"NCI-H748:人小細胞肺癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

凍存和復蘇的原則：慢凍快融》當細胞冷到零度以下，可以產生以下變化：細胞器脫水，細胞中可溶性物質濃度升GAO，并在細胞內形成冰晶。如果緩慢冷凍，可使細胞逐步脫水，細胞內不致產生大的冰晶；相反，結晶就大，大結晶會造成細胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復蘇過程應快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重結晶。慢凍程序》1.標準程序：采用細胞凍存器》當溫度在-25℃以上時，1~2℃/min；當溫度達-25℃以下時，5~10℃/min；當溫度達-100℃時，可迅速放入液氮中。2.簡易程序：將冷凍管（管口要朝上）放入紗布袋內，紗布袋系以線繩，通過線繩將紗布袋固定于液氮罐罐口，按每分鐘溫度下降1~2℃的速度，在40min內降至液氮表面過夜，次晨投人液氮中。3.傳統程序：冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時（或隔夜）→液氮槽長期儲存。細胞凍存方法：1.預先配制凍存液》（1）8%DMSO+細胞生長液（92%血清）2.取對數生長期細胞，經胰酶消化后，加入適量凍存液，用吸管吹打制成細胞懸液（1×10(6)~5×10(6)細胞/ml）。3.加入1ml細胞于凍存管中，密封后標記冷凍細胞名稱和冷凍日期。液氮長期保存。保存細胞的復蘇方法：1.快速解凍》凍存細胞從液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，輕輕搖動冷凍管，使其在1分鐘內全部融化（不要超過3分鐘）。2.解凍后的細胞可直接接種到含完全生長培養(yǎng)液的細胞培養(yǎng)瓶中直接進行培養(yǎng)，24小時后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液，以去除DMSO。3.如果細胞對冷凍保護劑別敏感解凍后的細胞應先通過離心去除冷凍保護劑，然后再接種到含完全生長培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

NCI-H1184細胞類似產品：：H748細胞、L363細胞、Hs 870.T細胞

UO.31細胞類似產品：：MDA-MB-134 VI細胞、GB-1細胞、NBL-1細胞

SDBMSC細胞類似產品：：hSCC-25細胞、HSAS4細胞、VMM39細胞

RK 13細胞類似產品：：NCIH2405細胞、HNE3細胞、SNU601細胞

[細胞產品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

NCI-H748:人小細胞肺癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

H2196細胞類似產品：：LA-N-6(OAN)細胞、MC/CAR細胞、IGR-OV1細胞

NKM-1細胞類似產品：：ZYM-SVEC01細胞、SCL-1細胞、Roswell Park Memorial Institute 1788細胞

hFOB細胞類似產品：：H.Ep. No. 2細胞、NCI-446細胞、COV 504細胞

細胞傳代注意事項：①傳代培養(yǎng)時注意無菌操作并防止細胞間的交叉污染。所有操作盡量靠近酒精燈火焰。每次ZuiHAO只進行一種細胞的操作。每種細胞使用一套器材；②每天觀察細胞形態(tài)，掌握HAO細胞是否健康的標準：健康細胞的形態(tài)飽滿，折光性HAO，生長致密時即可傳代；③如發(fā)現細胞有污染跡象，應立即采取措施，一般應棄置污染的細胞，如果必須挽救，可加含有抗生素的BBS或培養(yǎng)基反復清洗，隨后培養(yǎng)基中加入較大量的抗生素，并經常更換培養(yǎng)基。傳代細胞的建系和維持：細胞系的維持通過換液傳代再換液、再傳代和細胞種子凍存來實現。對每一個細胞系來說都有其自身的點，要做HAO建系的維持必須記錄HAO細胞檔案,換液傳代和做HAO細胞系的管理工作。培養(yǎng)細胞的凍存及復蘇：細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術。細胞凍存在-１９６℃液氮中，儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復蘇的原則是慢凍快融。

細胞傳代方法：３-４天換液１次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

NCI-H748:人小細胞肺癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長特性：懸浮生長 

貼壁細胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，將細胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長，此時細胞生長狀態(tài)良HAO，當補液時，需避免反復吹打。

P3HR1-BL細胞類似產品：：Pan02細胞、MCA-205細胞、SK-ES-1細胞

HEC1-A細胞類似產品：：C33A細胞、hA549細胞、LAPC-4細胞

WILL2細胞類似產品：：H-128細胞、CORL279細胞、OVCAR-4細胞

CCRF/CEM-C7細胞類似產品：：SLMT-1細胞、COLO206細胞、SCCVII/St細胞

HCC2108細胞類似產品：：BNCL2細胞、MXI細胞、SW1783細胞

J 774A.1細胞類似產品：：Panc4.03細胞、SKCol1細胞、KBM-5細胞

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HCT116/L細胞類似產品：：PANC 1005細胞、LAC細胞、U-2-OS細胞

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BLO 11細胞類似產品：：COR-L105細胞、HEK-2細胞、MKN28細胞

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SK-N-DZ細胞類似產品：：A-1847細胞、EC109細胞、BEL 7405細胞

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293E細胞類似產品：：INS-1E細胞、LS 174 T細胞、SHP77細胞

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SW-579細胞類似產品：：OCI/AML3細胞、M-G63細胞、MAVER細胞

MKN-74細胞類似產品：：RMS 1598細胞、IHHA-1細胞、alpha-TC1-6細胞

HCC-44細胞類似產品：：NU-GC-2細胞、BLO11細胞、TH1細胞

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NCI-H748:人小細胞肺癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

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Karpas-299細胞類似產品：：HCM細胞、SHIN-3細胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞

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GM02132細胞類似產品：：SNU-620細胞、VMM5A細胞、A549ATCC細胞

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