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DBeQ

別名: JRF 12

DBeQ (JRF 12)是一種選擇性的，有效的，可逆的，ATP競爭性的p97抑制劑，IC50為1.5 μM。

DBeQ Chemical Structure

DBeQ Chemical Structure

CAS: 177355-84-9

規(guī)格 價(jià)格 庫存 購買數(shù)量
10mg 1059.99 現(xiàn)貨
25mg 2142.71 現(xiàn)貨
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批次： S719901 DMSO]68 mg/mL]false]Ethanol]5 mg/mL]false]Water]Insoluble]false 純度： 99.79%
99.79

DBeQ相關(guān)產(chǎn)品

相關(guān)信號(hào)通路圖

p97 Signaling Pathways

p97信號(hào)通路圖

生物活性

產(chǎn)品描述 DBeQ (JRF 12)是一種選擇性的，有效的，可逆的，ATP競爭性的p97抑制劑，IC50為1.5 μM。
特性 DBeQ快速有效地誘導(dǎo)caspase激活和細(xì)胞死亡。
靶點(diǎn)
p97 [1]
1.5 μM
體外研究(In Vitro)
體外研究活性 DBeQ作用于HeLa細(xì)胞，抑制UbG76V-GFP, ODD-Luc和Luc-ODC 降解，IC50分別為2.6 μM, 56 μM 和45 μM。DBeQ作用于N-ethylmaleimide-敏感因子（NSF）和26S蛋白酶，效果至少低50倍。DBeQ與ATP競爭性抑制P97，Ki為3.2 μM，說明DBeQ結(jié)合到D2域的活性位點(diǎn)。DBeQ (10 μM) 作用于HEK293細(xì)胞，有效抑制TCRα-GFP降解。DBeQ作用于HEK293細(xì)胞，3小時(shí)內(nèi)誘導(dǎo)CHOP，但不增加p21水平，這種作用存在濃度依賴性。DBeQ (15 μM) 作用于Hela細(xì)胞，誘導(dǎo)LC3-II 在在細(xì)胞核及濃縮膜和胞質(zhì)級(jí)組分中大量積累。DBeQ作用于HeLa細(xì)胞，通過抑制LC3-II自噬降解，而不是誘導(dǎo)自噬，而發(fā)揮作用。DBeQ (10 μM) 作用于HeLa細(xì)胞，快速促進(jìn)caspases-3和-7激活。比激活外在caspase-8通路，DBeQ更有效激活內(nèi)在caspase-9凋亡途徑，而STS激活兩種途徑程度相似。DBeQ作用于 多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞（RPMI8226）比作用于正常人胚肺成纖維細(xì)胞（MRC5）效果強(qiáng)5倍，HeLa細(xì)胞和Hek293細(xì)胞具有中等的敏感性。[1] 在ERAD和自噬途徑內(nèi)，DBeQ干擾底物降解。[2]DBeQ (12 μM) 作用于HeLa細(xì)胞中。抑制細(xì)胞中和，這種作用存在劑量依賴性。DBeQ(10 μM)完全抑制病毒和抗體的降解，但不抑制IgG Fc的降解。[3]DBeQ作用于U20S細(xì)胞，降低基本的和營養(yǎng)刺激的MTOR靶點(diǎn)磷酸化，與Rapamycin 效果類似。[4]
激酶實(shí)驗(yàn) 手動(dòng)ATP酶實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn) Buffer [20 μL 2.5×濃度, 1×= 50 mM Tris (pH 7.4), 20 mM MgCl2, 1 mM EDTA, 和 0.5 mM tris(2-carboxyethyl)phosphine (TCEP)] 加到96孔板中。純化的p97(25 μL 50 μM) 975 μL 1× 實(shí)驗(yàn) Buffer中稀釋，然后每孔中加入10 μL。每孔加入DBeQ (10 μL) 或 5% DMSO (10 μL) ，實(shí)驗(yàn)板在室溫下溫育10分鐘。按如下進(jìn)行ATP酶實(shí)驗(yàn)：每孔加入10 μL 500 μM ATP (pH 7.5), 在室溫下溫育60分鐘, 然后加入50 μL Kinase Glo Plus 試劑,隨后在室溫下黑暗環(huán)境中溫育10分鐘。使用 Analyst AD讀取發(fā)光值。在一個(gè)濃度范圍(0, 0.048, 0.24, 1.2, 6, 和30 μM)按一式三份測定DBeQ。
細(xì)胞實(shí)驗(yàn) 細(xì)胞系 MRC-5, Hek293, HeLa 和 RPMI8226 細(xì)胞
濃度 33 μM
孵育時(shí)間 48 小時(shí)
方法 細(xì)胞按每孔5,000個(gè)接種于384孔白色固體板中。使用熒光素酶siRNA或p97siRNA（10 nM）進(jìn)行細(xì)胞轉(zhuǎn)染48小時(shí)，或在指定時(shí)間使用DBeQ處理。每孔加入Caspase-3/7 Glo, caspase-6 Glo, caspase-8 Glo, 或 caspase-9 ，按500rpm震蕩混合 1分鐘。在室溫下溫育1小時(shí)后，測定發(fā)光信號(hào)。使用CellTiter-Glo試劑測定細(xì)胞存活力。為了測定細(xì)胞活力的IC50，使用七種濃度的MG132或DBeQ（開始于μM的三倍連續(xù)稀釋液）處理細(xì)胞48小時(shí)。擬合發(fā)光信號(hào)歸一化DMSO處理細(xì)胞的百分比，計(jì)算IC50值。

