改變，可以復(fù)蘇早期凍存的細胞使用。重要細胞系的傳代工作應(yīng)由兩人獨立進行；無菌室的徹底消毒①新潔爾滅全面徹底擦洗無菌室。使用前應(yīng)稀釋即配即用。新潔爾滅和酒精相比，Zui大的YOU點是便宜，而且可以稀釋５０倍用，而同樣量的酒精價格可能是新潔爾滅的幾十倍。②甲醛熏蒸法：甲醛是一種廣譜滅菌劑菌，其水溶液和氣體對各種細菌、芽孢及真菌等微生物均有殺滅作用。甲醛價廉，熏蒸消毒時不損壞衣服、家具、皮革、橡膠等。市售的甲醛水溶液中一般含３７－４０%的甲醛。

細胞傳代方法：１：２傳代

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

COV434:人卵巢顆粒腫瘤復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長特性：貼壁生長

貼壁細胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，將細胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長，此時細胞生長狀態(tài)良HAO，當(dāng)補液時，需避免反復(fù)吹打。

P3-X63.Ag8.653細胞類似產(chǎn)品：：MonoMac 6細胞、SU-DHL-6細胞、BEL7405細胞

alpha TC1 clone 6細胞類似產(chǎn)品：：Leukemic 1210細胞、COLO-320-HSR細胞、H19-7細胞

IBRS2細胞類似產(chǎn)品：：DoTc2-4510細胞、NCI-H1092細胞、SW780細胞

BE2M17細胞類似產(chǎn)品：：LLC-PK-1細胞、KU 19-19細胞、Ketr-3細胞

NCIH727細胞類似產(chǎn)品：：NCI-N87細胞、TN5B14細胞、SW1573細胞

WEHI-279細胞類似產(chǎn)品：：P31FUJ細胞、LICCF細胞、PC14細胞

HNE1細胞類似產(chǎn)品：：RINm5F細胞、TE-14細胞、AX-Mel細胞

H1882細胞類似產(chǎn)品：：HONE1細胞、L cell細胞、LY細胞

P388D1細胞類似產(chǎn)品：：MCF7ADR細胞、LTEP-sm細胞、HCC-70細胞

MBdSMC細胞類似產(chǎn)品：：NCIH810細胞、MC3T3-E細胞、HCT.116細胞

RINm5F細胞類似產(chǎn)品：：AMO1細胞、U138MG細胞、SKHEP-1細胞

H-719細胞類似產(chǎn)品：：Caki2細胞、H1155細胞、HuT 102細胞

HGMC細胞類似產(chǎn)品：：MFE 296細胞、DSL-6A/C1細胞、OVCAR-8細胞

U138細胞類似產(chǎn)品：：EJ-1細胞、SW-1353細胞、EC-9706細胞

RAMSCs細胞類似產(chǎn)品：：H920細胞、DHL-6細胞、A3細胞

SNB19細胞類似產(chǎn)品：：TOV21細胞、PFSK-1細胞、H748細胞

SNB19細胞類似產(chǎn)品：：TOV21細胞、PFSK-1細胞、H748細胞

TSCC1細胞類似產(chǎn)品：：SW-756細胞、M4e細胞、HuP-T4細胞

Panc08.13細胞類似產(chǎn)品：：PC-3M-1E8細胞、MEL-526細胞、NIH3T3-L1細胞

NCI-SNU-407細胞類似產(chǎn)品：：CAMA1細胞、UC-3細胞、H-2009細胞

C-643細胞類似產(chǎn)品：：AD293細胞、RA.1細胞、Granta519細胞

Jurkat clone A3細胞類似產(chǎn)品：：LL/2 (LLC1)細胞、RTMC細胞、RIN m5F細胞

DoTc2-4510細胞類似產(chǎn)品：：MS-751細胞、RPMI no. 8226細胞、SG231細胞

HPC-Y5細胞類似產(chǎn)品：：GM02131A細胞、H1694細胞、IEC 6細胞

COV434:人卵巢顆粒腫瘤復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

H-87細胞類似產(chǎn)品：：Panc813細胞、Karpas299細胞、ZR75-30細胞

C2BBe1細胞類似產(chǎn)品：：PC3-M細胞、GT39細胞、HPAF2細胞

R1800[RA]細胞類似產(chǎn)品：：EFM-192A細胞、NCI H716細胞、NCI-SNU-398細胞

RINm-5F細胞類似產(chǎn)品：：Capan-2細胞、NCIH1781細胞、hs 68細胞

H838細胞類似產(chǎn)品：：E.G7-OVA細胞、Hs 600.T細胞、AML-2細胞

NB1-RGB細胞類似產(chǎn)品：：D10.G4.1細胞、SW 1116細胞、C-4 I細胞

R1800[RA]細胞類似產(chǎn)品：：EFM-192A細胞、NCI H716細胞、NCI-SNU-398細胞

MDA-468細胞類似產(chǎn)品：：HOC-1細胞、SO-Rb 50細胞、TCCPAN2細胞

huH 1細胞類似產(chǎn)品：：Lewis lung carcinoma細胞、D283 Med細胞、343MG細胞

Hs888Lu細胞類似產(chǎn)品：：COLO 829細胞、Y79細胞、SUM52PE細胞

MCA 38細胞類似產(chǎn)品：：MeSoTheliOma-211H細胞、NSI/1-Ag4-1細胞、GC-1spg細胞

hSCC-25細胞類似產(chǎn)品：：SF 295細胞、K1735細胞、HDF-a細胞

MFC細胞類似產(chǎn)品：：MC3T3-L1細胞、C-Li-7細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細胞

