"HL-60 Clone 15 Cells(贈送Str鑒定報告)|人急性早幼粒細胞白血病細胞

細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣

解凍細胞常見實驗問題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細胞時，發(fā)現(xiàn)會出現(xiàn)存活率低、大量細胞碎片及生長緩慢等問題，究竟是什么原因導致，我們該怎么進行解決？以下是國內外細胞培養(yǎng)專家針對解凍細胞實驗問題，總結的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過程中細胞裂解，推薦的解決方案：可預期到一定量的細胞死亡，因此細胞的濃度應足夠GAO，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細胞/毫升；２)解凍過程中的問題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應立即開始培養(yǎng)；３)對冷凍液過敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時間供培養(yǎng)物恢復。有時細胞需要幾周時間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時細胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長階段中的位置。冷凍的Zui佳條件在對數(shù)期；４)被冷凍的原種細胞的年齡或冷凍時培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍Zui近冷凍的細胞。細胞處于冷凍狀態(tài)的時間越長，存活率越低。檢查冷凍細胞的時間和方法。在冷凍時細胞應處于對數(shù)期。

細胞生長：懸浮

U-251MG細胞類似產品：：SW1116細胞、EC-GI-10細胞、P 3 HR 1細胞

NCI-H1650細胞類似產品：：P30/0HK細胞、Normal fibroblast-10細胞、SKRC-42細胞

KE37細胞類似產品：：H2107細胞、J111細胞、M14細胞

SK-N-BE-2細胞類似產品：：ID8/MOSEC細胞、BpRc1細胞、SK-CO-1細胞

Hs-852-T細胞類似產品：：U-343MG細胞、H-295R細胞、ACC2細胞

HL-60 Clone 15 Cells(贈送Str鑒定報告)|人急性早幼粒細胞白血病細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

[細胞產品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞培養(yǎng)時分布不均勻，通常操作步驟：做細胞生物學實驗，細胞鋪板大概是我們Zui常見的一個實驗。但有時候鋪得不是很均勻：要么中間密周圍稀，要么周圍密中間禿。下面為大家分享幾點經(jīng)驗。盡量消化細胞分散成單細胞懸液。對于易于消化的細胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶潤洗一遍（25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板），棄掉胰酶，37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右，鏡下觀察是否細胞消化較為分散。如果不夠，延長消化時間。96孔板一般以100微升每孔接種，直接用100微升移液器吸取細胞懸液，沿孔壁（稍離開一點孔底即可，不要離底太GAO）直接接入，移液器不需完全打到Zui大，輕輕按下即可，每鋪完一行換一次槍頭同時輕輕混勻細胞懸液。都加完后蓋上蓋子，左手輕輕扶住板的左邊，右手輕輕敲擊板的右邊緣，注意把握力度（我一般輕巧敲三下），太強或次數(shù)太多會導致細胞集中成堆，將板順時針旋轉（逆時針效果不HAO），依次敲擊剩余三個邊，靜置約5分鐘，放入37度培養(yǎng)箱。6孔板、12孔板或24孔板，可采用將每個孔加入少量無血清培養(yǎng)基，晃動浸潤整個孔底，然后用移液槍吸至第二孔，同樣方法浸潤孔底，其它孔依此類推，這樣整個孔底都是濕潤的，細胞懸液會平鋪在整個孔底，注意加完細胞懸液后要放工作臺靜置一下。這個方法就是有點慢，但操作熟練了也不慢。也可以采用輕拍的方式，但力度沒有96孔板HAO掌握，效果沒有96孔板HAO。培養(yǎng)瓶里面加HAO細胞以后(比如傳代HAO/分HAO細胞以后)，先順時針搖晃3次，馬上逆時針搖晃3次。然后延X軸Y軸分別水平搖動3次。放入CO2培養(yǎng)箱后,平放著培養(yǎng)瓶重復延X軸Y軸分別水平搖動3次。

