"AC29 Cells(贈送Str鑒定報告)|小鼠惡性間皮瘤細胞

細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

【細胞培養(yǎng)中細菌、霉菌的污染情況總結】細菌：細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀，根據(jù)感染細菌的不同，可有不同的外形，培養(yǎng)液一般會渾濁變黃，對細胞生長影響明顯。仔細檢查一下器皿的滅菌情況，是否在GAO壓滅菌時放氣時間足夠，壓力足夠！尤其是和儲存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品，連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲存液污染，一定要注意！下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象！可在培養(yǎng)液中加相應的抗生素處理；霉菌：培養(yǎng)液是清亮的，倒置顯微鏡下無雜質，３７度孵箱培養(yǎng)２-３天，仍清亮，但出現(xiàn)絮狀雜質，鏡下可見呈細絲狀的團狀漂浮物，可看到明顯的菌絲，細胞仍可生長，但時間長之后，細胞的活力狀態(tài)變差，用酸銅溶液擦拭CO２孵箱內，再把水盤里也加上飽和量的酸銅。或者在培養(yǎng)箱的托盤加入飽和的消毒二鈉GAO鹽液體,可以防止霉菌污染。CO２孵箱被霉菌污染后，可把所有細胞暫時轉移，采用擦洗孵箱(包括隔板，箱壁)。并把放置在孵箱內一個小時，使其蒸汽彌漫。待的氣味消散后，再移入細胞。孵箱應定期清潔(２月左右)，尤其在多雨的季節(jié)。其它培養(yǎng)箱清洗方法是：用８４液擦洗－清水擦洗－７５%酒精擦洗－紫外燈照。預防霉菌污染，可在培養(yǎng)基里加３u/ml的兩性霉素或制霉菌素或D或雙抗；但細胞一旦污染，很難挽救，制霉菌素或D或雙抗都于事無補，建議舍棄該污染細胞，將環(huán)境徹底消毒，如果所有細胞都污染，可能是系統(tǒng)污染，檢查一下培養(yǎng)基和器材，如果只是個別污染，可能是操作問題，就要注意操作。

細胞生長：貼壁

Panc-02細胞類似產品：：UM-UC3細胞、LC-2 ad細胞、MARC-145細胞

U251細胞類似產品：：Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞、H-2444細胞、B16-F10-BL6細胞

HEK 293T/17細胞類似產品：：SKML-28細胞、FHs 74 Int細胞、BHT-101細胞

U251-MG細胞類似產品：：Leukemia L1210細胞、DMS-153細胞、CCD33Co細胞

RPMI no. 8226細胞類似產品：：BHT-101細胞、G292細胞、Rat Basophilic Leukemia-1細胞

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細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

[細胞產品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

懸浮細胞不容易轉染：懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細胞。在實驗室經常會遇到懸浮細胞的轉染，其和貼壁細胞轉染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質體類的轉染試劑，脂質體轉染是基于電荷吸引原理，先形成脂質體-DNA復合物，散布在細胞周圍，然后通過細胞的內吞作用，將目的基因導入細胞內，而脂質體復合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞GAO出很多倍，所以，脂質體轉染時懸浮細胞的轉染效率要明顯低于貼壁細胞。其次，脂質體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細胞的轉染更為困難了。另外，懸浮細胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細胞轉染造成了一定的困難。為了提GAO懸浮細胞的轉染效率，可以使用非脂質體的轉染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉染方法，針對懸浮細胞等難轉染細胞還是挺不錯的，電擊對細胞有一定的損傷，ZuiHAO選用具有細胞膜修復功能的電轉染試劑，可以將電擊對細胞的傷害降到Zui低，懸浮細胞不易轉染，選對試劑及良HAO的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關鍵。

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

C4-I細胞類似產品：：BpRc1細胞、D-341 Med細胞、Hs 888.Lu細胞

Hs819.T細胞類似產品：：SKO-007細胞、H-524細胞、NCIH2073細胞

OCI/AML-4細胞類似產品：：IGR.OV1細胞、PTK 2細胞、COLO 16細胞

X63-Ag 8.6.5.3細胞類似產品：：MX1細胞、FRH-0201細胞、H-1581細胞

D341MD細胞類似產品：：SHI-1細胞、Verda reno細胞、COLO-320-HSR細胞

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

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細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分

