"PG-4 (S+L-) Cells(贈送Str鑒定報告)|貓星形腦膠質細胞
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
【細胞培養(yǎng)中原蟲的污染情況總結】原蟲:培養(yǎng)液可輕微渾濁,顯微鏡下那些細小的點狀物數(shù)量非常多,輕微活動,細胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢,而且細胞狀態(tài)不HAO,邊緣不清楚,細胞不透亮。他們與細胞可共生但會與細胞爭奪營養(yǎng)。這種共生是非常普遍的,但他們的數(shù)量小,細胞站YOU勢所以不會影響到細胞的正常生長,只有當他們到達一定的數(shù)量時就會影響到細胞的生長,Zui終形成惡性循環(huán)。污染的可能原因:可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題、環(huán)境問題等等關于培養(yǎng)基的無菌狀況,取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中(不加細胞),37度試培養(yǎng)一段時間后觀察。如果沒有細菌生長就是操作的問題。也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗(酸鏈霉素和芐青霉素)。但雙抗有時會影響細胞的狀態(tài),所以在做轉染、檢測細胞某項指標前一定要撤去雙抗,以避免影響實驗結果。1)孵箱應定期用三氧機消毒或者紫外光照射,并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時孵箱內的水應是三蒸水;2)超凈臺\取材\器材\培養(yǎng)液\培養(yǎng)瓶\操作等因素;3)超凈臺的風機不能過大,風機到6-8格。否則也可能能致霉菌污染;4)無菌室經甲醛熏蒸消毒后,可用同等量的噴灑中和,約幾小時即可進入操作。
細胞生長:貼壁
Transformed Human Liver Epithelial-2細胞類似產品::OKT3細胞、MOLM-13細胞、RAW264細胞
SV40 MES 13細胞類似產品::DITNC1細胞、OCI-Ly 10細胞、HCC-95細胞
NTERA-2細胞類似產品::TCMK1細胞、FD-LSC-1細胞、NCI-H378細胞
EoL-1-cell細胞類似產品::BRL細胞、H-1048細胞、SPCA-1細胞
HCC-1395細胞類似產品::SCaBER細胞、MOLP8細胞、HO1-N1細胞
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細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
[細胞產品包裝]鮮活細胞:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞:1ml凍存管(兩支)
預防細胞污染的注意事項:實驗進行前,超凈臺用紫外燈照射30-60min,然后用75%酒精擦拭超凈臺臺面,并開啟超凈臺風扇運轉10min左右再開始實驗操作。實驗用品用75%酒精擦拭后才能放入超凈臺內;實驗用品用完應移出超凈臺,以利于氣流的流通。實驗完成后用75%酒精擦拭超凈臺臺面。每次操作只處理一種細胞;即使不同細胞使用相同的培養(yǎng)基也不要共享同一瓶培養(yǎng)基,避免細胞間的交叉污染。操作時小心取用無菌的物品,避免污染。勿碰觸吸管尖頭,不小心碰觸后應立即更換;不要在打開的容器瓶口正上方操作,容器打開后,傾斜45°操作,操作完成后及時蓋上瓶蓋。CO2培養(yǎng)箱的清潔是較易被忽視的地方,應1-2個月對培養(yǎng)箱定期進行清潔消毒。先用75%酒精擦拭培養(yǎng)箱內壁、隔板、水盤2-3次,用雙蒸水清洗,再用酒精棉球擦拭一遍,后紫外燈照射4h以上。水盤內加入無菌水(應每周更換),待培養(yǎng)箱內溫度、濕度、CO2濃度穩(wěn)定后再放入細胞。定期清洗或更換超凈臺過濾膜、預濾網。
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
MDAMB-231細胞類似產品::KTCTL140細胞、SUM 149PT細胞、PC3-M細胞
MN 60細胞類似產品::NCI-H719細胞、639-V細胞、MZCRC1細胞
MV-3細胞類似產品::H1672細胞、Caco-2/BBe細胞、TGBC-11-TKB細胞
NCI747細胞類似產品::N87細胞、KYSE0520細胞、NCI-H735細胞
CV-1細胞類似產品::CCD 1112SK細胞、HCPEpiC細胞、WiDrTC細胞
細胞來源說明:來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫
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細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
OC-3-VGH細胞類似產品::SUDHL-6細胞、PJ34細胞、SUD-4細胞
SK-RC 42細胞類似產品::SW 13細胞、Hs 870.T細胞、USMC細胞
SNU368細胞類似產品::NB-4細胞、GM02219細胞、Detroit562細胞
PL45細胞類似產品::4T1細胞、NHDF細胞、Centre Antoine Lacassagne-12T細胞
COV362細胞類似產品::SKMEL-1細胞、L5178YR細胞、P30 OHK細胞
A7r5細胞類似產品::SKCol1細胞、HuH6細胞、NCI-H64細胞
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結:1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或GAO過20%,因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足,過GAO則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質不佳。血清使用錯誤或血清的品質不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
