"MDA-kb2:人正常乳腺復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)HAO與不HAO至關重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺HAO的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非常肯定地說，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更HAO一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況把握）。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

NCI H2106細胞類似產(chǎn)品：：IPLB-SF-21細胞、Human podocyte細胞、TE671/RD細胞

LC-2-Ad細胞類似產(chǎn)品：：SKRC 39細胞、HLFa細胞、WB-F344細胞

HS-940-T細胞類似產(chǎn)品：：Hs940-T細胞、WILL-2細胞、HSF2細胞

PLC8024細胞類似產(chǎn)品：：LS-174T細胞、KYSE30細胞、Panc3_27細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

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細胞形態(tài)：上皮細胞樣

SuDHL 1細胞類似產(chǎn)品：：HSKMC細胞、BE2M17細胞、NCIH3255細胞

GB-1細胞類似產(chǎn)品：：DLD-1細胞、RPVSMC細胞、MOLT3細胞

Hx-147細胞類似產(chǎn)品：：PLB 985細胞、MES-23.5細胞、PG-4細胞

細胞傳代培養(yǎng)的胰酶消化法：傳代培養(yǎng)：是指細胞從一個培養(yǎng)瓶以１：２或１：２以上的比例轉移，接種到另一培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)。傳代細胞，可根據(jù)不同細胞采取不同的方法進行細胞傳代。貼壁生長的細胞用消化法傳代，部分貼壁的細胞用直接吹打或用硅膠軟刮的刮除法傳代。懸浮細胞可采用加入等量新鮮培養(yǎng)基后直接吹打分散進行傳代，或用自然沉降法加入新培養(yǎng)基后再吹打分散進行傳代。實驗步驟：①入無菌室之前用肥皂洗手，再用７５% 的酒精擦拭消毒雙手；②倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)，確定細胞是否傳代及細胞需要稀釋的倍數(shù)。將培養(yǎng)用液３７℃下預熱；③超凈臺臺面應整潔，用７５%酒精棉球擦拭清潔；④打開超凈工作臺的紫外燈照射臺面２０min左右，關閉紫外燈，打開風機清潔空氣除去臭氧；⑤點燃酒精燈;取出無菌試管，巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過酒精燈火焰略燒后插在無菌試管內(nèi)；⑥將培養(yǎng)用液瓶口用７５%酒精消毒，過酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上；⑦倒掉培養(yǎng)細胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用２-３ml Hanks液洗去殘留的就培養(yǎng)基，或用少量胰酶涮洗一下；⑧每個大培養(yǎng)瓶加入１ml胰酶，小培養(yǎng)瓶用量酌減，蓋HAO瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察。當細胞收回突起變圓時立即翻轉培養(yǎng)瓶，使細胞脫離胰酶，然后將胰酶倒掉。注意勿使細胞提早脫落入消化液中；⑨加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基，反復吹打消化HAO的細胞使其脫壁并分散，再根據(jù)分傳瓶數(shù)補加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基(７-１０ml/大瓶;３-５ml/小瓶)制成細胞懸液，然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋HAO瓶蓋，適度擰緊后稍回轉，以利于CO２的進入，將培養(yǎng)瓶放回CO２培養(yǎng)箱；⑩對懸浮培養(yǎng)細胞，步驟７-９不做。直接將細胞懸液進行離心去除舊培養(yǎng)基上清，加入新鮮培養(yǎng)基，然后分裝到各瓶中。

細胞傳代方法：１：２傳代

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

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細胞生長特性：貼壁生長

細胞培養(yǎng)中常用設施及設備：實驗室設計：細胞培養(yǎng)是一種無菌操作技術，要求工作環(huán)境和條件必須保證無微生物污染和不受其它有害因素的影響。細胞培養(yǎng)室和設計原則是防止微生物污染和有害因素影響，要求工作環(huán)境清潔、空氣清新，干燥和無煙塵。細胞培養(yǎng)室的設計原則一般是無菌操作區(qū)設在室內(nèi)較少走動的內(nèi)側，常規(guī)操作和封閉培養(yǎng)于一室，而洗刷消毒在另一室。常用設施及設備：1)超凈工作臺：也稱凈化工作臺，分為側流式、直流式和外流式三大類。2)無菌操作間：一般由更衣間、緩沖間和操作間三部分組成。操作間放置凈化工作臺及二氧化碳培養(yǎng)箱、離心機、倒置顯微鏡等。緩沖間可放置電冰箱、冷藏器及消毒HAO的無菌物品等。3)操作間：普通培養(yǎng)箱、離心機、水浴鍋、定時鐘、普通天平及日常分析處理物。4)洗刷消毒間：烤箱、消毒鍋、蒸餾水處理器及酸缸等。5)分析室：顯微鏡、計算機及打印機等。