細胞傳代方法：維持細胞濃度在１×１０５-１×１０６/ml,每２-３天換液１次。

Hs1.Tes細胞類似產品：：hCMEC/D3細胞、UT7細胞、RPTEC/TERT 1細胞

TN5B14細胞類似產品：：MV4;11細胞、SKES-1細胞、F56 [Human neoplasm]細胞

CW2細胞類似產品：：Epstein-Barr-2細胞、MJ細胞、HS 683T細胞

Hs742T細胞類似產品：：Colo741細胞、CEM-C7細胞、SUM190PT細胞

4T1細胞類似產品：：BSC40細胞、T173細胞、SK_HEP1細胞

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

HL-60 Clone 15 Cells(贈送Str鑒定報告)|人急性早幼粒細胞白血病細胞

細胞生長特性：懸浮生長

GBC-SD細胞類似產品：：Alexander細胞、Hx-147細胞、PL5細胞

MADB 106細胞類似產品：：HCT FET細胞、KMS18細胞、KMS18細胞

MB 157細胞類似產品：：UPCI:SCC090細胞、Z-138細胞、Hepatoma 22細胞

MFE280細胞類似產品：：EBC1細胞、MG-63細胞、BaF3細胞

NCI-HUT-596細胞類似產品：：675T細胞、A 253細胞、CWR22Rv1細胞

CA46細胞類似產品：：H-69細胞、C22 (Clara)細胞、Kasumi-6細胞

為什么培養(yǎng)的細胞要及時傳代？體外培養(yǎng)的細胞大多具有生長接觸抑制的性，也就是說當一個細胞被其他細胞包圍的時候，它就會停止生長，及時傳代后，細胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染；試劑保存不當；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細胞濃度；讓細胞逐漸適應新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補加谷酷肢或生長因子等；用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內用完;分離培養(yǎng)物，檢測支原體。冷凍管應如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內大部分融化，別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺操作細胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細胞轉移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預防冷凍管爆裂。

貼壁消化難題：１，先用PBS 把細胞洗兩遍，使瓶內沒有血清了，減少對胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在細胞有些消化下來時，拿著瓶口，運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內液體，這樣細胞很快就下來了，還不需要吹打，分散也均勻；２，成團、絮狀：消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象，血清可以終止胰酶的作用，如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清終止，如果消化液中加入了edta的話，就要將消化液倒干凈，如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話，一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基，加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性Zui強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢)，隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗，則不能棄去胰酶)，加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代，否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片)；消化過度：馬上用培養(yǎng)基中和，用吸管吹打細胞，收集全部的細胞到以無菌的離心管中８００RPM ３分鐘。棄上清，用全培重懸，換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)，狀態(tài)不HAO的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落，在換液的時候可以清除掉！

MTC-TT細胞類似產品：：UMC11細胞、MeWo細胞、HBVSMC細胞

SUDHL-8細胞類似產品：：SK-MEL-1細胞、OCI-Ly18細胞、LS123細胞

PM6細胞類似產品：：H-1694細胞、hEEC細胞、HCT116細胞

LLCPK1細胞類似產品：：SK-NMC細胞、B-CPAP細胞、HBEpiC細胞

BCaP 37細胞類似產品：：LA-N-1細胞、PC615.3細胞、AG06814-N細胞

Super Tube細胞類似產品：：SCCVII/St細胞、COR-L23/P細胞、TE5細胞

HT144細胞類似產品：：PCI-4.2細胞、COLO829細胞、HEK 293-H細胞

MDA157細胞類似產品：：Mink Lung細胞、T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞、UCLA NPA-87-1細胞

MPP89細胞類似產品：：HNEpC細胞、MBdSMC細胞、KS-SLK細胞

GM03569D細胞類似產品：：MSTO-211H細胞、MDA MB 175 VII細胞、HL-60 clone15細胞

HS-729細胞類似產品：：Murine Long bone Osteocyte-Y4細胞、SKNMC細胞、RPMI 6666細胞

NTera 2細胞類似產品：：N1E115細胞、NK62a細胞、NCI-H295細胞

AC16 [Human hybrid]細胞類似產品：：SU86.86細胞、L2細胞、L23/P細胞

LA4細胞類似產品：：293/EBNA-1細胞、NS1細胞、T HEECs細胞

CL-11細胞類似產品：：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細胞、MGH-U3 (RN)細胞、RC13細胞

CORL23細胞類似產品：：DoTc2細胞、Madin Darby Bovine Kidney細胞、RF/6A細胞

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MDA-MB-468細胞類似產品：：V79-4細胞、H82細胞、Ra No. 1細胞

Ly1細胞類似產品：：Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細胞、Sp2/0細胞、NCIH847細胞

OVCA 432細胞類似產品：：YES2細胞、NT-2細胞、HOC細胞

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D10G41細胞類似產品：：SUM-102細胞、AR4IP細胞、bEnd3細胞

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Me-Wo細胞類似產品：：CEM細胞、HO1-N-1細胞、SW837細胞

451Lu細胞類似產品：：NS1-1 Ag4.1細胞、RPMI No. 1846細胞、HCa/16A3-F細胞

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LM6細胞類似產品：：NFS 60細胞、NCI-H735細胞、P30-OHKUBO細胞

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SCaBER細胞類似產品：：QGY7703細胞、RGC6細胞、L 428細胞

