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GW9662

GW9662是一種選擇性PPAR拮抗劑,作用于PPARγ,無細胞試驗中IC50為3.3 nM,在細胞中作用于PPARγ比作用于PPARα和PPARδ的功能選擇性強10到600倍。

GW9662 Chemical Structure

GW9662 Chemical Structure

CAS: 22978-25-2

規(guī)格 價格 庫存 購買數(shù)量
10mM (1mL in DMSO) 1552.19 現(xiàn)貨
10mg 1178.47 現(xiàn)貨
50mg 2544.66 現(xiàn)貨
1g 7944.3 現(xiàn)貨
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細胞實驗數(shù)據(jù)示例

細胞系 實驗類型 給藥濃度 孵育時間 活性描述 文獻信息
293H Function assay 30 mins Antagonist activity at human PPARgamma expressed in 293H cells assessed as reduction in transcriptional response preincubated for 30 mins followed by addition and measured after 16 hrs by reporter gene-based FRET assay, EC50=0.002μM 31294974
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生物活性

產(chǎn)品描述 GW9662是一種選擇性PPAR拮抗劑,作用于PPARγ,無細胞試驗中IC50為3.3 nM,在細胞中作用于PPARγ比作用于PPARα和PPARδ的功能選擇性強10到600倍。
靶點
PPARγ [1]
(Cell-free assay)
PPARα [1]
(Cell-free assay)
3.3 nM 32 nM
體外研究(In Vitro)
體外研究活性

GW9662在PPARγ上結(jié)合Cys(285),PPARγ是三種PPAR中保守的。GW9662是PPARγ拮抗劑,用于抑制脂肪細胞分化。[1]GW9662抑制PPARγ激活,且抑制人乳腺癌腫瘤細胞系(MCF7, MDA-MB-468, MDA-MB-231)生長,IC50為20 μM-30 μM,說明 GW9662的PPARγ激動劑性能或PPARγ非依賴性生長抑制機制。GW9662(10 μM)聯(lián)用,作用于MDA-MB-231細胞,7天后,統(tǒng)計學(xué)上產(chǎn)生較低的存活細胞數(shù)。[2]在原代鼠骨髓(BMs)和RAW264.7細胞中,PPARγ1配體能夠抑制RANKL誘導(dǎo)的破骨細胞形成。重要的是,GW 9662(2 μM)可逆轉(zhuǎn)這些配體的抑制作用,存在濃度依賴性。GW 9662(2 μM)作用于BMs,阻斷IL-4對破骨細胞形成的抑制。GW 9662(1 μM) 作用于RAW264.7細胞,抑制NF-κB的RANKL激活。[3]GW9662(10 μM)作用于甲狀腺眼病患者的原代前脂肪細胞,抑制激素和激動劑誘導(dǎo)的脂肪細胞分化。[4]

激酶實驗 結(jié)合實驗
人PPARα, PPARγ, 和 PPARδ 配體結(jié)合域 (LBDs) 在E. coli 中表達,作為聚組氨酸標記的融合蛋白。在實驗緩沖液中,通過加入所需受體(15 nM)到鏈霉親和素修飾的SPA珠(0.5 mg/mL)漿中,使受體固定在SPA珠上?;旌衔镌谑覝叵缕胶庵辽?小時,然后在1×103g轉(zhuǎn)速下將珠粒沉淀。除去上清液,輕輕混合,珠粒再懸浮于新鮮的實驗緩沖液。重復(fù)離心/重懸浮步驟被,立即使用所得的受體包被的珠漿液,或貯存于4°C下長達1周再使用。使用[3H]GW2443作為放射性配體,分別測定與PPARα,PPARγ,PPARδ的競爭性結(jié)合。除非另有說明,所有實驗緩沖液為50 mM HEPES (pH 7), 50 mM NaCl, 5 mM CHAPS, 0.1 mg/mL BSA, 和 10 mM DTT。一些實驗中,使用50 mM Tris (pH 8)替換HEPES(pH 7)。
細胞實驗 細胞系 MDA-MB-231細胞
濃度 10 μM
孵育時間 10 天
方法

MDA-MB-231按1×105細胞/25 cm3組織培養(yǎng)瓶的密度接種。24 小時后(第 0天), 使用含GW9662 (10 μM) 或兩者都有的新鮮培養(yǎng)基置換生長培養(yǎng)基。對照燒瓶中為0.1%DMSO。通過胰酶消化,收集第0, 3, 5, 7, 10天的每種處理條件的細胞,使用臺盼藍染色,使用血球儀計算每瓶細胞總數(shù)和存活細胞數(shù)。

實驗圖片 檢測方法 檢測指標 實驗圖片 PMID
Western blot Vimentin / Slug / MMP9 / MMP2 30912275
Growth inhibition assay Cell proliferation 30912275
體內(nèi)研究(In Vivo)
體內(nèi)研究活性

LPS(1 mg/kg,腹腔注射)預(yù)處理大鼠,顯著減弱腎損傷和功能障礙引起的缺血/再灌注(I/R)損傷的所有標記。最值得注意的是,GW9662(1 mg/kg,腹腔注射),可廢除LPS的保護作用。[5]

動物實驗 Animal Models 雄性Wistar大鼠
Dosages 1 mg/kg
Administration 腹腔注射

化學(xué)信息&溶解度

分子量 276.68 分子式

C13H9ClN2O3

CAS號 22978-25-2 SDF Download GW9662 SDF
Smiles C1=CC=C(C=C1)NC(=O)C2=C(C=CC(=C2)[N+](=O)[O-])Cl
儲存條件(自收到貨起)

體外溶解度
批次:

DMSO : 55 mg/mL ( (198.78 mM) ;DMSO吸濕會降低化合物溶解度,請使用新開封DMSO)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

摩爾濃度計算器

體內(nèi)溶解度
批次:

現(xiàn)配現(xiàn)用,請按從左到右的順序依次添加,澄清后再加入下一溶劑

動物體內(nèi)配方計算器

實驗計算

摩爾濃度計算器

質(zhì)量 濃度 體積 分子量

動物體內(nèi)配方計算器(澄清溶液)

第一步:請輸入基本實驗信息(考慮到實驗過程中的損耗,建議多配一只動物的藥量)

mg/kg g μL

第二步:請輸入動物體內(nèi)配方組成(配方適用于不溶于水的藥物;不同批次藥物配方比例不同,請聯(lián)系Selleck為您提供正確的澄清溶液配方)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

計算結(jié)果:

工作液濃度: mg/ml;

DMSO母液配制方法: mg 藥物溶于μL DMSO溶液(母液濃度mg/mL,:如該濃度超過該批次藥物DMSO溶解度,請先聯(lián)系Selleck);

體內(nèi)配方配制方法:μL DMSO母液,加入μL PEG300,混勻澄清后加入μL Tween 80,混勻澄清后加入μL ddH2O,混勻澄清。

體內(nèi)配方配制方法:μL DMSO母液,加入μL Corn oil,混勻澄清。

注意:1. 首先保證母液是澄清的;
2.一定要按照順序依次將溶劑加入,進行下一步操作之前必須保證上一步操作得到的是澄清的溶液,可采用渦旋、超聲或水浴加熱等物理方法助溶。

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