SW 900細胞類似產(chǎn)品：：H295R-S1細胞、H1563細胞、Tb1.Lu細胞

HREC細胞類似產(chǎn)品：：H-1672細胞、J.E6-1細胞、PLC-PRF-5細胞

MDA-MB231細胞類似產(chǎn)品：：SF-126細胞、NCI-H1184細胞、TW-039細胞

CHP 100細胞類似產(chǎn)品：：PANC3.27細胞、RWPE-1細胞、Hs-611-T細胞

IEC6細胞類似產(chǎn)品：：HEK 293-EBNA細胞、COR-L23細胞、ME-180細胞

Huh-7細胞類似產(chǎn)品：：MCM細胞、EAhy926細胞、MDAMB435S細胞

2V6.11細胞類似產(chǎn)品：：IPLB-Sf21AE細胞、NCIH1299細胞、WC00044細胞

JROECL21細胞類似產(chǎn)品：：OsA-CL細胞、HCMEC(BL12-H)細胞、EBC-1/original細胞

GalK 1細胞類似產(chǎn)品：：Homo sapiens No. 578, breast cells細胞、HEB細胞、WiDr細胞

U-343細胞類似產(chǎn)品：：P3HR1-BL細胞、HCCC9810細胞、786-0細胞

LM TK negative細胞類似產(chǎn)品：：SW1088細胞、P3J細胞、HR1K細胞

WSU-HN13細胞類似產(chǎn)品：：RPMI 8402細胞、H2073細胞、DAN-G細胞

HR1K細胞類似產(chǎn)品：：JB6 Cl 30-7b細胞、TM-4細胞、IB-RS2細胞

K-562細胞類似產(chǎn)品：：GFP-Olig2細胞、Colo205細胞、H3255細胞

DB細胞類似產(chǎn)品：：RGB細胞、NBL-3細胞、HEL299細胞

HBVSMC細胞類似產(chǎn)品：：CAL-27細胞、Kelly細胞、OCI AML4細胞

HBVSMC細胞類似產(chǎn)品：：CAL-27細胞、Kelly細胞、OCI AML4細胞

YES2細胞類似產(chǎn)品：：MDAMB175細胞、WM2664細胞、H-295R細胞

Hs940-T細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2228細胞、SNU-886細胞、DMS 79細胞

Capan 1細胞類似產(chǎn)品：：CAOV3細胞、BHP 10-3細胞、NCI-SNU-5細胞

HS-766T細胞類似產(chǎn)品：：SW-1353細胞、NCI-H2085細胞、C32r細胞

SUDHL-8細胞類似產(chǎn)品：：SK-MEL-1細胞、OCI-Ly18細胞、LS123細胞

HIT-T15細胞類似產(chǎn)品：：SMA560細胞、H747細胞、SNU886細胞

TE671細胞類似產(chǎn)品：：AU-Mel細胞、SK.MEL.28細胞、Y3.AG.1.2.3細胞

MDA-kb2:人正常乳腺復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

HDQ-P1細胞類似產(chǎn)品：：HCT.116細胞、A-673細胞、HIEC細胞

A 72細胞類似產(chǎn)品：：AC29細胞、SW-579細胞、UPCISCC154細胞

Swiss 3T6細胞類似產(chǎn)品：：GM02219D細胞、C3H/10T1/2-clone8細胞、KM-12細胞

Hs746-T細胞類似產(chǎn)品：：DU 4475細胞、NCI-H2126細胞、KY-270細胞

Tsup-1細胞類似產(chǎn)品：：CCFSTTG1細胞、58F細胞、HCC-1954BL細胞

ME1細胞類似產(chǎn)品：：TE9細胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細胞、NCI-H2228細胞

SR-786細胞類似產(chǎn)品：：OCI/AML-4細胞、EFM-192B細胞、SK-RC-52細胞

OsA-CL細胞類似產(chǎn)品：：TE11細胞、TE6細胞、NRK 52E細胞

HCC1569細胞類似產(chǎn)品：：MC57細胞、UPCI-SCC-154細胞、SU86-86細胞

IR 983F細胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-231 #4175細胞、Detroit-562細胞、HCT GEO細胞

