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CFSE

別名: Carboxyfluorescein succinimidyl ester, 5(6)-Carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester, CFDA-SE, 5(6)-CFDA N-succinmidyl ester

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Carboxyfluorescein succinimidyl ester (CFSE, 5(6)-Carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester, CFDA-SE, 5(6)-CFDA N-succinmidyl ester)是一種熒光細胞染料。CFSE常用于檢測細胞增殖和遷移。CFSE具有細胞可透過性,通過其琥珀酰亞胺基團,與細胞內(nèi)賴氨酸殘基及其他胺來源共價結(jié)合。

CFSE Chemical Structure

CFSE Chemical Structure

CAS: 150347-59-4

規(guī)格 價格 庫存 購買數(shù)量
10mM (1mL in DMSO) 958.23 現(xiàn)貨
10mg 795.2 現(xiàn)貨
50mg 3251.94 現(xiàn)貨
200mg 8166.15 現(xiàn)貨
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生物活性

產(chǎn)品描述 Carboxyfluorescein succinimidyl ester (CFSE, 5(6)-Carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester, CFDA-SE, 5(6)-CFDA N-succinmidyl ester)是一種熒光細胞染料。CFSE常用于檢測細胞增殖和遷移。CFSE具有細胞可透過性,通過其琥珀酰亞胺基團,與細胞內(nèi)賴氨酸殘基及其他胺來源共價結(jié)合。
體外研究(In Vitro)
體外研究活性

CFSE工作液的制備
1.1 原液的制備
將 1 mg CFSE 溶解在 0.1794 mL DMSO 中,以獲得 10 mM CFSE。
注意:建議將儲備液保存在-20℃或-80℃避光條件下,并避免反復(fù)凍融。
1.2 CFSE工作液的配制
用無血清細胞培養(yǎng)基或 PBS 稀釋儲備液,得到 5-10 μM 的 CFSE 工作液。
注:請根據(jù)實際情況調(diào)整CFSE工作液濃度。
細胞染色
2.1 對于懸浮細胞:4℃、1000g離心3-5分鐘,棄上清。 用PBS清洗兩次,每次5分鐘。
對于貼壁細胞:棄去細胞培養(yǎng)基,加入胰蛋白酶解離細胞,制成單細胞懸液。 4℃ 1000 g 離心 3-5 分鐘,棄上清。 用PBS清洗兩次,每次5分鐘。
2.2 加入1 mL CFSE工作液,室溫孵育30分鐘。
2.3 400 g、4℃離心3-4分鐘,棄上清。
2.4 用PBS洗滌兩次,每次5分鐘。
2.5 用無血清細胞培養(yǎng)基或PBS重懸細胞,然后用熒光顯微鏡或流式細胞儀檢測。

細胞實驗 細胞系 人類紅白血病細胞系K562, 小鼠淋巴瘤細胞株YAC-1, 人類乳腺癌細胞系MCF-7和人類黑色素瘤細胞系A(chǔ)375
濃度 2 μM, 3 μM, 4 μM, 5 μM, 10 μM和20 μM
孵育時間 5, 6, 7, 8, 10 和 15分鐘
方法

將儲存于DMSO中的5 mM CFDA-SE用PBS稀釋至不同的濃度(2 µM, 3 µM, 4 µM, 5 µM, 10 µM和20 µM),其總體積為1 mL。收集細胞系,用PBS洗滌細胞三次。向細胞中加入不同濃度的CFDA-SE,在37℃培養(yǎng)5, 6, 7, 8, 10和15分鐘(置于搖床)。通過加入等體積的熱失活胎牛血清1 min以終止標記反應(yīng)。用PBS沖洗CFDA-SE標記的細胞兩次,重新計數(shù)。

體內(nèi)研究(In Vivo)
體內(nèi)研究活性

體內(nèi)實驗中,用CFSE標記細胞是可行的,并且對標記細胞及鄰近細胞幾乎沒有毒性。通過外周淋巴器官的T細胞恢復(fù)證明,CFSE在相對長期的遷移實驗中具有一定優(yōu)勢[2]。

動物實驗 Animal Models C57Bl/6小鼠
Dosages 10 μM
Administration 注射到胸腺葉中
NCT Number Recruitment Conditions Sponsor/Collaborators Start Date Phases
NCT02028403 Completed
HIV Infections
National Institute of Allergy and Infectious Diseases (NIAID)
June 2014 Phase 1
NCT01376726 Completed
HIV Infections
National Institute of Allergy and Infectious Diseases (NIAID)|Novartis Vaccines and Diagnostics Inc
July 2011 Phase 1
NCT01029548 Completed
HIV Infections
Barbara Ensoli MD|Istituto Superiore di Sanità
April 2008 --
NCT01024556 Completed
HIV Infection
Barbara Ensoli MD|Istituto Superiore di Sanità
March 2008 --

化學(xué)信息&溶解度

分子量 557.46 分子式

C29H19NO11

CAS號 150347-59-4 SDF Download CFSE SDF
Smiles CC(=O)OC1=CC=C2C(=C1)OC3=C(C=CC(=C3)OC(C)=O)C24OC(=O)C5=CC(=CC=C45)C(=O)ON6C(=O)CCC6=O.CC(=O)OC7=CC=C8C(=C7)OC9=C(C=CC(=C9)OC(C)=O)C8%10OC(=O)C%11=CC=C(C=C%10%11)C(=O)ON%12C(=O)CCC%12=O
儲存條件(自收到貨起) 3年 -20°C(避光) 粉狀

體外溶解度
批次:

DMSO : 100 mg/mL ( (179.38 mM) ;DMSO吸濕會降低化合物溶解度,請使用新開封DMSO)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

摩爾濃度計算器

體內(nèi)溶解度
批次:

現(xiàn)配現(xiàn)用,請按從左到右的順序依次添加,澄清后再加入下一溶劑

動物體內(nèi)配方計算器

實驗計算

摩爾濃度計算器

質(zhì)量 濃度 體積 分子量

動物體內(nèi)配方計算器(澄清溶液)

第一步:請輸入基本實驗信息(考慮到實驗過程中的損耗,建議多配一只動物的藥量)

mg/kg g μL

第二步:請輸入動物體內(nèi)配方組成(配方適用于不溶于水的藥物;不同批次藥物配方比例不同,請聯(lián)系Selleck為您提供正確的澄清溶液配方)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

計算結(jié)果:

工作液濃度: mg/ml;

DMSO母液配制方法: mg 藥物溶于μL DMSO溶液(母液濃度mg/mL,:如該濃度超過該批次藥物DMSO溶解度,請先聯(lián)系Selleck);

體內(nèi)配方配制方法:μL DMSO母液,加入μL PEG300,混勻澄清后加入μL Tween 80,混勻澄清后加入μL ddH2O,混勻澄清。

體內(nèi)配方配制方法:μL DMSO母液,加入μL Corn oil,混勻澄清。

注意:1. 首先保證母液是澄清的;
2.一定要按照順序依次將溶劑加入,進行下一步操作之前必須保證上一步操作得到的是澄清的溶液,可采用渦旋、超聲或水浴加熱等物理方法助溶。

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