PE/CA-PJ-34細胞類似產品：：SK-OV-433細胞、SUM52細胞、S-16細胞

NCI-H2087細胞類似產品：：SW962細胞、2B4細胞、KYSE30細胞

NCI-H841細胞類似產品：：BNL.1ME A.7R.1細胞、NOZAWA細胞、Colo16細胞

HPAF-II/CD18細胞類似產品：：MSC細胞、GM-346細胞、SUP-B15細胞

RIN14B細胞類似產品：：CFSC-8B細胞、SCC-15細胞、LC-1-sq細胞

Dysplastic Oral Keratinocyte細胞類似產品：：ACC2細胞、SK-RC-42細胞、SKMEL1細胞

細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間，通?？刂圃冢?２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散；３)取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細胞密度達到８０%以后重復１項操作或者凍存；別注意：(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細胞后請盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間Zui長不宜超過７２小時)；２)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化，請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請YOU先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做HAO照片記錄并聯(lián)系實驗室。

細胞凍存復蘇材料與方法步驟：常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時要注意以下幾點：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個月充氮一次。液氮溫度達-１９６℃，使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結構，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或制漏斗作引導，使液氮直達瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更HAO。若為初次使用，加液氮時更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(１２１°C蒸氣GAO壓消毒)，２mL安瓿(或專用細胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天ZuiHAO換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細胞分裝于安瓿或專用冷凍塑料管中，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標記HAO細胞名稱和凍存日期，同時作HAO登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝HAO細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內;置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時，再移至冰箱冷凍室內３～４小時，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時，Zui后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，ZuiHAO取出一只安瓿細胞復蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。

Microbiological Associates-104細胞類似產品：：HR1K細胞、KG-1a細胞、LN 382細胞

H-1770細胞類似產品：：RSC 96細胞、Fetal Human Lens-124細胞、PLC/PRF/5細胞

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SUDHL-16細胞類似產品：：F-81細胞、Porcine Kidney-13細胞、NCIH1781細胞

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AC29 Cells(贈送Str鑒定報告)|小鼠惡性間皮瘤細胞

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NCI-H226細胞類似產品：：Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞、H820細胞、RA細胞

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RS4-11細胞類似產品：：H1688細胞、H-292細胞、C-643細胞

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NK92細胞類似產品：：HSC5細胞、PC-9/S1細胞、N1S1細胞

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BHK 21細胞類似產品：：NBL-1細胞、LLC細胞、HUVEC細胞

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HEp-2細胞類似產品：：Jurkat-E6細胞、HCC38細胞、beta TC6細胞

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OVCA432_Bast細胞類似產品：：NCI-A549細胞、130-T細胞、SW-1271細胞

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T-47D細胞類似產品：：149 PT細胞、HT115細胞、BCaP-37細胞

Hs940-T細胞類似產品：：NCI-H2228細胞、SNU-886細胞、DMS 79細胞

LP-1細胞類似產品：：KYSE520細胞、Colon26細胞、HIBEC細胞

H1184細胞類似產品：：OV-CA 432細胞、KCL22S細胞、YAC細胞

Renal Carcinoma細胞類似產品：：LNCaP subline C4-2細胞、H9c2細胞、Hs 888.T細胞

Karpas422細胞類似產品：：CAL 12細胞、Hepa 1-6細胞、W133細胞

KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150

細胞類似產品：：NCIH1299細胞、SUP-B15細胞、C6細胞

SKMEL3細胞類似產品：：H146細胞、NCI-ADR-RES細胞、COV434細胞

HepG2/C3A細胞類似產品：：SUM-102PT細胞、HUCCT1細胞、LS411細胞

NCI-H1105細胞類似產品：：NCI-H1694細胞、RKO-E6細胞、Sup T-1細胞

P-3J細胞類似產品：：TE14細胞、NCI-H1944細胞、VMCUB-1細胞

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Merwin Plasma Cell tumor-11細胞類似產品：：PAI細胞、SUM 190細胞、MCF12A細胞

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SGC 7901細胞類似產品：：U-2932細胞、UK Pan-1細胞、P30/0HK細胞

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