Embryonic Bovine Tracheal cells細胞類似產(chǎn)品：：NCM460細胞、HNE2細胞、DMS 153細胞

HGBEC細胞類似產(chǎn)品：：BEAS-2B細胞、MGH-U1 (EJ)細胞、LNCaP C4-2B細胞

H-1092細胞類似產(chǎn)品：：Hs 863.T細胞、MCF 10A細胞、H-1238細胞

MN9D細胞類似產(chǎn)品：：U251n細胞、Vero from pool #76細胞、HAPI細胞

DU 145細胞類似產(chǎn)品：：Fetal Human Lens-124細胞、McA-RH 8994細胞、U118-MG細胞

Hs600T細胞類似產(chǎn)品：：SNK1細胞、Hs832T細胞、U20-S細胞

T98-G細胞類似產(chǎn)品：：H-28細胞、D341 Med細胞、OV1/P細胞

MCA 38細胞類似產(chǎn)品：：MeSoTheliOma-211H細胞、NSI/1-Ag4-1細胞、GC-1spg細胞

CF PAC-1細胞類似產(chǎn)品：：WSU-DLCL(2)細胞、NCI-H841細胞、TE12細胞

H1092細胞類似產(chǎn)品：：MM134細胞、C166細胞、MCF/Adr細胞

WB-F344細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H211細胞、Kit225/K6細胞、WM239A細胞

B 95.8細胞類似產(chǎn)品：：NS20Y細胞、KBM5細胞、HFE-145細胞

F56 [Human neoplasm]細胞類似產(chǎn)品：：CL-11細胞、PANC-02-03細胞、TE-85 clone 5細胞

NCI-H510A細胞類似產(chǎn)品：：G-292 clone A141B1細胞、H209細胞、CL1.0細胞

C3H10T1/2CL8細胞類似產(chǎn)品：：SKNFI細胞、TE-15細胞、H-2073細胞

RCC10RGB細胞類似產(chǎn)品：：PLA801-95C細胞、Michigan Cancer Foundation-10A細胞、MIO-M1細胞

AM細胞類似產(chǎn)品：：HFLS-RA細胞、GLC-15細胞、HO1N1細胞

2T細胞類似產(chǎn)品：：HEK-293A細胞、rUCMSCs細胞、NCM460細胞

SUM 102PT細胞類似產(chǎn)品：：H660細胞、BC-009細胞、SK-LU-1細胞

HT-29/CX-1細胞類似產(chǎn)品：：231-luc細胞、PC-3/M細胞、HL60細胞

CAL-27細胞類似產(chǎn)品：：CAL-51細胞、My-La 2059細胞、NCI-747細胞

GM07404D細胞類似產(chǎn)品：：H1838細胞、NS20Y細胞、KP2細胞

IHH-4細胞類似產(chǎn)品：：PE CA PJ34細胞、CEM-C1細胞、L 132細胞

SW 1990細胞類似產(chǎn)品：：MLE12細胞、NB19細胞、R2C細胞

SUDHL-6細胞類似產(chǎn)品：：MCF-10 Attached細胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞、RGC-5細胞

NFS60細胞類似產(chǎn)品：：HUT-125細胞、NGEC細胞、RPMI 1846細胞

SNU-878細胞類似產(chǎn)品：：HR8348細胞、BMSC/hBMSCs細胞、ARPE19細胞

MDA-MB231細胞類似產(chǎn)品：：SF-126細胞、HMEL細胞、AN-3細胞

Hep3B細胞類似產(chǎn)品：：P3J-HR-1細胞、OCI-AML3細胞、IPI-2I細胞

HeLa/DDP細胞類似產(chǎn)品：：COLO 320細胞、KATO 3細胞、L-6 myoblast細胞

Line 870 Emory University-4細胞類似產(chǎn)品：：CCD841CoTr細胞、U343細胞、Wien-133細胞

HCC-78細胞類似產(chǎn)品：：H358細胞、RPMC細胞、L-Wnt-3A細胞

BN-CL2細胞類似產(chǎn)品：：SW-1271細胞、OCI/AML-4細胞、Calu-3細胞

KYSE-30細胞類似產(chǎn)品：：95-D細胞、NCTC929細胞、3T3 L1細胞

SW-579細胞類似產(chǎn)品：：OCI/AML3細胞、M-G63細胞、MAVER細胞

THP 1細胞類似產(chǎn)品：：HUT-226細胞、C2C12細胞、KMS-26細胞

WPMY-1細胞類似產(chǎn)品：：8226細胞、K7M2-WT細胞、VM Cub 1細胞

H3396細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1693細胞、KYSE 410細胞、WSU-DLCL(2)細胞

QG-56細胞類似產(chǎn)品：：SY5Y細胞、Tu-686細胞、SB細胞

ChaGo K-1細胞類似產(chǎn)品：：UCH1細胞、HIT clone T15細胞、KYSE 510細胞

EB3 [Human Burkitt lymphoma]細胞類似產(chǎn)品：：Okayama University Medical School-27細胞、H929細胞、SW480E細胞

