"IPEC-1 Cells(贈送Str鑒定報告)|豬小腸上皮細胞

細胞背景資料：小腸；上皮細胞；自發(fā)永生

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

體內細胞培養(yǎng)及其操作步驟：【瘤細胞懸液接種】１)無菌選取生長良HAO(有光澤，淡紅色)瘤組織或對數(shù)生長期培養(yǎng)瘤細胞；２)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨，經８０～１００目篩網過濾成細胞懸液；３)培養(yǎng)細胞應用PBS洗兩遍；４)計數(shù)并調整細胞濃度至１０７～１０８／ml；５)常規(guī)消毒后，于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細胞懸液(０.１ml／部位，＞１０６細胞)。初次接種成功率低，細胞數(shù)盡可能多一些；６)次日注意觀察動物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期，以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短，Zui后固定為一個相對穩(wěn)定的時間?！靖顾龅慕⑴c腹水瘤的接種】將實體瘤細胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤細胞，將這種腹水反復傳代，即可成為腹水瘤。初次傳代時，腹水常呈血性(含大量紅細胞)，反復傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下。１)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細胞離心和洗滌，進行細胞計數(shù)；２)消毒動物，左下腹穿刺接種１０６腹水瘤細胞；３)接種腹水瘤細胞后約７~１２d，待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９號針頭抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水經３０００rpm離心１５min，收集上清，分裝凍存?zhèn)溆谩?/p>

細胞生長：貼壁

MeWo細胞類似產品：：OCI-Ly3細胞、HBVSMC細胞、OPM-2細胞

Walker/LLC-WRC256細胞類似產品：：INS1-E細胞、CL1-0細胞、Vero 76 clone E-6細胞

L132細胞類似產品：：SW 579細胞、UCLA SO M14細胞、SK-LMS-1細胞

E304細胞類似產品：：SR-786細胞、3LL細胞、U138細胞

L5178Y-R細胞類似產品：：mIMCD3細胞、RT-BM細胞、HK2細胞

IPEC-1 Cells(贈送Str鑒定報告)|豬小腸上皮細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

[細胞產品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

預防細胞污染的注意事項：實驗進行前，超凈臺用紫外燈照射30-60min，然后用75%酒精擦拭超凈臺臺面，并開啟超凈臺風扇運轉10min左右再開始實驗操作。實驗用品用75%酒精擦拭后才能放入超凈臺內；實驗用品用完應移出超凈臺，以利于氣流的流通。實驗完成后用75%酒精擦拭超凈臺臺面。每次操作只處理一種細胞；即使不同細胞使用相同的培養(yǎng)基也不要共享同一瓶培養(yǎng)基，避免細胞間的交叉污染。操作時小心取用無菌的物品，避免污染。勿碰觸吸管尖頭，不小心碰觸后應立即更換；不要在打開的容器瓶口正上方操作，容器打開后，傾斜45°操作，操作完成后及時蓋上瓶蓋。CO2培養(yǎng)箱的清潔是較易被忽視的地方，應1-2個月對培養(yǎng)箱定期進行清潔消毒。先用75%酒精擦拭培養(yǎng)箱內壁、隔板、水盤2-3次，用雙蒸水清洗，再用酒精棉球擦拭一遍，后紫外燈照射4h以上。水盤內加入無菌水（應每周更換），待培養(yǎng)箱內溫度、濕度、CO2濃度穩(wěn)定后再放入細胞。定期清洗或更換超凈臺過濾膜、預濾網。

