9054-89-1
中文名稱
超氧化物歧化酶
英文名稱
Superoxide dismutase
CAS
9054-89-1
分子式
NULL
更新日期
2025/01/21 16:30:40
9054-89-1 結(jié)構(gòu)式
基本信息
中文別名
酵素超氧化物
超氧歧化
奧古蛋白
超氧歧化酶
超氧物歧化酶
過氧化物岐化酶
SOD酶(豬)
過氧化物歧化酶
超氧化物歧化酶
英文別名
SODSOD1
SOD-3
hrSOD
EC-SOD
rh-SOD1
Cuprein
ORGOTEIN
Ontosein
Ormetein
所屬類別
生物:重組蛋白物理化學性質(zhì)
外觀性狀超氧化物歧化酶的主要作用是能專一清除體內(nèi)的超氧陰離子O-2,以解除氧陰離子氧化體內(nèi)的成分造成對機體的損害。
其半衰期短,通常僅有6~10min。相對分子質(zhì)量大,不易透過細胞膜、口服易受蛋白不解酶作用而失活。所以臨床應用受到限制。該酶系一種酸性蛋白質(zhì),較穩(wěn)定,能耐熱。Ph7.6~9時穩(wěn)定,ph6以下和12h以上不穩(wěn)定。特別是在ph2以下極度不穩(wěn)定。具有較強的抗胃蛋白酶和胰蛋白酶水解的能力。
無免疫調(diào)節(jié)及鎮(zhèn)痛作用,也不影響前列腺素等炎癥介質(zhì)的合成。
其半衰期短,通常僅有6~10min。相對分子質(zhì)量大,不易透過細胞膜、口服易受蛋白不解酶作用而失活。所以臨床應用受到限制。該酶系一種酸性蛋白質(zhì),較穩(wěn)定,能耐熱。Ph7.6~9時穩(wěn)定,ph6以下和12h以上不穩(wěn)定。特別是在ph2以下極度不穩(wěn)定。具有較強的抗胃蛋白酶和胰蛋白酶水解的能力。
無免疫調(diào)節(jié)及鎮(zhèn)痛作用,也不影響前列腺素等炎癥介質(zhì)的合成。
儲存條件2-8°C
溶解度在含有 0.1 mM EDTA 的 0.05 M 磷酸鉀緩沖液,pH 7.8 中易溶解,濃度為 5 mg/mL。
形態(tài)powder
顏色blue-gray
水溶解性water: 20mg/mL
aqueous buffer, pH 7.5: soluble
aqueous buffer, pH 7.5: soluble
Specific Activity2,000-6,000units/mg protein (biuret)
安全數(shù)據(jù)
應用領(lǐng)域
用途1
用于生化研究,臨床上常用作治療全身性紅斑狼瘡、皮肌炎、類風濕性關(guān)節(jié)炎、硬皮病、自身免疫性溶血性貧血、血小板減少癥等自身免疫性疾病,治療某些心血管疾病,用于防衰老。用途2
超氧化物歧化酶制劑臨床主要用于治療全身性紅斑狼瘡、皮膚炎、硬皮病、類風濕性關(guān)節(jié)炎、自身免疫性溶血性貧血、血小板減少等自身免疫性疾病,治療心肌缺血與缺血再灌注綜合征。也可用于斷肢再植、整形、美容及腎、肝、心臟等器官的保護和移植等手術(shù)過程。但糖尿病、肝炎、尿毒癥患者忌用。不能與酸性或堿性藥物,含醇制劑、金屬鹽和抗生素類藥物配伍。肌注,一次8mg,每周2~4次;關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射,一次4mg,每2周1次;放射性后遺癥,深部肌注,一次4mg,放療后半小時注射。
制備方法
方法1
以牛紅血球為原料,洗滌后分離去除血紅蛋白,再經(jīng)柱層析、透析精制得產(chǎn)品。方法2
