"GES-1:人胃黏膜上皮復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)HAO與不HAO至關(guān)重要的考驗。很多同學(xué)都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺HAO的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更HAO一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況把握）。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

P3/NSI/1-AG4-1細胞類似產(chǎn)品：：SW 1088細胞、Alexander細胞、CAL-148細胞

HR-1細胞類似產(chǎn)品：：HEK293F細胞、Walker-256-TC細胞、SNU638細胞

DC 2.4細胞類似產(chǎn)品：：526細胞、HFLS-OA細胞、NBL-S細胞

NCI-1155細胞類似產(chǎn)品：：GM05372細胞、MCF7-GFP細胞、102PT細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

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細胞形態(tài)：上皮細胞樣

B16BL-6細胞類似產(chǎn)品：：MMQ細胞、Ca 9-22細胞、H1755細胞

SCC 9細胞類似產(chǎn)品：：MLE-12細胞、SK-MEL-24細胞、GM03671C細胞

Hx147細胞類似產(chǎn)品：：343 MG細胞、BJAB細胞、COLO 394細胞

細胞培養(yǎng)無菌操作的演示：凡是帶入超凈工作臺內(nèi)的酒精、PBS、培養(yǎng)基、胰蛋白酶的瓶子均要用７５％酒精擦拭瓶子的外表面；靠近酒精燈火焰操作。器皿使用前必須過火滅菌，繼續(xù)使用的器皿(如瓶蓋、滴管)要放在GAO處，使用時仍要過火。各種操作要靠近酒精燈，動作要輕、準(zhǔn)確，不能亂碰。如吸管不能碰到廢液缸。吸取兩種以上的使用液時要注意更換吸管，防止交叉污染。玻璃器械洗消：一、新的玻璃器皿的洗消：自來水刷洗，除去灰塵。烘干、泡：烤箱中烘干，然后再浸入５％稀中１２小時以除去臟物、鉛、等物。刷洗、烘干：１２小時后立即用自來水沖洗，再用洗滌劑刷洗，自來水沖干凈后用烤箱烘干；泡酸、清洗：用清潔液浸泡１２小時，然后從酸缸內(nèi)撈出器皿用自來水沖洗１５次，Zui后蒸餾水沖洗３-５次和用雙蒸水過３次。烘干、包裝：洗干凈后先烘干，然后用牛皮紙(油光紙)包裝。GAO壓消毒：包裝HAO的器皿裝入GAO壓鍋內(nèi)蓋HAO蓋子，打開開關(guān)和安全閥，當(dāng)蒸氣成直線上升時，關(guān)閉安全閥，當(dāng)指針指向１５磅時，維持２０-３０分鐘。GAO壓消毒后烘干。二、舊的玻璃器皿的洗消：刷洗、烘干：使用過的玻璃器皿可直接泡入來蘇爾液或洗滌劑溶液中，泡過來蘇爾溶液(洗滌劑)的器皿要用清水刷洗干凈，然后烘干。泡酸、清洗：烘干后泡入清潔液(酸液)，１２小時后從酸缸內(nèi)撈出器皿立即用自來水沖洗(避免蛋白質(zhì)干涸后粘附于玻璃上難以清洗)，再用蒸餾水沖洗３次。烘干、包裝：洗干凈的器皿烘干后取出用牛皮紙(油光紙)等包裝。

細胞傳代方法：１：２傳代

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

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細胞生長特性：貼壁生長

貼壁細胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，將細胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長，此時細胞生長狀態(tài)良HAO，當(dāng)補液時，需避免反復(fù)吹打。

EA hy 926細胞類似產(chǎn)品：：GM00637B細胞、SUDHL-6細胞、HS-68細胞

MXI細胞類似產(chǎn)品：：Earles's cells細胞、HET-1A細胞、HepG2-luc細胞

H766T細胞類似產(chǎn)品：：Hs27細胞、EAHY-926細胞、Y3Ag1.2.3細胞

B16F10細胞類似產(chǎn)品：：CFPAC細胞、SupB15WT細胞、NB1RGB細胞

HCC1954-BL細胞類似產(chǎn)品：：HEK-A細胞、SK-MEL-3細胞、MyLa 2059細胞

3T3 J2細胞類似產(chǎn)品：：Henrietta Lacks cells細胞、RPMI 8402細胞、G-401細胞

SUM-52PE細胞類似產(chǎn)品：：GM01232E細胞、LLC-PK1細胞、U-226AR1細胞

CCD1095Sk細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H711細胞、ETCC-007細胞、MM134細胞