MRC-V細胞類似產(chǎn)品：：Human Pancreatic Duct Epithelial細胞、HSC 3細胞、HO8910細胞

MUTZ-1細胞類似產(chǎn)品：：SKM1細胞、HEK293-EBNA細胞、HIT-T15細胞

NCI-SNU-216細胞類似產(chǎn)品：：KPL4細胞、ANA-1細胞、H4-II-EC3細胞

H660細胞類似產(chǎn)品：：TE5細胞、MC3T3-E1(C4)細胞、UPCI-SCC-90細胞

T-98細胞類似產(chǎn)品：：SKml2細胞、MKN-28細胞、MDCK Type II細胞

KYSE-30細胞類似產(chǎn)品：：95-D細胞、NCTC929細胞、3T3 L1細胞

M2-10B4細胞類似產(chǎn)品：：CMT 64細胞、IOSE-Van細胞、H522細胞

RCC-10RGB細胞類似產(chǎn)品：：Caco-2細胞、HCC0038細胞、NHLF細胞

H-1048細胞類似產(chǎn)品：：3T3-442A細胞、C 6細胞、OC316細胞

HCC2157細胞類似產(chǎn)品：：IMR-32細胞、Panc10.05細胞、OV433細胞

VCaP細胞類似產(chǎn)品：：Hs274T細胞、LNCaP-C4-2細胞、SKOV-3細胞

GM0637細胞類似產(chǎn)品：：SUM149細胞、TOV112D細胞、Leukemic 1210細胞

SK_N_FI細胞類似產(chǎn)品：：UMUC1細胞、SUDHL4細胞、HMC-1細胞

SW1222細胞類似產(chǎn)品：：HRA 19細胞、Normal Rat Kidney-49F細胞、HCC941122細胞

DSL6A/C1細胞類似產(chǎn)品：：HSC-4細胞、SW 900細胞、LK-2細胞

MOVAS細胞類似產(chǎn)品：：SUM159PT細胞、KHYG細胞、M-O7e細胞

A2780細胞類似產(chǎn)品：：RMG1細胞、Sf21細胞、CCD 841 CoTr細胞

Fortner's melanotic melanoma #3細胞類似產(chǎn)品：：C4I細胞、AR4-IP細胞、NCI-H2347細胞

HCC-1937細胞類似產(chǎn)品：：RBMEC細胞、OE21細胞、MDAMB330細胞

BN-CL2細胞類似產(chǎn)品：：SW-1271細胞、OCI/AML-4細胞、Calu-3細胞

HBMEC細胞類似產(chǎn)品：：LNCaP clone FGC細胞、U-266 AR1細胞、LS-174T細胞

AMC-HN8細胞類似產(chǎn)品：：Hs746T細胞、LTEP-a-2細胞、PC3M細胞

K299細胞類似產(chǎn)品：：CL34細胞、KYSE 70細胞、T47D:A細胞

OCI-Ly3細胞類似產(chǎn)品：：C8166細胞、SU-DHL-16細胞、HT細胞

IB-RS-2細胞類似產(chǎn)品：：CNE細胞、COS-1細胞、NCI-SNU-878細胞

IB-RS-2細胞類似產(chǎn)品：：CNE細胞、RIMEC細胞、MDA-MB-435-S細胞

HT115細胞類似產(chǎn)品：：OCI-AML-5細胞、SNU5細胞、SKMEL3細胞

SNK6細胞類似產(chǎn)品：：BJA-B1細胞、H69C細胞、CCC-HPF-1細胞

KOPN-8細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1954細胞、FRO 81-2細胞、SW 1088細胞