細胞凍存復蘇材料與方法步驟:常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時要注意以下幾點:(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個月充氮一次。液氮溫度達-196℃,使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結構,中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應防止焊接部裂開。(3)在裝入液氮時,要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或制漏斗作引導,使液氮直達瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更HAO。若為初次使用,加液氮時更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(121°C蒸氣GAO壓消毒),2mL安瓿(或專用細胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天ZuiHAO換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細胞分裝于安瓿或專用冷凍塑料管中,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標記HAO細胞名稱和凍存日期,同時作HAO登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝HAO細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內;置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時,再移至冰箱冷凍室內3~4小時,再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時,Zui后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,ZuiHAO取出一只安瓿細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
HTh 74細胞類似產品::MDA-MB-415細胞、GM00637細胞、IOSE-Mar細胞
SACC-LM細胞類似產品::HIEC6細胞、HCC-1187細胞、Tu-177細胞
A2780CP70細胞類似產品::P3 NS1 Ag4/1細胞、THLE2細胞、B16 melanoma細胞
JKT1細胞類似產品::Hi-5細胞、PC3M-1E8細胞、CAL 120細胞
HT-115細胞類似產品::32D.3細胞、HSMC細胞、A-172 MG細胞
ARPE-19細胞類似產品::CoCL3細胞、TMK-1細胞、MDA 1386細胞
NCI-H1993細胞類似產品::PTK 1細胞、HuH-6細胞、P3/NS1/Ag4-1細胞
HEL-92-1-7細胞類似產品::HCC-70細胞、Panc-3_27細胞、BNL.1ME A.7R.1細胞
NCIH2286細胞類似產品::IHH-4細胞、Roswell Park Memorial Institute 8402細胞、HCT/Taxo1細胞
Central Adrenergic TH-expressing a細胞類似產品::MPC-11細胞、H-128細胞、LAPC4細胞
H9c2(2-1)細胞類似產品::MFE296細胞、PLCPRF5細胞、HCC0044細胞
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H-1522細胞類似產品::KNS-42細胞、CAL-78細胞、Hs 766.T細胞
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Danio rerio Gill細胞類似產品::SKG-3a細胞、343MG細胞、FHs74Int細胞
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CEM C7細胞類似產品::NPC-TW 039細胞、A2008細胞、BeWo細胞
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HEK 293FT細胞類似產品::CBRH7919細胞、HBE細胞、IAR 20細胞
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XuanWei Lung Cancer-05細胞類似產品::GM 2132細胞、MFE 280細胞、R D細胞
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GTL16細胞類似產品::NCI-H1184細胞、H-1341細胞、MBVP細胞
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PK(15)細胞類似產品::SW403細胞、TPC1細胞、Colo699細胞
OC316細胞類似產品::COLO320HSR細胞、8505C細胞、FL 62891細胞
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Caki2細胞類似產品::LM2-4175細胞、Detroit 562細胞、X63-Ag8.653細胞
HL-60 Clone 15細胞類似產品::HHUA細胞、Roswell Park Memorial Institute 7666細胞、TE-6細胞
MES-SA/Dx5細胞類似產品::Glioma-261細胞、B16-F1細胞、HANK1細胞
COR-L279細胞類似產品::NS1細胞、Caov-4細胞、HCC0015細胞
M14-MEL細胞類似產品::MDA-MB 361細胞、SW982細胞、CCD-966SK細胞
Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞類似產品::U-87 MG細胞、LAN-1細胞、MeT 5A細胞
NCI-H748細胞類似產品::ARH 77細胞、Embryonic Bovine Tracheal cells細胞、COR-L26細胞
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H211細胞類似產品::UCLA-SO-M21細胞、HCa/16A3-F細胞、HGE細胞
TCCSUP細胞類似產品::DiFi細胞、FOX-NY細胞、KYSE-70細胞
PG-4 (S+L-) Cells(贈送Str鑒定報告)|貓星形腦膠質細胞
SK N SH細胞類似產品::MDCC MSB1細胞、Hopkins-92細胞、H-1341細胞
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OSC-19細胞類似產品::BE2_C細胞、MDA 1386細胞、CL 1-0細胞
BpRc1細胞類似產品::hTERT-HME1細胞、H1048細胞、IM-9細胞
SKGT2細胞類似產品::Hs 895 T細胞、SK LU 1細胞、TE 32細胞
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上海冠導生物工程有限公司,先后從ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、PromoCell、ScienCell、JCRB等國內外細胞庫引進細胞2000余株。以此為契機,公司組建了冠導細胞庫,我司細胞均由資深細胞培養(yǎng)工程師進行培養(yǎng)。我司可以提供的細胞有:①細胞系②原代細胞③穩(wěn)轉株④耐藥株⑤標記細胞⑥細胞配套試劑等。