HFF1細胞類似產(chǎn)品：：BNL 1ME A.7R.1細胞、MB39細胞、H295R-S1細胞

AMO1細胞類似產(chǎn)品：：RKO-AS-45-1細胞、MHCC 97-L細胞、OPM2細胞

C57 Mouse Tumor 64細胞類似產(chǎn)品：：BALB/3T3細胞、MDAPCa2b細胞、RT-4細胞

MDA-453細胞類似產(chǎn)品：：JCA1細胞、CHP-100細胞、Caco-2/BBe 1細胞

OVCAR 4細胞類似產(chǎn)品：：TSCC1細胞、HIEC細胞、NPA-87細胞

A 172細胞類似產(chǎn)品：：A427細胞、BEAS2B細胞、Tissue Culture-1細胞

OCIAML5細胞類似產(chǎn)品：：Leukemia 1210細胞、HS-294細胞、HEL-92-1-7細胞

NTera2/D1細胞類似產(chǎn)品：：PK13細胞、LOUNH91細胞、HEK293A細胞

NTera2/D1細胞類似產(chǎn)品：：PK13細胞、LOUNH91細胞、HEK293A細胞

RMG1細胞類似產(chǎn)品：：MFE-280細胞、NCI-H2110細胞、H82sclc細胞

LNCaP細胞類似產(chǎn)品：：Y79細胞、CCK81細胞、PE/CA-PJ34細胞

KYSE180細胞類似產(chǎn)品：：RSC-96細胞、SU4細胞、JROECL21細胞

NCI747細胞類似產(chǎn)品：：N87細胞、KYSE0520細胞、NCI-H735細胞

SF 295細胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB 453細胞、SW-1116細胞、HuP-T3細胞

KYSE180細胞類似產(chǎn)品：：RSC-96細胞、SU4細胞、JROECL21細胞

MARC145細胞類似產(chǎn)品：：FRH-0201細胞、IPLB-SF-21-AE細胞、HCC2157細胞

GES-1:人胃黏膜上皮復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

EL 4細胞類似產(chǎn)品：：L5178Y細胞、Hs 294T細胞、HuH-28細胞

OV1-P細胞類似產(chǎn)品：：H740細胞、SK-ChA-1細胞、UPCI:SCC154細胞

BL2141細胞類似產(chǎn)品：：CAL148細胞、MOVAS-1細胞、PL 45細胞

KRC Y細胞類似產(chǎn)品：：L540細胞、B-95-8細胞、McG-1細胞

ST細胞類似產(chǎn)品：：HGF-1細胞、THPI細胞、RGM-1細胞

PLC-8024細胞類似產(chǎn)品：：aTC1-6細胞、BT-B細胞、AMC-HN8細胞

231-luc細胞類似產(chǎn)品：：BTT739細胞、HCC-2185細胞、RPE1-hTERT細胞

MLA 144細胞類似產(chǎn)品：：ATDC-5細胞、CAL 51細胞、NCI-H1650細胞

H719細胞類似產(chǎn)品：：CAL-78細胞、MV411細胞、HuT 78細胞

Kit225-K6細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H358細胞、Okayama University Medical School-27細胞、HeLa.S3細胞

