通用細(xì)胞凍存液(無(wú)血清)性質(zhì)、用途與生產(chǎn)工藝

簡(jiǎn)介

通用細(xì)胞凍存液(無(wú)血清)主要由培養(yǎng)基、DMSO 等組成，不含血清，是一種經(jīng)典的無(wú)菌凍存液。用于各種哺乳動(dòng)物原代細(xì)胞、傳代細(xì)胞系、雜交瘤細(xì)胞等的凍存。
細(xì)胞冷凍的原理在于盡可能降低細(xì)胞內(nèi)的晶體形成，減少細(xì)胞內(nèi)水凝固所形成的高濃度溶質(zhì)對(duì)細(xì)胞造成的低溫?fù)p傷，從提高細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)的存活率。細(xì)胞凍存的數(shù)量應(yīng)保證復(fù)蘇時(shí)低溫保護(hù)劑獲得稀釋，稀釋后的細(xì)胞濃度扔高于正常傳代的細(xì)胞濃度為宜，這是因?yàn)楫?dāng)?shù)蜏乇Ｗo(hù)劑稀釋以后，該濃度一般不會(huì)對(duì)細(xì)胞造成毒性損傷。

操作步驟

1、培養(yǎng)細(xì)胞至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)晚期，顯微鏡觀察其外觀、形態(tài)、有無(wú)污染等，取狀態(tài)良好的細(xì)胞進(jìn)行凍存操作。如為貼壁生長(zhǎng)細(xì)胞，用胰蛋歸酶消化并用完全培養(yǎng)基終止消化，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù);如為懸浮生長(zhǎng)細(xì)胞，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
2、離心，棄上清。
3、加入適量的通用細(xì)胞凍存液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到/ml，置于凍存管中，密閉、不要擰的太緊，避免彎曲變形。
4、一般進(jìn)行冷凍。亦可采用-20°C 30min, -70°C 過(guò)夜，最后置于液氮罐中長(zhǎng)期存儲(chǔ)。

通用細(xì)胞凍存液(無(wú)血清) 上下游產(chǎn)品信息

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