收集、乳洗取新鮮豬血,離心,除去黃色血漿,紅細胞用氯化鈉溶液(9g/L即0.9%)離心洗浮,除去洗浮液,反復清洗3次,得干凈紅細胞。新鮮豬血離心除血漿→收集紅血球NaCl洗3次→洗浮干凈紅血球
溶血、去血紅蛋白在溫度50C下,于干凈紅細胞中加入去離子水,攪拌30min,然后在每100ml紅細胞溶液中加入25ml乙醇(95%)和15ml氯仿,攪拌15min,離心去血紅蛋白,收集上清液。
干凈紅血球去離子水;50;30min→溶血}溶血物
乙醇;氯仿→去血紅蛋白上清液
沉淀、熱處理在00C左右,于上清液中加入1.2~1.5倍體積的丙酮,待大量絮狀沉淀產(chǎn)生后,離心,除去上清液,得沉淀物。沉淀物加適量去離子水使其溶解,離心,除去不溶性蛋白,上清液在55~650C熱處理10~15min,離心,除去大量熱變性蛋白,收集黃綠色的上清液。
上清液丙酮;00→沉淀沉淀去離子水;600→熱處理黃綠色澄清液
沉淀、去不溶蛋白、透析在00C將加入適量丙酮于上清液中,使其產(chǎn)生大量絮狀沉淀,離心,除去上清液,收集沉淀,加去離子水充分攪拌使其溶解,離心除去不溶性蛋白,清液置透析袋中動態(tài)透析6~8h,得透析液。
黃綠色澄清液丙酮;去離子水;00→沉淀;去不溶蛋白;透析透析液
吸附、洗脫、濃縮、凍干將透析液加到已用ph7.6磷酸緩沖液(2.5mmol/L)平衡好的DEAE-Sephadex A-50色譜柱上吸附,用ph7.6的磷酸鉀緩沖液(2.5~50mmol/L)進行梯度洗脫,收集肯有超氧化物歧化酶活力的洗脫液,超濾,濃縮,冷凍干燥,即是超氧化物歧化酶成品
透析液DEAE-Sephadex A-50;磷酸鉀緩沖液;Ph7.6→^吸附、洗脫、超濾;濃縮、凍干成品
電泳鑒定條件用瓊脂糖凝膠(5g/L即0.5g)平板電泳,用ph8.4三羥甲基氨基甲烷-甘氨酸為緩沖液,電壓梯度22V/cm,電流3mA/cm,電泳時間35min,固定染色液5g/L(0.5%)氨基黑10B,脫色液為7g/L(7%)乙酸。
常見問題列表
概述
SOD(超氧化物歧化酶)SOD是一系列酶的總稱,是一種源于生命體的活性物質(zhì),能消除生物體在新陳代謝過程中產(chǎn)生的有害物質(zhì)。能夠有效遏制自由基,俘獲自由基,分解自由基,力度大,靶向準,是唯一以自由基為底物的清除酶。
生物化學性質(zhì)
超氧化物歧化酶能夠清除超氧化物,保護細胞免受氧化損傷。超氧化物與非自由基的反應是自旋禁阻的。在生物學系統(tǒng)中,這就意味著它主要是與自身(歧化)或另一個生物學自由基(如一氧化氮)反應。超氧化物陰離子自由基(O2?)能夠較快地(在pH=7時,反應速度為~105 M?1 s?1)歧化為O2和過氧化氫(H2O2)。但超氧化物能夠與特定的分子(如NO自由基)以更快的速度反應,生成過氧亞硝酸根離子(O=N-O-O?),因此超氧化物歧化酶的催化作用就顯得尤為重要。而且,超氧化物的歧化反應與其初始濃度的平方相關(guān),因此雖然高濃度的超氧化物半衰期很短(比如0.1mM濃度下為0.05秒),但低濃度的超氧化物的半衰期相當長(0.1nM濃度下可達14小時)。
對人體作用
超氧化物歧化酶有強大的抗炎作用,臨床用于類風濕關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)病、放射性膀胱炎,可以清除體內(nèi)過量的自由基,提高人體免疫力,延緩衰老;抗疲勞,調(diào)節(jié)女性生理周期,推遲更年期。