NCIH2228細胞類似產(chǎn)品：：KCL-22細胞、FHL-124細胞、ZYM-SVEC01細胞

MDCK (NBL-2)細胞類似產(chǎn)品：：KMS-26細胞、As-PC1細胞、NCI-H69C細胞

HDMEC細胞類似產(chǎn)品：：Hs895.T細胞、GLC-82細胞、Karpas 422細胞

CFPAC細胞類似產(chǎn)品：：NCIH524細胞、HEL9217細胞、DMS-153細胞

Hs.27細胞類似產(chǎn)品：：H-526細胞、Hs 578Bst細胞、Nb 2細胞

MOLM-14細胞類似產(chǎn)品：：C-643細胞、OCI-Ly07細胞、PANC0203細胞

NCI-H740細胞類似產(chǎn)品：：LA-N-6細胞、AM細胞、Panc_08_13細胞

MDA453細胞類似產(chǎn)品：：EMT-6細胞、CEM clone 7細胞、P3/X63-Ag8細胞

HCa/16A3-F細胞類似產(chǎn)品：：SHEP1細胞、CCK-81細胞、RA.1細胞

ChaGo-K-1細胞類似產(chǎn)品：：Michigan Cancer Foundation-7細胞、LS123細胞、CAKI1細胞

EC-9706細胞類似產(chǎn)品：：LTEP-s細胞、BaF3細胞、G292細胞

EC-9706細胞類似產(chǎn)品：：LTEP-s細胞、BaF3細胞、G292細胞

B-16細胞類似產(chǎn)品：：SU-86-86細胞、U-2 OS細胞、H1975細胞

HFL 1細胞類似產(chǎn)品：：MIA Paca2細胞、Panc 04.03細胞、HCC-1937細胞

MKN-7細胞類似產(chǎn)品：：KM12 SM細胞、108CC15細胞、NR-8383細胞

CO115細胞類似產(chǎn)品：：SK.MEL.5細胞、PECAPJ34細胞、MADB-106細胞

HO8910/PM細胞類似產(chǎn)品：：Bac12F5細胞、U-118-MG細胞、MUS-M1細胞

CDC/EU.HMEC-1細胞類似產(chǎn)品：：NCIH2227細胞、SKN-SH細胞、NCI-H209細胞

Vero from pool #76細胞類似產(chǎn)品：：TM-3細胞、DoTc2 4510細胞、HCE-2 [50.B1]細胞

Pro-Lec1.3C細胞類似產(chǎn)品：：3T3 clone A31細胞、UACC 812細胞、NCI-H1770細胞

SUM-52PE細胞類似產(chǎn)品：：GM01232E細胞、LLC-PK1細胞、U-226AR1細胞

RPMI2650細胞類似產(chǎn)品：：H747細胞、HEC-1-A細胞、HS688AT細胞

Panc_02_03細胞類似產(chǎn)品：：OCI-LY-19細胞、HCC1954-BL細胞、KU1919細胞

RC92A細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1648細胞、CCC-HEH-2細胞、HUT 125細胞

BE2-M17細胞類似產(chǎn)品：：COLO680N細胞、CDC/EU.HMEC-1細胞、SW1222細胞

SK-N-BE(2C)細胞類似產(chǎn)品：：MOLP8細胞、HBMEC細胞、YD-38細胞

Y3.AG.1.2.3細胞類似產(chǎn)品：：Rat Fetal Lung-6細胞、C-4 I細胞、T241細胞

H748細胞類似產(chǎn)品：：MJ細胞、Michigan Cancer Foundation-10A細胞、UCH1細胞

Jurkat (clone E6-1)細胞類似產(chǎn)品：：SW756細胞、CEM-CCRF (CAMR)細胞、MOLT-16細胞

3AA細胞類似產(chǎn)品：：Centre Antoine Lacassagne-12T細胞、LN299細胞、F9細胞

U-266細胞類似產(chǎn)品：：EA.hy 926細胞、NCI H508細胞、HCC-1500細胞

rRTEC細胞類似產(chǎn)品：：H596細胞、NCI-H1105細胞、MCF7ADR細胞

GM00637H細胞類似產(chǎn)品：：A101D細胞、SUDHL16細胞、IM-95細胞

RK13細胞類似產(chǎn)品：：CCLP1細胞、AMJ2C8細胞、H-2444細胞

Epithelioma Papulosum Cyprini細胞類似產(chǎn)品：：EOMA細胞、McCoy B細胞、MES-SA Dx5細胞

MCF-12F細胞類似產(chǎn)品：：COLO-741細胞、FHL 124細胞、GRSL細胞

HEK293T/17細胞類似產(chǎn)品：：SKNSH細胞、University of Arizona Cell Culture-893細胞、SUM149PT細胞

Hs888Lu細胞類似產(chǎn)品：：COLO 829細胞、Y79細胞、SUM52PE細胞

Oka-C1細胞類似產(chǎn)品：：H-719細胞、NCI-H322細胞、HHFK細胞

NG-108-15細胞類似產(chǎn)品：：TC-1 [Mouse lung]細胞、CL11細胞、BNL CL.2細胞

NCI-H660細胞類似產(chǎn)品：：SK-MEL5細胞、GM03573細胞、LS 1034細胞

U-251細胞類似產(chǎn)品：：Hs 606細胞、293E細胞、CT26-clone 25細胞

SNU-601細胞類似產(chǎn)品：：NT2/D1細胞、PANC-03-27細胞、DSL-6A-C1細胞

MCF10A細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H647細胞、GP5d細胞、CV-1.K細胞