PLA-801C細胞類似產(chǎn)品：：FHL124細胞、BTT739細胞、PC-3細胞

NCI-H-82細胞類似產(chǎn)品：：BMDC細胞、HOS-TE85細胞、M619細胞

OVCAR432細胞類似產(chǎn)品：：LU-65M細胞、Malme-3M細胞、H-2030細胞

RMG1細胞類似產(chǎn)品：：MFE-280細胞、NCI-H2110細胞、H82sclc細胞

NCI-H1954細胞類似產(chǎn)品：：TE13細胞、HUT-226細胞、PCI:SG-231細胞

DMS-114細胞類似產(chǎn)品：：MDAMB-231細胞、253J細胞、293AD細胞

COLO684細胞類似產(chǎn)品：：GP5d細胞、MDA134細胞、SNUC1細胞

ARPE19細胞類似產(chǎn)品：：Balb/3T3-4-Cl31細胞、U 937細胞、IM 9細胞

BrCL18細胞類似產(chǎn)品：：MUTZ3細胞、SKMEL-2細胞、VK-2/E6E7細胞

GB-1細胞類似產(chǎn)品：：DLD-1細胞、RPVSMC細胞、MOLT3細胞

MKN 7細胞類似產(chǎn)品：：MCAEC細胞、COR-L279細胞、JEG-3細胞

H-1993細胞類似產(chǎn)品：：Panc02細胞、Wistar Institute, Susan Hayflick細胞、293A細胞

NCI-H-82細胞類似產(chǎn)品：：BMDC細胞、HOS-TE85細胞、M619細胞

MIA-Pa-Ca-2細胞類似產(chǎn)品：：451-LU細胞、JEG-3細胞、Panc 08.13細胞

Hs940T細胞類似產(chǎn)品：：A549/ATCC細胞、OCI AML5細胞、SGC-996細胞

CHO/dhFr-細胞類似產(chǎn)品：：MDBK細胞、NOK細胞、HT 115細胞

293T/17細胞類似產(chǎn)品：：SU-DHL-16細胞、IPEC1細胞、H1693細胞

MN 60細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H719細胞、639-V細胞、MZCRC1細胞

Murine Thymic Epithelial Cell line 1細胞類似產(chǎn)品：：T-84細胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞、PA I細胞

TW-039細胞類似產(chǎn)品：：RT-4細胞、102PT細胞、GalK 1細胞

NIH:OVCAR-3細胞類似產(chǎn)品：：Super Tube細胞、HDLM-2細胞、IMR32細胞

Hs839.T細胞類似產(chǎn)品：：SCC154細胞、VMM39細胞、Becker細胞

SW 527細胞類似產(chǎn)品：：UMUC-3細胞、H1435細胞、A375-S2細胞

SVHUC細胞類似產(chǎn)品：：H-2052細胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1細胞、NCI-H716細胞

LMH細胞類似產(chǎn)品：：SAOS 2細胞、Madin-Darby Canine Kidney細胞、NCI-H920細胞

H-87細胞類似產(chǎn)品：：Panc813細胞、Karpas299細胞、ZR75-30細胞

MH-22a細胞類似產(chǎn)品：：High-5細胞、NCI-H2286細胞、P3-NS1/1Ag 4.1細胞

NSI/1-Ag4-1細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2066細胞、Nthy-ori 3.1細胞、alpha TC1 clone 6細胞

SKMEL-2細胞類似產(chǎn)品：：M-20細胞、GC-2spd(ts)細胞、BAC1.2F5細胞

H2347細胞類似產(chǎn)品：：ChaGo-K1細胞、P388細胞、Centre Antoine Lacassagne-148細胞

BCPAP細胞類似產(chǎn)品：：NCCIT細胞、X63-AG 8.653細胞、COLO-357細胞

MDA-kb2:人正常乳腺復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

16-HBE14o細胞類似產(chǎn)品：：SN12-PM6細胞、HEC1-B細胞、P-388D1細胞

K562/ADP細胞類似產(chǎn)品：：SJRH-30細胞、TE-85 clone 5細胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細胞

NCIH596細胞類似產(chǎn)品：：Tu-212細胞、NCIH2066細胞、CL1細胞

4-1st細胞類似產(chǎn)品：：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞、HL 60細胞、NCI H548細胞

AML12細胞類似產(chǎn)品：：MC-3T3-E1細胞、PIG3細胞、Panc-08.13細胞

Roswell Park Memorial Institute 2650細胞類似產(chǎn)品：：LPC-H12細胞、NCI-H1417細胞、Duke University 145細胞

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