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

HEK293E細胞類似產品：：RPMI-7951細胞、H920細胞、Tn-5B1-4細胞

Emory University-3細胞類似產品：：NCI747細胞、CHP100細胞、Capan-2細胞

P30/Ohkubo細胞類似產品：：OVCAR 433細胞、SUM 149細胞、CEM T4細胞

HOSEpiC細胞類似產品：：Toledo細胞、Hs-27細胞、P-36細胞

SNU407細胞類似產品：：NCI-BL6細胞、SNU251細胞、OVCAR.4細胞

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

IPEC-1 Cells(贈送Str鑒定報告)|豬小腸上皮細胞

細胞生長特性：貼壁

HT 1080.T細胞類似產品：：SK-Hep1細胞、HANK細胞、HFL細胞

SNU5細胞類似產品：：NCI-SNU-C2B細胞、Hela-Ap-1細胞、HEK 293-EBNA細胞

Lewis lung carcinoma line 1細胞類似產品：：MDA157細胞、IPEC-1細胞、SNU119細胞

Jurkat (clone E6-1)細胞類似產品：：SW756細胞、CEM-CCRF (CAMR)細胞、MOLT-16細胞

RBMEC細胞類似產品：：mRTEC細胞、Hs 729細胞、Ramos(RA1)細胞

0V-1063細胞類似產品：：A2780S細胞、QGY 7701細胞、JB 6細胞

造成實驗室細胞污染常見情況總結：細胞培養(yǎng)中Zui常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染，大多數(shù)較難處理。那么，哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢？我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結下?！具`規(guī)操作】１)為節(jié)省時間，有人已經用超凈臺四個多小時，不開紫外滅菌３０min,酒精擦拭后直接開始試驗；２)器材或者溶液很久沒用，未檢測是否污染而直接使用；離心管多次使用，槍頭為了方便交叉使用；３)超凈臺不點酒精燈；點了酒精燈放在右上角，而你在左下角做試驗；４)不帶手套，徒手操作；５)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術器械、離心機、冰箱等專用儀器設備以及專用的實驗服和拖鞋，未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具，如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需１２１°CGAO壓滅菌２０分鐘后３７％烤干備用)。超凈臺和桌面，東西太多太亂：超凈臺不是儲物箱，什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺！這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面，切忌東西堆積如山，不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞！一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里，細胞就會養(yǎng)的不HAO，啥時候死了都不知道！【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了，并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了，首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染，如果有而且HAO幾個板子都有類似的污染塊，那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了，得給培養(yǎng)箱做個大掃除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水沒了要記得加，還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?！緜鞔毎硕嗫陔s，難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求GAO，人多了，不確定因素多了，難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室，實驗服當風衣穿，不扣紐扣，不戴，就容易造成細胞污染；超凈臺做實驗時，喜歡說話聊著做試驗，要是還不帶口罩，里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢！

貼壁消化難題：１，先用PBS 把細胞洗兩遍，使瓶內沒有血清了，減少對胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在細胞有些消化下來時，拿著瓶口，運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內液體，這樣細胞很快就下來了，還不需要吹打，分散也均勻；２，成團、絮狀：消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象，血清可以終止胰酶的作用，如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清終止，如果消化液中加入了edta的話，就要將消化液倒干凈，如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話，一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基，加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性Zui強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢)，隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗，則不能棄去胰酶)，加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代，否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片)；消化過度：馬上用培養(yǎng)基中和，用吸管吹打細胞，收集全部的細胞到以無菌的離心管中８００RPM ３分鐘。棄上清，用全培重懸，換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)，狀態(tài)不HAO的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落，在換液的時候可以清除掉！

OVCA 432細胞類似產品：：YES2細胞、NT-2細胞、HOC細胞

HN4細胞類似產品：：LA4細胞、MDA361細胞、H-1618細胞

MV-4-11細胞類似產品：：OCILY-3細胞、SPC-A1細胞、UACC-893細胞

NCIH2081細胞類似產品：：74Int細胞、HPAFII細胞、Homo sapiens No. 578, breast cells細胞

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HS-294-T細胞類似產品：：HSAEC1-KT細胞、TC-1[JHU-1]細胞、TALL1細胞

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SW780細胞類似產品：：TOV-21G細胞、EB3 [Human Burkitt lymphoma]細胞、Vero E6細胞

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SW-403細胞類似產品：：TF-1a細胞、HSC5細胞、Lewis-Lung細胞

SK UT 1細胞類似產品：：SNU216細胞、HD11細胞、MN60細胞

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MeT 5A細胞類似產品：：SW1783細胞、IPI-2I細胞、Panc 02.03細胞

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SF 767細胞類似產品：：TSUpr1細胞、ESC細胞、PE/CA-PJ-34細胞

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Plaepi 34細胞類似產品：：MDA PCa 2b細胞、NBL_S細胞、CA922細胞

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SSP-25細胞類似產品：：NIH 3T3細胞、MDCK細胞、MCF10-A細胞

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IPEC-1 Cells(贈送Str鑒定報告)|豬小腸上皮細胞

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