MNNG/HOS Cl #5細胞類似產(chǎn)品：：Chinese Hamster Lung細胞、CHP-212細胞、Hs 895 T細胞

ISHI細胞類似產(chǎn)品：：SF17細胞、MC-26細胞、NCI-SNU-387細胞

COLO320DM細胞類似產(chǎn)品：：GC-1spg細胞、HFF細胞、HEL 92.1.7細胞

NCM356細胞類似產(chǎn)品：：MDCK II細胞、REC1細胞、AK細胞

NCI-H711細胞類似產(chǎn)品：：P3/X63/Ag8細胞、BEL-7405細胞、EoL-1-cell細胞

KYSE-410細胞類似產(chǎn)品：：TE1細胞、SKMEL-1細胞、BTT739細胞

MRC9細胞類似產(chǎn)品：：HLEB-3細胞、NCI-H226細胞、NCIH510細胞

EM-3細胞類似產(chǎn)品：：WERI-Rb-1細胞、SUP T1細胞、CNE-2細胞

1301細胞類似產(chǎn)品：：L cell line細胞、CoCL2細胞、PSN-1細胞

Tn-5細胞類似產(chǎn)品：：MHCC97H細胞、AG06814-M細胞、16-HBE細胞

H-735細胞類似產(chǎn)品：：P30/Ohkubo細胞、LS 1034細胞、IPAM-WT細胞

3T3F442A細胞類似產(chǎn)品：：Microbiological Associates-104細胞、JB-6 Cl 30細胞、NWA細胞

LI7細胞類似產(chǎn)品：：BxPC-3細胞、3T3 J2細胞、T173細胞

IM 9細胞類似產(chǎn)品：：3T3 J2細胞、16HBEo-細胞、PANC 203細胞

Henrietta Lacks cells細胞類似產(chǎn)品：：IM 9細胞、OVHM細胞、MOLT16細胞

KOPN8細胞類似產(chǎn)品：：HCC 94細胞、OE-19細胞、BS-C-1細胞

KOPN8細胞類似產(chǎn)品：：HCC 94細胞、OE-19細胞、BS-C-1細胞

MO59J細胞類似產(chǎn)品：：PIG3細胞、LICR-LON-HN6細胞、TE7細胞

IGROV-1細胞類似產(chǎn)品：：G361細胞、PC-9/GR細胞、RPE-1細胞

OVCAR 5細胞類似產(chǎn)品：：Nb-2細胞、MTC-TT細胞、SW527細胞

HSMC細胞類似產(chǎn)品：：NCI-HUT-596細胞、Kasumi-1細胞、NCI-SNU-C2A細胞

Psi-2-DAP細胞類似產(chǎn)品：：EAC-E2G8細胞、IEC-6細胞、OKa-C-1細胞

C 6細胞類似產(chǎn)品：：3T3-L1細胞、NT2D1細胞、Factor Dependent Continuous-Paterson 1細胞

WI38細胞類似產(chǎn)品：：NCIH748細胞、WC00059細胞、CCRF/CEM-C7細胞

MCF.10A細胞類似產(chǎn)品：：HEP-3B2細胞、P1-Raji細胞、F442A細胞

NCIH1373細胞類似產(chǎn)品：：H774細胞、BAR-T細胞、OVTOKO細胞

Detroit-562細胞類似產(chǎn)品：：T98細胞、H-35 Reuber細胞、QGP-1細胞

Det. 562細胞類似產(chǎn)品：：H19-7細胞、SNU620細胞、MES 13細胞

H676B細胞類似產(chǎn)品：：CEM T4細胞、AN3細胞、ROS1728細胞

SHI-1細胞類似產(chǎn)品：：T24(ECV304)細胞、C32r細胞、A 172細胞

PL12細胞類似產(chǎn)品：：16HBE140細胞、PA-TU-8988S細胞、HIBEpiC細胞

HBL100細胞類似產(chǎn)品：：PLB985細胞、Mel RM細胞、SU-DHL-10細胞

AE1201細胞類似產(chǎn)品：：COLO 357細胞、WM-266-mel細胞、MM1S細胞

PANC1005細胞類似產(chǎn)品：：H-2198細胞、N-87細胞、MOLM-16細胞

MNNG/HOS Clone F-5細胞類似產(chǎn)品：：SJSA1細胞、DHL-16細胞、GM02131A細胞

HEK-293-FT細胞類似產(chǎn)品：：NP-69細胞、32D:cl3細胞、C3H/10T1/2-clone8細胞

MPC-83細胞類似產(chǎn)品：：PL9細胞、MC 116細胞、H1355細胞

OCILY7細胞類似產(chǎn)品：：SNU-520細胞、PT-67細胞、Hs839T細胞

NTera 2/cl.D1細胞類似產(chǎn)品：：H-1155細胞、OVCAR432細胞、ssMCF-7細胞

Hepa1-6細胞類似產(chǎn)品：：Dx5細胞、CATH-a細胞、SAS細胞

COV434:人卵巢顆粒腫瘤復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

P30-OHK細胞類似產(chǎn)品：：MDA468細胞、KU812-F細胞、H441細胞

Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞類似產(chǎn)品：：LIM 1215細胞、HMC-1細胞、HuH28細胞

Fetal Human Colon細胞類似產(chǎn)品：：GM04154細胞、PBMC細胞、SR786細胞

Japanese Tissue Culture-39細胞類似產(chǎn)品：：HCT-8細胞、Human Embryo Lung-1細胞、LLC-PK(1)細胞

WM 451-Lu細胞類似產(chǎn)品：：HCC2185細胞、H-716細胞、MKN 45細胞

A10細胞類似產(chǎn)品：：SK-MEL2細胞、alphaTC clone 6細胞、OV90細胞

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