"DLD-1:人結直腸腺癌上皮復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

有一些細胞是數(shù)量多一點比較HAO生長，生長狀態(tài)也比較HAO。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較HAO，譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞，生長速度非常得快，貼壁速度很快，所以傳代時就應該留很少量的細胞，這樣細胞狀態(tài)會比較HAO。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長，而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候，細胞形態(tài)基本上就會差了，老化的會比較多，對后期實驗結果是不HAO的。所以在養(yǎng)細胞的時候應該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞，如果細胞形態(tài)不HAO，（或者細胞形態(tài)不清晰，表面似有異物等）可以在傳代的時候進行如下操作：首先，倒掉舊的培養(yǎng)基，加入3ml新的培養(yǎng)基（有無血清的都可）洗滌一次，用滴管吸走，然后再加入3ml的培養(yǎng)基，進行預吹打，控制吹打力度，輕輕地大概沿著瓶底過一遍，然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。（巨噬細胞建議只吹打，不消化）其次，把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內，培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基，放入培養(yǎng)箱內培養(yǎng)，按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次，20分鐘，30分鐘觀察一次。選擇一個時間點，已經有部分細胞貼壁的情況下，重新置于潔凈臺，底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基，加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。通常稱之為“二傳”。如果一次效果還不理想，可重復多次。直到找到細胞上乘形態(tài)。其中要注意，結合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得HAO的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

SNU-638細胞類似產品：：Hu-P-T4細胞、VeroC1008細胞、Anip[973]細胞

FHC細胞類似產品：：HELA-GFP細胞、T-24細胞、S91細胞

Calu-3細胞類似產品：：H-378細胞、OP-9細胞、Hs 611.T細胞

NCI-H1975細胞類似產品：：LS-174細胞、H-889細胞、Jurkat-E6細胞

[細胞產品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：DLD-１是１９７７-１９７９年間D.L.Dexter和同事分離的兩株結直腸腺癌細胞株中的一株。在ATCC和其它地方進行的DNAfingerprinting和染色體組型分析表明這株細胞與HCT-１５(CCL-２２５)相似，說明這兩者是來自同一個人的不同克隆。他們的遺傳起源可通過DNAfingerprinting證實，但染色體組型分析顯示它們缺乏染色體標記一致改變或數(shù)目上一致改變。細胞的CSAp陰性(CSAp-)。DLD-１細胞的p５３抗原表達呈陽性(p５３抗原產生了一個C->

DLD-1:人結直腸腺癌上皮復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

AU-Mel細胞類似產品：：RKO-AS45-1細胞、B 95-8細胞、NCI-157細胞

L-5178-Y-R細胞類似產品：：WPE-int細胞、SW260細胞、OUMS23細胞

FRhK4細胞類似產品：：NCIH508細胞、CCLP-1細胞、Tn 5B1-4細胞

細胞培養(yǎng)無菌操作的演示：凡是帶入超凈工作臺內的酒精、PBS、培養(yǎng)基、胰蛋白酶的瓶子均要用７５％酒精擦拭瓶子的外表面；靠近酒精燈火焰操作。器皿使用前必須過火滅菌，繼續(xù)使用的器皿(如瓶蓋、滴管)要放在GAO處，使用時仍要過火。各種操作要靠近酒精燈，動作要輕、準確，不能亂碰。如吸管不能碰到廢液缸。吸取兩種以上的使用液時要注意更換吸管，防止交叉污染。玻璃器械洗消：一、新的玻璃器皿的洗消：自來水刷洗，除去灰塵。烘干、泡：烤箱中烘干，然后再浸入５％稀中１２小時以除去臟物、鉛、等物。刷洗、烘干：１２小時后立即用自來水沖洗，再用洗滌劑刷洗，自來水沖干凈后用烤箱烘干；泡酸、清洗：用清潔液浸泡１２小時，然后從酸缸內撈出器皿用自來水沖洗１５次，Zui后蒸餾水沖洗３-５次和用雙蒸水過３次。烘干、包裝：洗干凈后先烘干，然后用牛皮紙(油光紙)包裝。GAO壓消毒：包裝HAO的器皿裝入GAO壓鍋內蓋HAO蓋子，打開開關和安全閥，當蒸氣成直線上升時，關閉安全閥，當指針指向１５磅時，維持２０-３０分鐘。GAO壓消毒后烘干。二、舊的玻璃器皿的洗消：刷洗、烘干：使用過的玻璃器皿可直接泡入來蘇爾液或洗滌劑溶液中，泡過來蘇爾溶液(洗滌劑)的器皿要用清水刷洗干凈，然后烘干。泡酸、清洗：烘干后泡入清潔液(酸液)，１２小時后從酸缸內撈出器皿立即用自來水沖洗(避免蛋白質干涸后粘附于玻璃上難以清洗)，再用蒸餾水沖洗３次。烘干、包裝：洗干凈的器皿烘干后取出用牛皮紙(油光紙)等包裝。

細胞傳代方法：消化５分鐘。１：２。４-５天長滿。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

DLD-1:人結直腸腺癌上皮復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長特性：貼壁生長

貼壁細胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，將細胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長，此時細胞生長狀態(tài)良HAO，當補液時，需避免反復吹打。

H-2171細胞類似產品：：H-2030細胞、MO59J細胞、HIT T-15細胞

MOPC細胞類似產品：：HS-294細胞、GM3570細胞、C57 Mouse Tumor 64細胞

WM35細胞類似產品：：A-172細胞、293F細胞、H-2286細胞

CMT64細胞類似產品：：LN382細胞、Ramos(RA1)細胞、LMH細胞

HT-1197細胞類似產品：：766T細胞、GA-10 (Clone 4)細胞、HCT-8/V細胞

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10RGB細胞類似產品：：OCM1A細胞、TKB-1細胞、CEM-T4細胞

SW-948細胞類似產品：：SW 1573細胞、CL-34細胞、SKG-3a細胞

IOSE-80細胞類似產品：：mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞、LO2細胞、H1781細胞

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WM115細胞類似產品：：NE1細胞、SN12PM6細胞、Jurkat FHCRC細胞

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DLD-1:人結直腸腺癌上皮復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

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H-2170細胞類似產品：：WILL-2細胞、Y-79細胞、RN-c細胞

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HSMC細胞類似產品：：NCI-HUT-596細胞、Kasumi-1細胞、NCI-SNU-C2A細胞

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RWPE1細胞類似產品：：Walker-256細胞、mIMCD3細胞、P3-X63-Ag8.653細胞

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A-10細胞類似產品：：Co-115細胞、CF-PAC1細胞、SJ-RH30細胞

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Hs 729T細胞類似產品：：MDA175細胞、3T3-F442A細胞、SW1463細胞

NCIH1915細胞類似產品：：SW260細胞、293細胞、MDA 435細胞

Hs 888.T細胞類似產品：：SPDC-CCL141細胞、LC-MS細胞、TCC-PAN2細胞

DLD-1:人結直腸腺癌上皮復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

WM266mel細胞類似產品：：Hepatoma-22細胞、HEK-293細胞、CEMC1細胞

U 937細胞類似產品：：EAHY-926細胞、N1S1細胞、HBdSMC細胞

U266B1細胞類似產品：：OV433細胞、EO771細胞、OV1063細胞

MV3細胞類似產品：：TE7細胞、IHH-4細胞、RD-2細胞

Hs27F細胞類似產品：：LWnt3A細胞、IPLB-Sf21-AE細胞、HLEpiC細胞

SW 1573細胞類似產品：：Sp 2817細胞、CBRH7919細胞、MDA231細胞

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