HCT GEO細胞類似產(chǎn)品：：ISHI細胞、Rainbow Trout Embryo細胞、T_T_細胞

ATDC5細胞類似產(chǎn)品：：L23/P細胞、RGC-6細胞、Calf Pulmonary Artery 47細胞

MCF10A細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H647細胞、GP5d細胞、CV-1.K細胞

H-1963細胞類似產(chǎn)品：：CTX TNA2細胞、OCI-AML-4細胞、SK-MEL24細胞

H-1963細胞類似產(chǎn)品：：CTX TNA2細胞、OCI-AML-4細胞、SK-MEL24細胞

HCC1954-BL細胞類似產(chǎn)品：：HEK-A細胞、SK-MEL-3細胞、MyLa 2059細胞

LP1細胞類似產(chǎn)品：：SW480細胞、HCC 94細胞、AML12細胞

NCI-H865細胞類似產(chǎn)品：：SU-DHL-6細胞、AZ-521細胞、SU-DHL-2細胞

Huh7.5細胞類似產(chǎn)品：：Hs819.T細胞、L-WRN細胞、Mono Mac6細胞

SK-Mel 1細胞類似產(chǎn)品：：Hs 683細胞、KYSE 140細胞、Murine Leydig Tumor Cell line-1細胞

NKT細胞類似產(chǎn)品：：MASMC細胞、Tca8113細胞、SKMEL5細胞

SHI1細胞類似產(chǎn)品：：RAG細胞、U266 Bl細胞、LIM1215細胞

OKT 3細胞類似產(chǎn)品：：SNU-638細胞、ROS17/2.8細胞、SK-N-BE(2)-M17細胞

Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞類似產(chǎn)品：：OCLY8細胞、HCC-15細胞、HPAF細胞

MDCK2細胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-134細胞、Jurkat77細胞、SPC-A-1細胞

MIO-M1細胞類似產(chǎn)品：：PL12細胞、OCI/AML2細胞、ZR7530細胞

Hs 940.T細胞類似產(chǎn)品：：CoC1細胞、TE10細胞、MEF (CF-1)細胞

MDA435細胞類似產(chǎn)品：：NUGC-3細胞、MFE280細胞、JEG3細胞

ssMCF7細胞類似產(chǎn)品：：Mc Coy細胞、NCI-H2106細胞、BEL/FU細胞

Cloudman S91 melanoma細胞類似產(chǎn)品：：COLO 206細胞、CAL39細胞、NCI-522細胞

RPMI-6666細胞類似產(chǎn)品：：SKG3A細胞、MC-116細胞、Madin-Darby Bovine Kidney細胞

MNNG-HOS (Cl#5)細胞類似產(chǎn)品：：P31-FUJ細胞、HCGC細胞、Hi-5細胞

Epstein-Barr-3細胞類似產(chǎn)品：：SHG44細胞、Roswell Park Memorial Institute 2650細胞、NEC-8細胞

NCIH196細胞類似產(chǎn)品：：YES 2細胞、AZ521細胞、ZR75-1細胞

MC3T3細胞類似產(chǎn)品：：P3-NS1/1-Ag4-1細胞、Panc 02細胞、COLO 201細胞

D341 Med細胞類似產(chǎn)品：：A172細胞、ZR-75-30細胞、Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞

H1048細胞類似產(chǎn)品：：IGROV1細胞、HT55細胞、NL20細胞

EU-4細胞類似產(chǎn)品：：FUOV1細胞、ZYM-DIEC02細胞、HEK-293F細胞

GES-1:人胃黏膜上皮復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

b.End3細胞類似產(chǎn)品：：Calu 6細胞、C1498細胞、8305-C細胞

T8細胞類似產(chǎn)品：：Lu-65細胞、SK-SH-SY5Y細胞、RCC23細胞

RPMI7666細胞類似產(chǎn)品：：MFD-1細胞、EFM192C細胞、Panc_05_04細胞

FM-88細胞類似產(chǎn)品：：KM H-2細胞、MC26細胞、N1E115細胞

EU-2細胞類似產(chǎn)品：：TE-11細胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細胞、NCI-H1404細胞

XuanWei Lung Cancer-05細胞類似產(chǎn)品：：GM 2132細胞、MFE 280細胞、R D細胞

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