PANC 203細胞類似產品：：TE4細胞、WEHI-3細胞、L-WRN細胞

HS-766T細胞類似產品：：SW-1353細胞、NCI-H2085細胞、C32r細胞

WTRL1細胞類似產品：：AAV-293細胞、H-920細胞、DanG細胞

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HEK-293 c18細胞類似產品：：brain-derived Endothelial cells.3細胞、Caki2細胞、GES-1細胞

DMS114細胞類似產品：：LL/2細胞、Nb 2細胞、HCC-9204細胞

Douglas Foster-1細胞類似產品：：NCI-H2227細胞、APRE-19細胞、NIH:OVCAR-3細胞

SupT1細胞類似產品：：HB611細胞、HCC1171細胞、H4-IIE-C3細胞

Madin Darby Bovine Kidney細胞類似產品：：LU65細胞、JB6 [Mouse]細胞、H1623細胞

Tca8113細胞類似產品：：Hs 695T細胞、SUDHL-5細胞、Tu-212細胞

T84細胞類似產品：：A-2780細胞、KU 812細胞、GTL16細胞

Bovine ENDometrial cells細胞類似產品：：N9細胞、MDA-MB-134-VI細胞、CF Pac1細胞

NCIH1105細胞類似產品：：ST 486細胞、CT26.WT細胞、H-1299細胞

16HBEo-細胞類似產品：：NCIH3255細胞、MH7A細胞、aNK細胞

HOS TE 85細胞類似產品：：293AD細胞、LI7細胞、MOVAS-1細胞

143BTK-細胞類似產品：：H9細胞、NCIH1770細胞、HCEC細胞

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PE/CA-PJ34 (clone C12)細胞類似產品：：MOLT 4細胞、Swiss-3T3細胞、H-2087細胞

HLCL9B10細胞類似產品：：HCC1599細胞、8402細胞、BSC40細胞

U-118-MG細胞類似產品：：KP4細胞、Hs611T細胞、NB-9細胞

NK62a細胞類似產品：：OV-1063細胞、ZYM-SVEC01細胞、PG-LH7細胞

NCI-H716細胞類似產品：：GM 637細胞、NT2-D1細胞、PK13細胞

ARH 77細胞類似產品：：UMUC-14細胞、MDA-453細胞、HET1A細胞

Neukoplast細胞類似產品：：HKF細胞、Laboratory of Allergic Diseases 2細胞、TOV21G細胞

A-875細胞類似產品：：OVCA-433細胞、Helacyton gartleri細胞、MIA Paca2細胞

DR2R 1610細胞類似產品：：GNM細胞、DLD 1細胞、Panc2_03細胞

CAL-39細胞類似產品：：B16 subline B78細胞、EA.hy 926細胞、MC-3T3-E1細胞

C-Lu-65細胞類似產品：：CMT-167細胞、AU565細胞、RH7777細胞

B16F0細胞類似產品：：HEK-293-FT細胞、NCI H2106細胞、MLA144細胞

VP303細胞類似產品：：Huh-7細胞、COLO 205細胞、MOLP-8細胞

RAT2細胞類似產品：：Rat 2細胞、Walker256細胞、P31 FUJ細胞

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NCIH1930細胞類似產品：：Hs888Lu細胞、LLC1細胞、NCI-H676細胞

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BE(2)C細胞類似產品：：SUM 149PT細胞、NT2/D1細胞、BALB/c 3T3 clone A31細胞

A-2058細胞類似產品：：U-2-OS細胞、MC-3T3細胞、PK15細胞

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SACC83細胞類似產品：：BMSCs（mBMSCs）細胞、MLMA細胞、SF17細胞

HO-8910細胞類似產品：：H2081細胞、LA-795細胞、SUM159PT細胞

MODE-K細胞類似產品：：RC-4B細胞、GM03190A細胞、H-69細胞

GFP-Olig2細胞類似產品：：hTERT-RPE細胞、AML 12細胞、NCIH1618細胞

L428細胞類似產品：：Roswell Park Memorial Institute 2650細胞、MCF-7/AdrR細胞、H82細胞

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WM-239-A細胞類似產品：：Daudi細胞、Jurkat (clone E6-1)細胞、MKN-28細胞

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P30/OHK細胞類似產品：：WSU-HN13細胞、LCD細胞、PAEC細胞

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HL-60 Clone 15 Cells(贈送Str鑒定報告)|人急性早幼粒細胞白血病細胞

MPP 89細胞類似產品：：KY180細胞、Sp 2/0-Ag 14細胞、INS1細胞

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