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IU1

IU1是一種細(xì)胞滲透性的，可逆的proteasome（蛋白酶體）選擇性抑制劑，作用于USP14時(shí)，IC50為4.7 μ M，作用于IsoT時(shí) 選擇性高25倍。IU1可誘導(dǎo)自噬。

IU1 Chemical Structure

IU1 Chemical Structure

CAS: 314245-33-5

規(guī)格 價(jià)格 庫存 購買數(shù)量
10mM (1mL in DMSO) 1285.83 現(xiàn)貨
10mg 1188.81 現(xiàn)貨
50mg 4683.08 現(xiàn)貨
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IU1相關(guān)產(chǎn)品

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DUB Signaling Pathways

DUB信號通路圖

細(xì)胞實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)示例

細(xì)胞系 實(shí)驗(yàn)類型 給藥濃度 孵育時(shí)間 活性描述 文獻(xiàn)信息
HEK293T Function assay 30 uM 2 hrs Inhibition of deubiquitinase in HEK293T cells expressing N-terminal HA-tagged ubiquitin assessed as stabilization of HMW-Ub proteins at 30 uM after 2 hrs by Western blot analysis 30528168
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生物活性

產(chǎn)品描述 IU1是一種細(xì)胞滲透性的，可逆的proteasome（蛋白酶體）選擇性抑制劑，作用于USP14時(shí)，IC50為4.7 μ M，作用于IsoT時(shí) 選擇性高25倍。IU1可誘導(dǎo)自噬。
靶點(diǎn)
USP14 [1]
(cell-free assay)
4.7 μM
體外研究(In Vitro)
體外研究活性 IU1特異性結(jié)合到USP14的活性形式。IU1抑制USP14，通過抑制其對接到蛋白酶體上，而對8種其他DUBs, IsoT, UCH37, BAP1, UCH-L1, UCH-L3, USP15, USP2, USP7很少或根本沒有抑制活性。加入IU1，快速抑制USP14，移除后，抑制迅速得到逆轉(zhuǎn)。IU1抑制USP14誘導(dǎo)的鏈修飾，且降低Ub-CCNB類型的電泳遷移率。在有USP14存在時(shí)，IU1增強(qiáng)蛋白酶體的Ub-CCNB降解。在蛋白毒性機(jī)制研究中，IU1促進(jìn)tau的退化，且降低TDP-43, ATXN3，和膠質(zhì)纖維酸性蛋白（GFAP）。[1]
激酶實(shí)驗(yàn) 高通量篩選
使用ICCB-Longwood 篩選設(shè)施進(jìn)行篩選。使用Wellmate實(shí)驗(yàn)板分配器將10 μL重組USP14蛋白按一式兩份分配到384孔低體積板的各孔中。使用Seiko pin轉(zhuǎn)移自動系統(tǒng)將33.3?nL化合物從庫中轉(zhuǎn)移到孔中，然后預(yù)溫育約30分鐘。實(shí)驗(yàn)中每塊板的最后兩列用于陽性和陰性對照。使用Wellmate分配器將10?μL VS-蛋白酶 加 Ub-AMC混合物加到各孔中，啟動酶反應(yīng)。樣品再溫育45分鐘。使用Envision酶標(biāo)儀在Ex355/Em460測量Ub-AMC水解。USP14, VS-蛋白酶和 Ub-AMC 的終濃度分別為 15?nM, 1?nM 和 0.8 μM。實(shí)驗(yàn)化合物的終濃度約為17?μM。酶和底物在Ub-AMC實(shí)驗(yàn)緩沖液（50?mM Tris-HCl(pH?7.5), 1?mM EDTA, 1?mM ATP, 5 mM MgCl2, 1?mM DTT, 和 1 mg/Ml 卵清蛋白）中制備。
細(xì)胞實(shí)驗(yàn) 細(xì)胞系 MEF細(xì)胞
濃度 ~1.5 mM
孵育時(shí)間 48小時(shí)
方法 MTT法

化學(xué)信息&溶解度

分子量 300.37 分子式

C18H21FN2O
CAS號 314245-33-5 SDF Download IU1 SDF
Smiles CC1=CC(=C(N1C2=CC=C(C=C2)F)C)C(=O)CN3CCCC3
儲存條件(自收到貨起)

體外溶解度
批次：

DMSO : 60 mg/mL ( (199.75 mM) ；DMSO吸濕會降低化合物溶解度，請使用新開封DMSO)

Ethanol : 60 mg/mL (199.75 mM)

Water : Insoluble

摩爾濃度計(jì)算器

體內(nèi)溶解度
批次：

現(xiàn)配現(xiàn)用，請按從左到右的順序依次添加，澄清后再加入下一溶劑

 動物體內(nèi)配方計(jì)算器

實(shí)驗(yàn)計(jì)算

摩爾濃度計(jì)算器

質(zhì)量 濃度 體積 分子量

動物體內(nèi)配方計(jì)算器（澄清溶液）

第一步：請輸入基本實(shí)驗(yàn)信息（考慮到實(shí)驗(yàn)過程中的損耗，建議多配一只動物的藥量）

mg/kg g μL 只

第二步：請輸入動物體內(nèi)配方組成（配方適用于不溶于水的藥物；不同批次藥物配方比例不同，請聯(lián)系Selleck為您提供正確的澄清溶液配方）

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

計(jì)算結(jié)果：

工作液濃度： mg/ml；

DMSO母液配制方法： mg 藥物溶于μL DMSO溶液（母液濃度mg/mL，注：如該濃度超過該批次藥物DMSO溶解度，請先聯(lián)系Selleck）；

體內(nèi)配方配制方法：取μL DMSO母液，加入μL PEG300，混勻澄清后加入μL Tween 80，混勻澄清后加入μL ddH2O，混勻澄清。

體內(nèi)配方配制方法：取μL DMSO母液，加入μL Corn oil，混勻澄清。

注意：1. 首先保證母液是澄清的；
2.一定要按照順序依次將溶劑加入，進(jìn)行下一步操作之前必須保證上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用渦旋、超聲或水浴加熱等物理方法助溶。

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