化學(xué)信息&溶解度

分子量 340.42 分子式

C22H20N4
CAS號(hào) 177355-84-9 SDF Download DBeQ SDF
Smiles C1=CC=C(C=C1)CNC2=NC(=NC3=CC=CC=C32)NCC4=CC=CC=C4
儲(chǔ)存條件(自收到貨起)

體外溶解度
批次：

DMSO : 68 mg/mL ( (199.75 mM) ；DMSO吸濕會(huì)降低化合物溶解度，請(qǐng)使用新開封DMSO)

Ethanol : 5 mg/mL (14.68 mM)

Water : Insoluble

摩爾濃度計(jì)算器

體內(nèi)溶解度
批次：

現(xiàn)配現(xiàn)用，請(qǐng)按從左到右的順序依次添加，澄清后再加入下一溶劑

 動(dòng)物體內(nèi)配方計(jì)算器

實(shí)驗(yàn)計(jì)算

摩爾濃度計(jì)算器

質(zhì)量 濃度 體積 分子量

動(dòng)物體內(nèi)配方計(jì)算器（澄清溶液）

第一步：請(qǐng)輸入基本實(shí)驗(yàn)信息（考慮到實(shí)驗(yàn)過程中的損耗，建議多配一只動(dòng)物的藥量）

mg/kg g μL 只

第二步：請(qǐng)輸入動(dòng)物體內(nèi)配方組成（配方適用于不溶于水的藥物；不同批次藥物配方比例不同，請(qǐng)聯(lián)系Selleck為您提供正確的澄清溶液配方）

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

計(jì)算結(jié)果：

工作液濃度： mg/ml；

DMSO母液配制方法： mg 藥物溶于μL DMSO溶液（母液濃度mg/mL，注：如該濃度超過該批次藥物DMSO溶解度，請(qǐng)先聯(lián)系Selleck）；

體內(nèi)配方配制方法：取μL DMSO母液，加入μL PEG300，混勻澄清后加入μL Tween 80，混勻澄清后加入μL ddH2O，混勻澄清。

體內(nèi)配方配制方法：取μL DMSO母液，加入μL Corn oil，混勻澄清。

注意：1. 首先保證母液是澄清的；
2.一定要按照順序依次將溶劑加入，進(jìn)行下一步操作之前必須保證上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用渦旋、超聲或水浴加熱等物理方法助溶。

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